1.官能化色谱介质,其包含:
i)聚合物纳米纤维(20)的至少一个非织造层(10),其包含多个纳米纤维-纳米纤维熔合点(30);
ii)覆盖所述聚合物纳米纤维和所述纳米纤维-纳米纤维熔合点的接枝聚合物涂层;
iii)共价结合至所述接枝聚合物涂层的多个配体基团,其中所述配体基团能够与靶生物分子相互作用。
2.权利要求1的官能化色谱介质,其中所述接枝聚合物涂层是保形涂层。
3.官能化色谱介质,其包含:
i)聚合物纳米纤维(20)的至少一个非织造层(10),其包含多个纳米纤维-纳米纤维熔合点(30);
ii)共价拴系至所述聚合物纳米纤维的多个接枝聚合物分子;
iii)共价结合至所述接枝聚合物分子的多个配体基团,其中所述配体基团能够与靶生物分子相互作用。
4.任何前述权利要求的官能化色谱介质(120),其具有通过聚合物纳米纤维之间的间隙形成的开孔结构而彼此流体连接的第一侧(130)和第二侧(160)。
5.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其中所述聚合物纳米纤维是单丝。
6.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其中所述聚合物纳米纤维具有100-800nm,例如100-600nm的直径。
7.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其中具有所述接枝聚合物分子或接枝聚合物涂层的所述聚合物纳米纤维具有100-1000nm,例如100-700nm或200-700nm的直径。
8.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其具有200-800nm的平均孔隙大小。
9.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其具有0.9–1.2µm,例如1.0–1.2µm的泡点孔隙大小。
10.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其具有0.2–0.4µm的最小孔隙大小。
11.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其具有0.3–0.5µm的平均流动孔隙(mfp)大小。
12.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其具有50-90%的孔隙体积分数。
13.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其具有100-2000µmol配体/g干官能化色谱介质的配体密度。
14.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其具有至少30mg靶生物分子或免疫球蛋白/ml官能化色谱介质的靶生物分子、例如免疫球蛋白的动态结合容量。
15.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其中当粘度小于1.2mpas的水性液相以1-640倍介质体积/分钟的流速通过厚度0.05-10mm的官能化色谱介质时,经过所述介质的压降小于1mpa/mm床高。
16.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其中当粘度小于1.2mpas的水性液相以1-640倍介质体积/分钟的流速通过厚度0.05-10mm的官能化色谱介质时,经过所述介质的压降小于2mpa。
17.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其中当ph5-8的水性缓冲液以0.4s停留时间通过官能化色谱介质时,当缓冲液的电导率在3-90ms/cm的区间内变化时,经过官能化色谱介质的压降变化小于0.07mpa/mm床高。
18.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其中所述聚合物纳米纤维包含再生纤维素。
19.权利要求18的官能化色谱介质,其中所述聚合物纳米纤维包含皂化的乙酸纤维素。
20.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其中接枝聚合物分子或接枝聚合物涂层包含单点共价拴系至所述聚合物纳米纤维的聚合物分子。
21.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其中接枝聚合物分子或接枝聚合物涂层包含支化的聚合物分子。
22.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其中接枝聚合物分子或接枝聚合物涂层包含缩水甘油单体残基。
23.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其中接枝聚合物分子或接枝聚合物涂层包含二乙烯基砜单体残基。
24.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其中所述配体基团是弱或强阴离子交换配体基团。
25.权利要求1-23中任一项的官能化色谱介质,其中所述配体基团是弱或强阳离子交换配体基团。
26.权利要求1-23中任一项的官能化色谱介质,其中所述配体基团是疏水相互作用色谱配体基团。
27.权利要求1-23中任一项的官能化色谱介质,其中所述配体基团是混合模式色谱配体基团。
28.权利要求1-23中任一项的官能化色谱介质,其中所述配体基团是亲和配体基团。
29.权利要求28的官能化色谱介质,其中所述配体基团包含蛋白a的天然或突变的免疫球蛋白结合结构域。
30.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其是碱稳定的。
31.任何前述权利要求的官能化色谱介质,其包含聚合物纳米纤维的多个所述非织造层的叠层。
32.权利要求31的官能化色谱介质,其包含多个层间纳米纤维-纳米纤维熔合点,其将至少两个所述层彼此结合。
33.色谱柱(110),其包含任何前述权利要求的官能化色谱介质(20)。
34.权利要求33的色谱柱(110),其中所述官能化色谱介质(120)的第一侧(130)通过第一分配器结构(150)流体连接至入口(140),和其中所述官能化色谱介质的第二侧(160)通过第二分配器结构(180)流体连接至出口(170)。
35.权利要求33或34的色谱柱,其被预灭菌。
36.分离一种或多种靶生物分子的方法,其包括以下步骤:
i)提供权利要求1-32中任一项的官能化色谱介质或权利要求33-35中任一项的色谱柱;和
ii)使包含靶生物分子的流动相通过所述官能化色谱介质或色谱柱。
37.权利要求36的方法,其中在步骤ii)中停留时间小于1分钟,例如0.1-30秒。
38.权利要求36或37的方法,其中所述靶生物分子在步骤ii)获得的流通液中回收。
39.权利要求38的方法,其中在步骤ii)后,将一种或多种再生液通过所述官能化色谱介质或色谱柱,和其中重复进行步骤ii)。
40.权利要求38或39的方法,进一步包括在步骤ii)后的以下步骤:
iii)使洗涤液通过所述官能化色谱介质或色谱柱;
iv)使洗脱缓冲液通过所述官能化色谱介质或色谱柱;和
v)在步骤iv)获得的洗出液中回收所述靶生物分子。
41.权利要求40的方法,进一步包括在步骤v)后使一种或多种再生液通过所述官能化色谱介质或色谱柱的步骤vi)。
42.权利要求41的方法,其中步骤ii)–vi)重复进行至少一次,例如至少五次。
43.权利要求39或41-42中任一项的方法,其中所述一种或多种再生液中的至少一种包含至少0.1mnaoh或koh。
44.权利要求40-43中任一项的方法,其作为具有多个根据权利要求33-35中任一项的色谱柱的周期逆流色谱方法进行。