一种抗环瓜氨酸多肽抗体检测试剂盒的制作方法

本实用新型属于一种磁微粒化学发光免疫诊断试剂盒领域，具体涉及一种抗环瓜氨酸多肽抗体检测试剂盒。

背景技术：

抗环瓜氨酸多肽抗体(ccp)，环瓜氨酸肽(ccp)是一条人工合成的含有21个氨基酸的多肽，其氨基酸序列为hqchqestxgrsrgrcgrsgs，其中x代表瓜氨酸，其通过第3和第16位的半胱氨酸巯基氧化而形成环肽。瓜氨酸残基是类风湿关节炎特异的抗中间丝相关蛋白抗体识别表位的必需组成部分。抗环瓜氨酸肽抗体(ant1-ccp)是环状聚丝蛋白的多肽片段，是以igg型为主的抗体，对类风湿性关节炎(ra)具有很好的敏感性和特异性，且抗ccp抗体阳性的ra病人骨破坏较抗ccp抗体阴性者严重。是由类风湿性关节炎(ra)患者的b淋巴细胞分泌的一种特异性较高的自身抗体，不仅可作为鉴别诊断ra与其他风湿病所致关节炎(痛)的指标。还可作为判断ra患者骨关节损伤程度以及评估疗效的指标，而类风湿性关节炎(ra)：是一种以慢性进行性的关节病变为特征的全身性自身免疫疾病，以对称性的多关节炎为临床特征，还会引发血管炎，心肌炎，胸膜炎,抗ccp抗体对类风湿的特异性为96％，在疾病的很早期阶段就可出现阳性，并且具有很高的阳性预示值，而类风湿因子(rf)对其的的特异性较差。

目前报道的关于检测的方法主要有斑点免疫印迹法(diba)、胶体金免疫层析法(gica)、酶联免疫分析(elisa)、等,然而，对于抗ccp抗体的检测，这些方法都存在着不足之处。

1、斑点免疫印迹法

diba法是利用硝酸纤维素膜或乙酸纤维素膜作为固相支持物、进行抗原抗体反应的免疫学检测方法。diba法的特异度略高于elisa法，但其灵敏度低于elisa法，并且diba法检测抗ccp抗体的稳定性及重复性难以控制，检测所需时间较长(2h)。

2、酶联免疫分析法

elisa是用合成的环瓜氨酸肽作为抗原基质检测抗ccp抗体，是在免疫学和细胞工程学基础上发展出来的一种微量检测技术，克服了放射性同位素所引起的危害，并具有明确可读的优点，但是检测时间长，同时需要酶标仪，并由专业技术人员操作，不适合现场筛查。

3、胶体金免疫层析法

gica法是将胶体金标记技术、免疫检测技术和层析分析技术等相结合的固相免疫检测技术，其主要原理是将胶体金作为抗原式跟踪标记物，对检测样本中抗体的性质、含量进行分析。gica法是90年代初期，在免疫渗滤技术的基础上建立起来的一种简易快速的免疫学检测技术。它以条状纤维层材料为固相，通过毛细作用使样品溶液在层析条上泳动，并同时使样品中的待测物与层析材料上待测物的受体发生高特异高亲和性的免疫反应。层析过程中免疫复合物被富集或截留在层析材料的一定区域(检测带)，直接运用可目测的标记物(胶体金)而得到直观的实验现象(显色)，而游离标记物则越过检测带，达到与结合标记物自动分离的目的。利用该种方法得到的检测结果，可重复性差，不能准确得到结果。gica法在实际应用中易受反应温度、湿度、加样量等因素影响。

