一种埃博霉素D的储藏方法与流程

本发明涉及生物制品技术领域，具体为一种埃博霉素d的储藏方法。

背景技术：

1993年发现的埃博霉素是一种具有优异效果的大环内酯类化合物，其中的埃博霉素d是一种比埃博霉素a和埃博霉素b更有效的体外微管稳定剂，埃博霉素d在人类肿瘤细胞系中显示出了强大的细胞毒性，其效力与紫杉醇相似但效果更强，在耐药细胞系中也明显优于紫杉醇，因此制备和储存埃博霉素d的方法就显得尤为重要。

现有的储藏方法存在着步骤繁琐，对于操作人员的专业要求比较高，且耗费的物料过多浪费资源的问题。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种埃博霉素d的储藏方法，以解决上述背景技术中提出的步骤繁琐，对于操作人员的专业要求比较高，且耗费的物料过多浪费资源的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种埃博霉素d的储藏方法，该埃博霉素d的储藏方法步骤具体如下：

s1：灭菌处理：先将灭菌容器进行灭菌后冷却至室温，然后将埃博霉素d粉末置于灭菌容器中，对灭菌容器加压灭菌，灭菌压强设置在1×100～1×120pa，灭菌时间设置为20～30分钟，然后恢复至标准大气压；

s2：制备溶解液：将溶解液按照设定的量等比例称取后倒入经过高温灭菌处理的锥形瓶中，搅拌10～20分钟；

s3：溶解粉末：将步骤s2制得的溶解液通入步骤s1的灭菌容器中，静置3～5小时；

s4：更换储存容器：将透明玻璃罐清洗干净并进行高温灭菌处理后，将步骤s3中溶解的溶液通过无菌导管引流到透明玻璃罐中，然后将透明玻璃盖密封后置于冷柜中，冷柜内部温度设置在-40～-30℃，冷冻时间设置在10-15小时；

s5：更改储存温度：将冷柜的内部温度更改为-20摄氏度，并为冷柜配备应急电源后封存。

优选的，所述步骤s1中灭菌容器的灭菌温度、步骤s2中锥形瓶的灭菌温度和步骤s4中透明玻璃罐的灭菌温度均为100～150℃。

优选的，所述步骤s2中进行搅拌的速度为30r/min。

优选的，所述溶解液的原料包括水和乙酸乙酯。

优选的，所述溶解液的原料按照质量比重分别为：水(95-98.5)份和乙酸乙酯(1.5-5)份。

优选的，所述无菌导管事先经过高温灭菌处理。

优选的，所述引流过程采用负压引流的方式。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1)只需五个步骤即可完成埃博霉素d的储存，操作人员只需要具备基本的生物科研素养即可；

2)消耗的物料除容器外，只有水和乙酸乙酯，节约资源；

3)溶解于乙酸乙酯中的溶液容易分离出来，方便取用。

附图说明

图1为本发明储藏方法流程图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

在本发明的描述中，需要说明的是，术语“上”、“下”、“内”、“外”、“顶/底端”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。

在本发明的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“设置有”、“套设/接”、“连接”等，应做广义理解，例如“连接”，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。

实施例：

请参阅图1，本发明提供一种技术方案：一种埃博霉素d的储藏方法，该埃博霉素d的储藏方法步骤具体如下：

s1：灭菌处理：先将灭菌容器在100～150℃温度下进行灭菌后冷却至室温，然后将埃博霉素d粉末置于灭菌容器中，对灭菌容器加压灭菌，灭菌压强设置在1×100～1×120pa，灭菌时间设置为20～30分钟，然后恢复至标准大气压，这样可以有效的将埃博霉素d粉末进行灭菌并不破坏埃博霉素d粉末的分子结构；

s2：制备溶解液：先将锥形瓶在100～150℃温度下进行灭菌，再将溶解液按照设定的量等比例称取后倒入经过高温灭菌处理的锥形瓶中，溶解液的原料包括水和乙酸乙酯，溶解液的原料按照质量比重分别为：水(95-98.5)份和乙酸乙酯(1.5-5)份，用30r/min的转速搅拌10～20分钟，使得乙酸乙酯充分溶解在水中形成乙酸乙酯溶液；

s3：溶解粉末：将步骤s2制得的溶解液通入步骤s1的灭菌容器中，静置3～5小时，使得埃博霉素d粉末充分溶解在乙酸乙酯溶液中形成混合溶液，能够保持化学性质的稳定；

s4：更换储存容器：将透明玻璃罐和无菌导管清洗干净并在100～150℃温度下进行高温灭菌处理后，将步骤s3中溶解的溶液通过无菌导管通过负压引流的方式引流到透明玻璃罐中，然后将透明玻璃盖密封后置于冷柜中，冷柜内部温度设置在-40～-30℃，冷冻时间设置在10-15小时，以对混合溶液中残存的细菌进行消灭；

