本发明属于生物应用技术领域，特别涉及一种用于保护并稳定粪便中血红蛋白的收集液及其应用。
背景技术：
“大便隐血”指的是每日消化道出血量小于5ml，有许多疾病如：结直肠癌、结肠炎、消化道溃疡、肠息肉，胃肠憩室等疾病早期均无症状，仅有大便隐血。早期结直肠癌是指病灶限于粘膜层或粘膜下层而未侵及肌层者，往往为无症状阶段，不会主动求诊，对高危人群筛查及定期检查是发现早期癌患者的重要方式。临床研究证实，87％的消化道肿瘤病人便隐血试验为阳性；微量出血，粪便中带有微量血红蛋白是早期大肠癌唯一可以查出的异常现象，所以对粪便中微量血红蛋白的检出具有重要的意义。及早发现早期癌患者，并早期进行治疗，其远期生存率可达91％。对于其中病灶局限者甚至可以保留具有生理功能的肛门，极大地减少了患者的痛苦，提高了生活质量。因此，在美国等许多发达国家推荐：大于50岁人群每年定期做一次大便隐血检查，对其中阳性患者再作进一步精密检查。
目前市面上用于检测大便隐血最大的瓶颈在于粪便收集液保存时间不长，特别对于血红蛋白比较低的标本，抗原效价降低很快。但是对于检测机构或者人员来说，收集到的新鲜标本往往需要放置1天一天及以上时间来检测，而这对于粪便收集液的要求就很高。本发明开发的大便隐血检测试剂粪便收集液，对粪便中的血红蛋白有较好的保护及稳定作用，新鲜收集的标本在常温下可以放置7天，为国内首创，填补国内这一领域的空白。
技术实现要素：
本发明的目的是为解决上述问题，旨在提供一种可以保护并稳定粪便中血红蛋白的溶液配方。
本发明用于保护并稳定粪便中血红蛋白的收集液，包括螯合剂、防腐剂、封闭剂、缓冲剂、聚乙二醇，各组分在所述溶液中的浓度分别为25～45g/l、0.2～1g/l、1～10g/l、6～12g/l、25～30g/l。
所述的用于保护并稳定粪便中血红蛋白的收集液的ph值为9.4～9.5。
所述的螯合剂为3-羟基-2,2′亚氨基二琥珀酸四钠(hids)、乙二胺四乙酸(edta)、三聚磷酸钠中的两种混合物。
所述的防腐剂为proclin150和proclin300的混合物；
所述的封闭剂为小牛血清白蛋白、酪蛋白中的一种；
所述的缓冲剂为三羟甲基氨基甲烷tris、磷酸氢二钠、硼砂中的一种；
作为优选，所述的用于保护并稳定粪便中血红蛋白的收集液是由3-羟基-2,2′亚氨基二琥珀酸四钠(hids)、乙二胺四乙酸(edta)、proclin300、proclin150、三羟甲基氨基甲烷tris、小牛血清白、聚乙二醇、纯化水组成，hids、edta、proclin300、proclin150、tris、小牛血清白蛋白、聚乙二醇在所述溶液中的浓度分别为35g/l、10g/l、0.2g/l、0.2g/l、6.05g/l、1g/l、25g/l。
本发明的另一个目的是提供上述收集液在粪便检测前预处理中的应用。
本发明将新鲜粪便与上述收集液按50mg:2ml比例混合均匀后可置于常温(7天)、2-8℃(1个月)、-20℃(6个月)保存。
本发明所述的制备大便隐血收集液的方法，具体步骤如下：
1)按配方称取各组分；
2)先加入700ml的纯化水到容器中，将步骤1)中的各组分按照以下顺序依次加入：缓冲剂、封闭剂、螯合剂、聚乙二醇、防腐剂混合均匀后，定容至1l，调整ph至9.4～9.5，得到大便隐血收集液。
本发明收集液可以使得粪便中的血红蛋白在该保护液中更加稳定，保存时间更长。
具体实施方式
以下实施例用于解释本发明，而不用于限制本发明。
对比例1：
先加入70ml的纯化水到容器中，然后再依次加入0.605g三羟甲基氨基甲烷tris、1g小牛血清白蛋白、3.5g3-羟基-2,2′亚氨基二琥珀酸四钠(hids)、2.5g聚乙二醇、0.02mlproclin150、0.02mlproclin300，混合均匀后定容至100ml，调整ph至9.4，得到大便隐血收集液。
