一种去除细胞悬浮液中低温保护剂的装置的制造方法_2

文档序号:8781701阅读:来源:国知局
[0045] 在本实用新型的实施例中,所述等渗溶液存储装置和变渗溶液形成装置之间还设 置有第一连接装置,所述第一连接装置的入口和等渗溶液存储装置的出口相连,所述第一 连接装置的出口和变渗溶液形成装置的入口相连。在本实用新型的实施例中,所述第一连 接装置可以为经过灭菌、无污染的装置。在本实用新型的实施例中,所述第一连接装置可以 为橡胶管;在其他的实施例中,所述第一连接装置可以为医用橡胶软管。本实用新型对所述 第一连接装置的尺寸没有特殊的限制,满足实际操作条件即可。
[0046] 在本实用新型的实施例中,所述等渗溶液存储装置和变渗溶液形成装置之间还设 置有第一蠕动泵,所述第一蠕动泵的入口与所述等渗溶液存储装置的出口连接,所述第一 蠕动泵的出口和变渗溶液形成装置的入口连接。本实用新型可通过控制第一蠕动泵的输 送速度来调节变渗溶液的质量浓度,本领域技术人员可根据实际情况调节适合浓度的变渗 溶液;此外,通过控制第一蠕动泵的输送速度还可控制去除细胞悬浮液中低温保护剂的时 间,提高去除效率。在本实用新型的实施例中,所述第一蠕动泵的输送速度可以为130mL/ min~150mL/min;在其他的实施例中,所述第一懦动泵的输送速度可以为135mL/min~ 140mL/min〇
[0047] 本实用新型提供的去除细胞悬浮液中低温保护剂的装置包括细胞悬浮液存储装 置。本实用新型对所述细胞悬浮液存储装置的材质、尺寸和形状没有特殊的限制,满足实际 操作条件即可。在本实用新型的实施例中,所述细胞悬浮液存储装置的材质、尺寸和形状与 上述技术方案所述等渗溶液存储装置的材质、尺寸和形状一致,在此不再赘述。在本实用 新型中,所述细胞悬浮液存储装置的材质和形状可以和等渗溶液存储装置的材质和形状相 同,也可以不同。在本实用新型的优选实施例中,所述细胞悬浮液存储装置可以为密闭的容 器,本实用新型采用密闭的容器作为细胞悬浮液存储装置,可以避免细胞悬浮液受到环境 的污染。在本实用新型的实施例中,所述细胞悬浮液存储装置的容积可以大于200mL。
[0048] 本实用新型对所述细胞悬浮液的种类和来源没有特殊的限制,采用本领域技术人 员熟知的细胞悬浮液即可。在本实用新型的实施例中,所述细胞悬浮液可以为红细胞悬浮 液,所述红细胞悬浮液的制备方法可以为:
[0049] 将静脉血在含有抗凝剂的血袋中冷藏;
[0050] 将冷藏后的静脉血进行离心处理,去除静脉血中的血小板、白细胞和血浆,得到中 间溶液;
[0051] 将所述中间溶液和甘油混合,得到甘油化红细胞悬浮液;
[0052] 将所述甘油化红细胞悬浮液冷冻后复温,得到红细胞悬浮液。
[0053] 在本实用新型的实施例中,将静脉血在含有抗凝剂的血袋中冷藏。本实用新型对 所述静脉血的来源没有特殊的限制,可从血液中心收集健康成人静脉血。在本实用新型的 实施例中,所述抗凝剂可以为CPDA-1。在本实用新型的实施例中,所述血袋可以为PVC血 袋。在本实用新型的实施例中,所述冷藏的温度可以为:TC~5°C。在本实用新型的实施例 中,所述冷藏的时间可以为20小时~30小时。
[0054] 在本实用新型的实施例中,将冷藏后的静脉血进行离心处理,得到中间溶液。在本 实用新型的实施例中,所述离心处理的离心力可以为1600N~1700N。在本实用新型的实施 例中,所述离心处理的时间可以为3分钟~5分钟。在本实用新型的实施例中,所述中间溶 液中红细胞的压积比可以为70%~80%。
[0055] 在本实用新型的实施例中,得到中间溶液后,将所述中间溶液和甘油混合,得到甘 油化红细胞悬浮液。在本实用新型中,所述甘油为低温保护剂。在本实用新型的实施例中, 所述中间溶液和甘油的质量比可以为(1. 5~2. 5) :1。在本实用新型的实施例中,所述甘油 化红细胞悬浮液中甘油的浓度可以为35 %~45 % (w/g),细胞压积比可以为25 %~30 %。
[0056] 在本实用新型的实施例中,得到甘油化红细胞悬浮液后,将所述甘油化红细胞悬 浮液冷冻后复温,得到红细胞悬浮液。在本实用新型的实施例中,可以将甘油化红细胞悬浮 液静置后冷冻。在本实用新型的实施例中,所述静置的时间可以为25分钟~35分钟。在本 实用新型的实施例中,所述冷冻的温度可以为_75°C~_85°C。在本实用新型的实施例中, 所述冷冻的时间可以为2天~7天。
[0057] 在本实用新型的实施例中,可以将冷冻后的甘油化红细胞悬浮液进行恒温水浴复 温。在本实用新型的实施例中,所述复温的温度可以为36°C~38°C。