s5：更改储存温度：将冷柜的内部温度更改为-20摄氏度，并为冷柜配备应急电源后封存，完成埃博霉素d的储存。

实施例一：

该埃博霉素d的储藏方法步骤具体如下：

s1：灭菌处理：先将灭菌容器在100～150℃温度下进行灭菌后冷却至室温，然后称取100g埃博霉素d粉末置于灭菌容器中，对灭菌容器加压灭菌，灭菌压强设置在1×115pa，灭菌时间设置为25分钟，然后恢复至标准大气压，这样可以有效的将埃博霉素d粉末进行灭菌并不破坏埃博霉素d粉末的分子结构；

s2：制备溶解液：先将锥形瓶在100～150℃温度下进行灭菌，再将溶解液按照设定的量等比例称取后倒入经过高温灭菌处理的锥形瓶中，溶解液的原料包括水和乙酸乙酯，溶解液的原料按照质量比重分别为：水960ml和乙酸乙酯40ml，用30r/min的转速搅拌18分钟，使得乙酸乙酯充分溶解在水中形成乙酸乙酯溶液；

s3：溶解粉末：将步骤s2制得的溶解液通入步骤s1的灭菌容器中，静置4.5小时，使得埃博霉素d粉末充分溶解在乙酸乙酯溶液中形成混合溶液，能够保持化学性质的稳定；

s4：更换储存容器：将透明玻璃罐和无菌导管清洗干净并在100～150℃温度下进行高温灭菌处理后，将步骤s3中溶解的溶液通过无菌导管通过负压引流的方式引流到透明玻璃罐中，然后将透明玻璃盖密封后置于冷柜中，冷柜内部温度设置在-37℃，冷冻时间设置在14小时，以对混合溶液中残存的细菌进行消灭；

s5：更改储存温度：将冷柜的内部温度更改为-20摄氏度，并为冷柜配备应急电源后封存，完成埃博霉素d的储存。

实施例二：

该埃博霉素d的储藏方法步骤具体如下：

s1：灭菌处理：先将灭菌容器在100～150℃温度下进行灭菌后冷却至室温，然后称取10g埃博霉素d粉末置于灭菌容器中，对灭菌容器加压灭菌，灭菌压强设置在1×105pa，灭菌时间设置为23分钟，然后恢复至标准大气压，这样可以有效的将埃博霉素d粉末进行灭菌并不破坏埃博霉素d粉末的分子结构；

s2：制备溶解液：先将锥形瓶在100～150℃温度下进行灭菌，再将溶解液按照设定的量等比例称取后倒入经过高温灭菌处理的锥形瓶中，溶解液的原料包括水和乙酸乙酯，溶解液的原料按照质量比重分别为：水97.5ml和乙酸乙酯2.5ml，用30r/min的转速搅拌13分钟，使得乙酸乙酯充分溶解在水中形成乙酸乙酯溶液；

s3：溶解粉末：将步骤s2制得的溶解液通入步骤s1的灭菌容器中，静置3小时，使得埃博霉素d粉末充分溶解在乙酸乙酯溶液中形成混合溶液，能够保持化学性质的稳定；

s4：更换储存容器：将透明玻璃罐和无菌导管清洗干净并在100～150℃温度下进行高温灭菌处理后，将步骤s3中溶解的溶液通过无菌导管通过负压引流的方式引流到透明玻璃罐中，然后将透明玻璃盖密封后置于冷柜中，冷柜内部温度设置在-32℃，冷冻时间设置在12小时，以对混合溶液中残存的细菌进行消灭；

s5：更改储存温度：将冷柜的内部温度更改为-20摄氏度，并为冷柜配备应急电源后封存，完成埃博霉素d的储存。

实施例三：

该埃博霉素d的储藏方法步骤具体如下：

s1：灭菌处理：先将灭菌容器在100～150℃温度下进行灭菌后冷却至室温，然后称取5g埃博霉素d粉末置于灭菌容器中，对灭菌容器加压灭菌，灭菌压强设置在1×100pa，灭菌时间设置为20分钟，然后恢复至标准大气压，这样可以有效的将埃博霉素d粉末进行灭菌并不破坏埃博霉素d粉末的分子结构；

s2：制备溶解液：先将锥形瓶在100～150℃温度下进行灭菌，再将溶解液按照设定的量等比例称取后倒入经过高温灭菌处理的锥形瓶中，溶解液的原料包括水和乙酸乙酯，溶解液的原料按照质量比重分别为：水98.5ml和乙酸乙酯1.5ml，用30r/min的转速搅拌10分钟，使得乙酸乙酯充分溶解在水中形成乙酸乙酯溶液；

s3：溶解粉末：将步骤s2制得的溶解液通入步骤s1的灭菌容器中，静置3小时，使得埃博霉素d粉末充分溶解在乙酸乙酯溶液中形成混合溶液，能够保持化学性质的稳定；

s4：更换储存容器：将透明玻璃罐和无菌导管清洗干净并在100～150℃温度下进行高温灭菌处理后，将步骤s3中溶解的溶液通过无菌导管通过负压引流的方式引流到透明玻璃罐中，然后将透明玻璃盖密封后置于冷柜中，冷柜内部温度设置在-30℃，冷冻时间设置在10小时，以对混合溶液中残存的细菌进行消灭；

s5：更改储存温度：将冷柜的内部温度更改为-20摄氏度，并为冷柜配备应急电源后封存，完成埃博霉素d的储存。

以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点,对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明；因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内，不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。