本发明属于药品分析检测的技术领域，特别是指一种测定复方制剂中葡萄糖或者葡萄糖聚合物含量的方法。
背景技术：
中华人民共和国药典2010年版二部规定了采用旋光度测定法测定复方制剂中葡萄糖的含量，如葡萄糖注射液。该旋光度测定法测定葡萄糖的含量是通过待测试样与纯葡萄糖样品的比旋光度来确定复方制剂中葡萄糖含量的，因此，这种测定葡萄糖含量的方法仅用于复方制剂中只含有一种具有旋光性的化合物的情况。当复方制剂中，同时含有两个或两个以上具有旋光性的化合物时，旋光度测定法就无法准确地测定葡萄糖的含量，目前市场上出售的很多复方制剂中同时含有两个或两个以上具有旋光性的化合物，例如：腹膜透析液处方(乳酸盐)，其内同时含有具有旋光性的葡萄糖和乳酸钠，在这种情况下，无法用旋光度测定法进行葡萄糖含量的测定。
因此，在已公布的腹膜透析液(乳酸盐)国家药品标准ws1-xg-001-2007中采用了间接碘量法和反滴定法进行葡萄糖含量的测定。该方法涉及的反应条件比较多，如精密加入碘滴定液、氢氧化钠滴定液、边加边振摇、水封、在暗处放置30分钟等要求；而且，滴定法判断终点会带有一定的主观性，这些都会影响测定结果的准确性和平行性。
技术实现要素：
本发明提供一种测定复方制剂中葡萄糖或者葡萄糖聚合物含量的方法，解决了现有技术无法测定同时含有两个或两个以上具有旋光性的化合物的复方制剂中葡萄糖含量和操作复杂、准确性和平行性差的问题。
本发明的一种测定复方制剂中葡萄糖或者葡萄糖聚合物含量的方法，其主要是通过以下技术方案加以实现的：包括以下步骤：
(1)取复方制剂，加入注射用水，将其溶解，并进行稀释，稀释因子为dil，制成待测液；
(2)获得步骤(1)所得待测液中，除了葡萄糖或葡萄糖聚合物之外的其它旋光性化合物的浓度cn；
(3)按照旋光度测定法，测定步骤(1)所得待测液的旋光度[α]；
(4)根据以下公式，计算葡萄糖或葡萄糖聚合物的含量：
式中，c——葡萄糖或葡萄糖聚合物的含量，％；
[α]——待测液的旋光度；
dil——稀释因子；
fn——校正因子，fn＝[α]n×l×cn；
[α]n——其它旋光性化合物的比旋光度；
l——测定管的长度，dm；
cn——其它旋光性化合物的浓度，％；
n——其它旋光性化合物的个数，为自然数；
[α]0——葡萄糖或葡萄糖聚合物的比旋光度。
本发明利用旋光性化合物的旋光度，测定了同时含有两个或两个以上旋光性化合物的复方制剂中葡萄糖或葡萄糖聚合物的含量；该测定方法简单，操作便捷；通过了方法学验证，测试结果的准确度、精密度、稳定性均良好。
作为一种优选的实施方案，所述步骤(1)中，待测液中葡萄糖或葡萄糖聚合物的浓度范围为0.01-20％。对于葡萄糖或葡萄糖聚合物浓度为0.01-20％的复方制剂的测试结果精密度更高，准确性更强，更稳定。
作为一种优选的实施方案，所述步骤(1)中，待测液中葡萄糖或葡萄糖聚合物的浓度范围为1-10％。对于葡萄糖或葡萄糖聚合物浓度为1-10％的复方制剂，可以进一步提高其分析检测结果的精密度、准确性和稳定性。
作为一种优选的实施方案，所述其它旋光性化合物为乳酸盐、异柠檬酸盐、苹果酸盐中的任意一种或几种。所有含有葡萄糖或葡萄糖聚合物并同时含有乳酸盐、异柠檬酸盐、苹果酸盐等两个或两个以上的旋光性化合物的复方制剂均可以采用本发明的方法进行检测。当然，本发明的其它旋光性化合物不局限于上述提到的这三类，也可以是其它具有旋光性的化合物。
作为一种优选的实施方案，所述旋光度精确至小数点后三位有效数字，所述其它旋光性化合物的浓度保留四位有效数字，所述葡萄糖或葡萄糖聚合物的含量保留四位有效数字。控制旋光度和其它旋光性化合物的浓度的有效数字位数，可以进一步保证检测结果的准确性，提高检测结果的平行性和再现性。
作为一种优选的实施方案，所述步骤(1)、所述步骤(2)和所述步骤(3)均在20-30℃下进行。本发明的测定方法一般在室温下进行，当环境温度的变化较大时，可以适当调整待测液配置的温度、浓度和旋光度的测定温度，或在各品种项下规定的温度进行，这样可以保证检测结果的一致性，加快待测液的溶解速度，提高检测效率。
作为一种优选的实施方案，所述步骤(3)中，每个样品同法测定旋光度3或5次，取3或5次的平均数。多次测量取其平均值，可以进一步消除系统误差，从而更大程度地提高检测结果的准确性。