[0058] 本实用新型提供的去除细胞悬浮液中低温保护剂的装置包括入口分别与变渗溶 液形成装置的出口和细胞悬浮液存储装置的出口相连通的混合装置。在本实用新型中,细 胞悬浮液和变渗溶液在混合装置中混合,形成混合溶液。在本实用新型的优选实施例中,所 述混合装置可以为三通管或三通阀。本实用新型对所述三通管和三通阀的种类和来源没有 特殊的限制,本领域技术人员可根据实际情况选择T型或Y型的三通管或三通阀。在本实 用新型的实施例中,所述混合装置可以为T型三通管。本实用新型采用三通管或三通阀作 为混合装置,可以使变渗溶液和细胞悬浮液在混合装置的作用下形成强烈的湍流,产生较 高的质量传递效率,促进变渗溶液和细胞悬浮液的均匀混合,使细胞悬浮液中的低温保护 剂被快速稀释。
[0059] 在本实用新型的实施例中,所述变渗溶液形成装置和混合装置之间还设置有第二 连接装置,所述第二连接装置的入口与所述变渗溶液形成装置的出口相连,所述第二连接 装置的出口和混合装置的入口相连。在本实用新型中,所述第二连接装置与上述技术方案 所述的第一连接装置一致,在此不再赘述。在本实用新型中,所述第二连接装置可以和第一 连接装置相同,也可以不同。本实用新型对所述第二连接装置的尺寸没有特殊的限制,满足 实际操作条件即可。在本实用新型的优选实施例中,所述第二连接装置可以为医用橡胶软 管。在本实用新型的实施例中,所述医用橡胶软管的管径可以与三通管或三通阀的管径配 合连接。
[0060] 在本实用新型的实施例中,所述变渗溶液形成装置和混合装置之间还设置有第二 蠕动泵,所述第二蠕动泵的入口和变渗溶液形成装置的出口相连,所述第二蠕动泵的出口 和混合装置的入口相连。本实用新型可通过控制第二蠕动泵的输送速度控制去除细胞悬浮 液中低温保护剂的时间,提高去除低温保护剂的效率。在本实用新型的实施例中,所述第二 懦动泵的输送速度可以为130mL/min~150mL/min;在其他的实施例中,所述第二懦动泵的 输送速度可以为135mL/min~140mL/min。
[0061] 在本实用新型的实施例中,所述混合装置和细胞悬浮液存储装置之间还设置有第 三连接装置,所述第三连接装置的入口和细胞悬浮液存储装置的出口连接,所述第三连接 装置的出口和混合装置的入口连接。在本实用新型中,所述第三连接装置与上述技术方案 所述第一连接装置一致,在此不再赘述。在本实用新型中,所述第三连接装置可以和第一 连接装置相同,也可以不同。在本实用新型的实施例中,所述第三连接装置的容积可以为 4mL~6mL〇
[0062] 本实用新型提供的去除细胞悬浮液中低温保护剂的装置包括与混合装置的出口 相连的过滤装置,所述过滤装置的出口与所述细胞悬浮液存储装置的入口相连。在本实用 新型中,所述过滤装置用于将上述混合溶液中的低温保护剂和破损的细胞过滤去除,所述 过滤装置利用透析性较高的透析膜两端的压力差,使所述混合溶液穿过透析膜,将混合溶 液中的水、离子、小分子、中分子和大分子溶质,如低温保护剂、游离血红蛋白和破损的细胞 等过滤去除。在本实用新型的实施例中,所述过滤装置可以为平板膜或超滤器。本实用新 型对所述平板膜和超滤器没有特殊的限制,采用本领域技术人员熟知的平板膜和超滤器即 可;如在本实用新型的实施例中,可以采用日本旭医疗株式会社提供的044R5K-3型号的超 滤器。
[0063] 在本实用新型的实施例中,所述混合装置和过滤装置之间还设置有第四连接装 置,所述第四连接装置的入口和混合装置的出口相连,所述第四连接装置的出口和过滤装 置的入口连接。在本实用新型中,所述第四连接装置与上述技术方案所述第三连接装置一 致,在此不再赘述。在本实用新型中,所述第四连接装置可以和第三连接装置相同,也可以 不同。在本实用新型的实施例中,所述第四连接装置的容积可以为4mL~6mL。
[0064] 在本实用新型的实施例中,所述混合装置和过滤装置之间还设置有第三蠕动泵, 所述第三蠕动泵的入口和混合装置的出口相连,所述第三蠕动泵的出口和过滤装置的入口 相连。本实用新型可通过控制第三蠕动泵的输送速度控制去除细胞悬浮液中低温保护剂的 时间,提高去除低温保护剂的效率。在本实用新型的实施例中,所述第三蠕动泵的输送速 度可以为180mL/min~240mL/min;在其他的实施例中,所述第三懦动泵的输送速度可以为 200mL/min~220mL/min〇
[0065] 在本实用新型的实施例中,所述过滤装置和细胞悬浮液存储装置之间还设置有第 五连接装置,所述第五连接装置的入口和过滤装置的出口连接,所述第五连接装置的出口 和细胞悬浮液存储装置的入口连接。本实用新型对所述第五连接装置没有特殊的限制,满 足实际操作条件即可。在本实用新型中,所述第五连接装置和第一连接装置一致,在此不再 赘述。在本实用新型中,所述第五连接装置可以和第一连接装置相同,也可以不同。
[0066] 在本实用新型中,所述变渗溶液形成装置的出口和混合装置的入口连接,所述细 胞悬浮液存储装置的出口和混合装置的入口连
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