技术实现要素：

本实用新型目提供了一种抗环瓜氨酸多肽抗体检测试剂盒，解决了抗环瓜氨酸多肽抗体检测的问题。

本实用新型所采用的技术方案为：

一种抗环瓜氨酸多肽抗体检测试剂盒，包括盒体、盖体以及盒体内部的固定垫、试剂管板，固定垫上设置有固定孔，固定孔内安装试剂瓶；所述盒体内腔横向设置有的隔断，所述隔断将盒体的内腔分成前后两个腔体，靠近所述盖体的前腔体为试剂瓶腔，所述固定垫位于试剂瓶腔内；远离所述盖体的后腔体为试剂管板腔，所述试剂管板腔内设置有抽屉，所述试剂管板位于抽屉内，所述试剂管板腔远离盖体的一侧设置有开口；所述抽屉在开口处可前后移动；固定孔设置有7个，固定孔内都安装有试剂瓶；所述试剂瓶分别是生物素化抗原r1试剂瓶、校准品试剂瓶、质控品试剂瓶、ap-二抗r2试剂瓶、磁微粒试剂瓶、化学发光底物试剂瓶、清洗浓缩液试剂瓶。通过将盒体设置成前后腔体，试剂管板腔内设置抽屉；通过抽屉式的方式方便将试剂管板抽出，方便在试剂管板上做检测，而试剂瓶留在盒体内，通过固定垫固定，使得多个试剂瓶整洁的排列，又不容易打翻，本试剂盒结构简单，方便易操作，具有很强的实施价值。

进一步的，抽屉前侧设置有拉手。

进一步的，抽屉的前后两侧的侧板的尺寸与开口尺寸配合；抽屉可在开口处前后移动；所述抽屉的左右两侧设置有固定侧板；所述固定侧板的高度为1cm-2cm。通过两侧设置的固定板远远低于前后侧板，方便试剂管板的拆卸，方便其使用清洗。

进一步的，抽屉底部设置有试剂管板固定座，所述试剂管板固定座上设置有与试剂管板的试剂管排列相同的安装孔，所述安装孔与试剂管板的试剂管底部配合。通过抽屉底部设置试剂管板固定座是的试剂管板在抽屉内更加的稳定。

进一步的，试剂管板固定座固定设置于抽屉底部。固定设置曾加试剂管板固定座的稳定性。

进一步的，所述盖体前侧设置有盖体舌，盖体关闭时，抽屉位于试剂管板腔内，所述盖体舌位于远离试剂瓶腔一侧的侧板与盒体的侧壁之间。将盖体舌卡在远离试剂瓶腔一侧的侧板与盒体的侧壁之间，很好的固定了抽屉。

本实用新型具有如下的优点和有益效果：

1、本实用新型通过将盒体设置成前后腔体，试剂管板腔内设置抽屉；通过抽屉式的方式方便将试剂管板抽出，方便在试剂管板上做检测，而试剂瓶留在盒体内，通过固定垫固定，使得多个试剂瓶整洁的排列，又不容易打翻，本试剂盒结构简单，方便易操作，具有很强的实施价值；

2、本实用新型通过两侧设置的固定板远远低于前后侧板，方便试剂管板的拆卸，方便其使用清洗；

3、本实用新型通过抽屉底部设置试剂管板固定座是的试剂管板在抽屉内更加的稳定。

附图说明

此处所说明的附图用来提供对本实用新型实施例的进一步理解，构成本申请的一部分，并不构成对本实用新型实施例的限定。在附图中：

图1是本实用新型的盒体内部俯视结构示意图。

图2是本实用新型爆炸结构示意图。

附图中标记及对应的零部件名称：

1-盒体，2-固定垫，3-固定孔，4-试剂管板，5-试剂管板盒，6-拉手，7-试剂管板固定座，101-试剂瓶腔，102-试剂管板腔，103-盖体，104-盖体舌，501-侧板，502-固定侧板。

具体实施方式

为使本实用新型的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例和附图，对本实用新型作进一步的详细说明，本实用新型的示意性实施方式及其说明仅用于解释本实用新型，并不作为对本实用新型的限定。