对比例2：
先加入70ml的纯化水到容器中，然后再依次加入0.605g三羟甲基氨基甲烷tris、1g小牛血清白蛋白、1g乙二胺四乙酸(edta)、2.5g聚乙二醇、0.02mlproclin150、0.02mlproclin300，混合均匀后定容至100ml，调整ph至9.4，得到大便隐血收集液。
实施例1：
先加入70ml的纯化水到容器中，然后再依次加入0.605g三羟甲基氨基甲烷tris、1g小牛血清白蛋白、3.5g3-羟基-2,2′亚氨基二琥珀酸四钠(hids)、1g乙二胺四乙酸(edta)、2.5g聚乙二醇、0.02mlproclin150、0.02mlproclin300，混合均匀后定容至100ml，调整ph至9.4，得到大便隐血收集液。
实施例2：
先加入70ml的纯化水到容器中，然后再依次加入0.6g三羟甲基氨基甲烷tris、0.5g小牛血清白蛋白、1g3-羟基-2,2′亚氨基二琥珀酸四钠(hids)、1.5g乙二胺四乙酸(edta)、2.5g聚乙二醇、0.01gproclin150、0.01gproclin300，混合均匀后定容至100ml，调整ph至9.4，得到大便隐血收集液。
实施例3：
先加入70ml的纯化水到容器中，然后再依次加入1.2g磷酸氢二钠、0.5g酪蛋白、2g3-羟基-2,2′亚氨基二琥珀酸四钠(hids)、2g三聚磷酸钠、3g聚乙二醇、0.5gproclin150、0.5gproclin300，混合均匀后定容至100ml，调整ph至9.5，得到大便隐血收集液。
实施例4：
先加入70ml的纯化水到容器中，然后再依次加入0.8g硼砂、1g小牛血清白蛋白、1g乙二胺四乙酸(edta)、2g三聚磷酸钠、2.6g聚乙二醇、0.25gproclin150、0.25gproclin300，混合均匀后定容至100ml，调整ph至9.5，得到大便隐血收集液。
实施例5：
先加入70ml的纯化水到容器中，然后再依次加入1g三羟甲基氨基甲烷tris、0.2g小牛血清白蛋白、2g3-羟基-2,2′亚氨基二琥珀酸四钠(hids)、1.5g乙二胺四乙酸(edta)、2.8g聚乙二醇、0.03gproclin150、0.03gproclin300，混合均匀后定容至100ml，调整ph至9.4，得到大便隐血收集液。
应用实施例1：
取目前市面上常规使用的几种大便隐血粪便收集液，a收集液为a公司提供的收集液，配方由edta和氯化钠组成，其中浓度分别为3～10g/l和5～20g/l；b收集液为b公司提供的收集液，配方由hepes、小牛血清白蛋白、氯化钠、蔗糖、防腐剂组成，其中浓度分别为0.5～5g/l、1～10g/l、5～20g/l、5～30g/l、0.2～1g/l。
分别取50mg新鲜大便隐血阳性粪便标本加入到上述2ml三种粪便收集液中，并放置到常温、2-8℃和-20℃保存，并于0天、3天、7天、10天、15天、30天、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、9个月、12个月评估性能，见表1。
表1应用实施例采用不同的收集液进行大便保存评估结果
注：“+”表示阳性结果，“－”表示阴性结果。
上述结果显示，实施例1制备得到的收集液在常温下能储存7天，2-8℃下存储30天，-20℃下存储6个月；对比例a收集液、b收集液、对比例1、对比例2血红蛋白的稳定效果明显不及实施例1制备得到的收集液。
上述实施例并非是对于本发明的限制，本发明并非仅限于上述实施例，只要符合本发明要求，均属于本发明的保护范围。