一种血清外泌体去除装置的制作方法

1.本实用新型属于生物医学工程技术领域，具体而言，涉及一种血清外泌体去除装置。


背景技术：

2.外泌体是一种具有多形性的囊泡样小体，发源于细胞内吞系统中的多囊泡体，可包含细胞质内的蛋白、脂质、mrna、mirna、lncrna、dna等多种物质。外泌体是一种细胞内分泌至胞外的直径为30-120nm的膜性囊泡。外泌体最初发现是被认为是细胞排泄的垃圾。直到2007年发现外泌体可以作为细胞间基因交流的机制，外泌体才引起科学家们的关注。人类几乎所有的细胞都能产生和分泌外泌体，在血液、尿液、唾液、脑脊液等生物样品中均可检测到外泌体。
3.最新的研究发现，可以将药物或者其他功能物质，例如mirna等装载进细胞分泌的外泌体中，由外泌体靶向将这些药物或者功能物质运输到指定位置。原来获得外泌体的这些细胞需要培养在含有无外泌体血清的培养基中。目前要准备无外泌体血清通常使用超高速离心或者是密度梯度离心，这种方法有一个限制因素，那就是需要配备超高速离心机，而这种设备的价格是非常昂贵的，因此限制了一些中小型实验室获得血清来制作培养基。
4.有鉴于此，特提出本实用新型。


技术实现要素：

5.本实用新型的目的在于提供一种血清外泌体去除装置，可以高效、价格低廉，结构件的情况下将血清中的外泌体去除。
6.为了实现上述技术目的，本实用新型提供了以下技术方案：
7.本实用新型提供了一种血清外泌体去除装置，包括若干层析柱，所述层析柱之间通过套管串联连接，所述套管的形状呈8字形，两个端口的直径大，中间的管内直径小；
8.顶端的所述层析柱的上方设置有血清上样口用以将血清溶液倒入所述层析柱；
9.底端的所述层析柱的下方设置有血清收集瓶用以将去除外泌体的血清溶液收集。
10.现有技术中要么是需要用到离心机，价格昂贵；要么过滤效果不好，影响实验效果。
11.本实用新型通过增加若干层析柱和层析柱之间用套管串联连接，结构简单，价格便宜；血清溶液从最上边的层析柱逐一过滤后进入到血清收集瓶，这样的过滤效果好，可以有效去除血清中的外泌体。之所以套管的形状呈8字形是因为可以有效地控制过滤的进程。
12.优选的，所述血清上样口为倒锥形，上边的开口大，与所述层析柱连接的开口小。
13.优选的，底端的所述层析柱连接有收集口，所述收集口为漏斗形。
14.优选的，所述层析柱之内填充有填料，所述填料偶联有识别外泌体表面标志物的抗体。层析柱的直径大小不影响分离度，血清用量大，可加大柱的直径，如直径大于2厘米。分离度取决于填料高度，为分离不同组分，填料必须有适宜的高度，分离度与填料高度的平
方根相关，但由于填料过高挤压变形阻塞，一般不超过10厘米。分离时用短柱，一般填料高度2-3厘米，填料与直径的比为5:1
─
10:1，填料体积为血清溶液体积的4-10倍。
15.优选的，所述抗体去除的外泌体表达cd9、cd63、cd81和tsg101。抗体去除外泌体的种类包括但不仅限于cd9、cd63、cd81和tsg101，不同的层析柱填料里可以偶联有不同的抗体，每个层析柱会有一个抗体来去除血清外泌体。
16.优选的，所述层析柱的外壁为透光材质，所述层析柱内装有荧光料用以使肉眼可以观测并监控整个层析过程。现有技术在去除血清中的外泌体时，不能通过检测光源的照射使层析柱内的装填的荧光填料和待分离血清显示出暗色荧光带，即无法有效解决血清中外泌体分离过程中的实时可视化在线观测问题，造成分离过程盲目。本实用新型的层析柱选用透光材质，如有机玻璃。当进行层析操作时，在层析柱内装入荧光填料，用检测光源照射，从而可以使柱内所装填的荧光填料显示荧光，特别是可以使层析柱内被分离并上下互相拉开分层的各单一化学组分在检测光源下显示相应的环状荧光带，使肉眼可以观测并监控整个柱层析过程，从而使各组分的分离效果清晰可见。如果通过观测发现实时的分离效果不好，还可以指导使用者随时调整血清的量来控制进行柱层析分离，从而使各组分被成功的可控的分离出来，此层析柱使用外置检测光源。
17.优选的，所述套管的材质为聚四氟乙烯。之所以选择聚四氟乙烯这种材料，是因为它具有抗酸抗碱、抗各种有机溶剂的特点，几乎不溶于所有的溶剂。同时，聚四氟乙烯具有耐高温的特点，它的摩擦系数极低，所以可作润滑作用之余，亦成为了易清洁水管内层的理想涂料。这样在使用去除装置完成后也不用费力清洁，省时省力。
18.与现有技术相比，本实用新型的血清外泌体去除装置，结构简单、过滤效果好，可以进行大批量样本操作，并且可以重复使用。
附图说明
19.通过阅读下文优选实施方式的详细描述，各种其他的优点和益处对于本领域普通技术人员将变得清楚明了。附图仅用于示出优选实施方式的目的，而并不认为是对本实用新型的限制。而且在整个附图中，用相同的参考符号表示相同的部件。在附图中：
20.附图1为实施例提供的一种血清外泌体去除装置的结构示意图。
21.其中：10、层析柱；20、套管；30、血清上样口；40、血清收集瓶；50、收集口。
具体实施方式
22.下面将结合附图和具体实施方式对本实用新型的技术方案进行清楚、完整地描述，但是本领域技术人员将会理解，下列所描述的实施例是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例，仅用于说明本实用新型，而不应视为限制本实用新型的范围。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
23.在本实用新型的描述中，需要说明的是，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是
为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
24.在本实用新型的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本实用新型中的具体含义。
25.为了更加清晰的对本实用新型中的技术方案进行阐述，下面以具体实施例的形式进行说明。
26.实施例
27.参阅图1所示，为本实施例提供的一种血清外泌体去除装置的结构示意图。本实施例中一共有4个层析柱10，每个层析柱10之间填充有填料，但是4个不同的层析柱10内的填料分别偶联有不同的抗体，最上面的层析柱10内抗体去除的是cd63，接着从上往下依次是cd81、cd9和tsg101。外泌体形成了一种特殊的细胞间信息传递系统，它不仅影响细胞的生理状态，而且还与多种疾病的发生与发展密切相关。因此当血清作为细胞培养液作用时，需要去除血清中的外泌体。
28.首先将要处理的血清溶液从血清上样口30倒入第一个层析柱10，因为层析柱10之间连接有套管20，所以血清溶液通过套管20进入第二个层析柱10，紧接着进入到第三个层析柱10和第四个层析柱10，在第四个层析柱10的底部连接着的收集口50，收集口50将去除好外泌体的血清送往至血清收集瓶40进行存储。
29.其中层析柱10的外壁为透光材质，层析柱10内装有荧光料用以使肉眼可以观测并监控整个层析过程；
30.套管20的材质为聚四氟乙烯。之所以选择聚四氟乙烯这种材料，是因为它具有抗酸抗碱、抗各种有机溶剂的特点，几乎不溶于所有的溶剂。
31.最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本实用新型的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本实用新型进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本实用新型各实施例技术方案的范围。