实施例1：

如图1、图2所示，包括盒体1、盖体103以及盒体1内部的固定垫2、试剂管板4，固定垫2上设置有固定孔3，固定孔3内安装试剂瓶；其特征在于：所述盒体1内腔横向设置有的隔断，所述隔断将盒体1的内腔分成前后两个腔体，靠近所述盖体103的前腔体为试剂瓶腔101，所述固定垫2位于试剂瓶腔101内；远离所述盖体103的后腔体为试剂管板腔102，所述试剂管板腔102内设置有抽屉，所述试剂管板4位于抽屉内，所述试剂管板腔102远离盖体的一侧设置有开口；所述抽屉在开口处可前后移动。

实施时，抽屉前侧设置有拉手6。抽屉的前后两侧的侧板501的尺寸与开口尺寸配合；抽屉可在开口处前后移动；所述抽屉的左右两侧设置有固定侧板502；所述固定侧板502的高度为1cm-2cm。抽屉底部设置有试剂管板固定座7，所述试剂管板固定座7上设置有与试剂管板4的试剂管排列相同的安装孔，所述安装孔与试剂管板4的试剂管底部配合。试剂管板固定座7固定设置于抽屉底部。盖体103前侧设置有盖体舌104，盖体103关闭时，抽屉位于试剂管板腔102内，所述盖体舌104位于远离试剂瓶腔101一侧的侧板501与盒体1的侧壁之间。

检测时采用全自动磁微粒化学发光检测方法，选取碱性磷酸酶(ap)-金刚烷(amppd)体系，具有稳定性好，具灵敏度和特异度高、重复性好、检测范围宽、易于自动化等优势同时，大大缩短了检测时间，完成一个测试所需的总时间近在20分钟以内，而且操作简易方便，真正实现了检测全自动化。

抗ccp抗体检测试剂盒的主要成分如下：

抗ccp抗体检测试剂盒主要成分

生物素化试剂：将生物素与抗ccp抗体分子的多肽反应；

磁微粒试剂：所述的磁微粒直径在0.1-0.5μm，具有超顺磁性，表面含有亲和素sa基团；

碱性磷酸酶ap标记二抗：将碱性磷酸酶ap与二抗偶联；

化学发光底物：主要成分为金刚烷(amppd)，在碱性磷酸酶的催化下释放光子。

本试剂盒的性能评估：

(1)样本比对

阴、阳性符合率：本发明试剂盒308例标本检测抗ccp抗体的含量，并与国外知名公司同类产品进行临床比对(表2)。结果表明，本发明抗ccp试剂盒阳性符合率90％(54/60)，阴性符合率95.16％(236/248)，说明本试剂盒临床符合率高。

表2：抗ccp抗体检测试剂盒临床样本比对

(2)灵敏度：本检测试剂盒的lod为0.1u/ml，为elasa方法的10倍

(3)线性：将一份高值血清按照1/2、1/4、1/8、1/16、1/32、1/64、1/128，用试剂盒检测稀释样本，以稀释比例和检测浓度做回归曲线。求出相关系数r的平方值。抗ccp抗体试剂盒的线性相关系数为0.9999，结果大于0.9900，斜率为0.9918。

(4)准确度：通过加样回收评估其准确度。以一份高值血清、一份中值血清、一份低值血清按照1:9添加到两份基础血清中，计算其浓度。血清加样回收率在85％-115％之间。

注：加样回收率＝添加后样板值/(0.1*样本a+0.9样本b)*100％

(5)精密度：对三种浓度的质控品进行检测，每天两次，分上下午检测，每次进行4个重复，共检测10天，每种浓度共测定80次，计算变异系数，结果表明变异系数在10％以内。

(6)稳定性：抗ccp抗体检测试剂盒(磁珠，r1，r2)37℃放置7天，测定高、中、低3种浓度质控的信号保留率。结果均＞95％，将试剂表明试剂盒稳定好，符合临床要求。

(7)特异性：对高、中、低不同浓度值的血清添加不同浓度的胆红素、血红蛋白、类风湿因子、血脂、rf、hama检测结果显示，添加物质对本试剂盒检测结果没有影响。

以上所述的具体实施方式，对本实用新型的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本实用新型的具体实施方式而已，并不用于限定本实用新型的保护范围，凡在本实用新型的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。