作为一种优选的实施方案，所述步骤(3)中，在进行样品旋光度测定之前，以溶剂作空白校正，测定后，再校正1次，以确定在测定时零点有无变动；如第2次校正时发现零点有变动，则重新测定旋光度。通过空白校正，可以进一步消除旋光度测定时的设备误差，从而更大程度地提高检测结果的准确性。
作为一种优选的实施方案，所述步骤(1)中，复方制剂制成的溶液为澄清溶液。复方制剂经过充分溶解得到澄清溶液，澄清溶液的浓度均匀，取样更具有代表性，能够更好的反应整个复方制剂内葡萄糖或葡萄糖聚合物的含量。
本发明的有益效果：本发明利用旋光度法测定了复方制剂中同时含有两个或两个以上旋光性化合物的葡萄糖或葡萄糖聚合物含量，该测定方法简单，操作便捷，大大避免了间接碘量法和反滴定法所规定的很多的实验条件，无需精密加入碘滴定液、氢氧化钠滴定液、边加边振摇、水封以及在暗处放置30分钟等操作；实验结果稳定，准确，平行性好，消除了滴定法判断终点带有一定的主观性的弊端。
具体实施方式
下面将结合本发明的具体实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明的一种测定复方制剂中葡萄糖或者葡萄糖聚合物含量的方法，包括以下步骤：
(1)取复方制剂，加入注射用水，将其溶解，并进行稀释，稀释因子为dil，制成待测液；
(2)获得步骤(1)所得待测液中，除了葡萄糖或葡萄糖聚合物之外的其它旋光性化合物的浓度cn；
(3)按照旋光度测定法，测定步骤(1)所得待测液的旋光度[α]；
(4)根据以下公式，计算葡萄糖或葡萄糖聚合物的含量：
式中，c——葡萄糖或葡萄糖聚合物的含量，％；
[α]——待测液的旋光度；
dil——稀释因子；
fn——校正因子，fn＝[α]n×l×cn；
[α]n——其它旋光性化合物的比旋光度；
l——测定管的长度，dm；
cn——其它旋光性化合物的浓度，％；
n——其它旋光性化合物的个数，为自然数；
[α]0——葡萄糖或葡萄糖聚合物的比旋光度。
作为一种优选的实施方案，所述步骤(1)中，待测液中葡萄糖或葡萄糖聚合物的浓度范围为0.01-20％。
作为一种优选的实施方案，所述步骤(1)中，待测液中葡萄糖或葡萄糖聚合物的浓度范围为1-10％。
作为一种优选的实施方案，所述其它旋光性化合物为乳酸盐、异柠檬酸盐、苹果酸盐中的任意一种或几种。
作为一种优选的实施方案，所述旋光度精确至小数点后三位有效数字，所述其它化合物的浓度保留四位有效数字，所述葡萄糖或葡萄糖聚合物的含量保留四位有效数字。
作为一种优选的实施方案，所述步骤(1)、所述步骤(2)和所述步骤(3)均在20-30℃下进行。
作为一种优选的实施方案，所述步骤(3)中，每个样品同法测定旋光度3或5次，取3或5次的平均数。
作为一种优选的实施方案，所述步骤(3)中，在进行样品旋光度测定之前，以溶剂作空白校正，测定后，再校正1次，以确定在测定时零点有无变动；如第2次校正时发现零点有变动，则重新测定旋光度。
作为一种优选的实施方案，所述步骤(1)中，复方制剂制成的溶液为澄清溶液。
实施例一
采用本发明的方法测定含有乳酸钠的腹膜透析液(乳酸盐)中葡萄糖的含量，具体步骤如下。当然，本发明所述测定方法也适用于含有乳酸钠等多种旋光性化合物复方制剂中葡萄糖或葡萄糖聚合物的含量。
1、制剂性质：
复方制剂规格：含2.27％无水葡萄糖，2000ml；
【处方】如下：
2、测定方法
(1)由于本品为液体，浓度较稀，本品无需稀释，即稀释因子为1。
(2)根据上述配制方法，可以得出除了无水葡萄糖之外的其它旋光性化合物即乳酸钠的浓度c1＝0.448％；
本实施例是通过溶液配制的过程中，直接得到除了无水葡萄糖之外的其它旋光性化合物的浓度的；当然，本发明也可以采用高效液相色谱法或其它方法测定除了无水葡萄糖之外的其它旋光性化合物的浓度，从而获得除了无水葡萄糖之外的其它旋光性化合物的浓度。
(3)按照旋光度测定法，测定本品的旋光度[α]＝1.153，并查得无水葡萄糖的比旋光度[α]0＝52.75°、其它旋光性化合物即乳酸钠的比旋光度[α]1＝-12.08°。
(4)按以下公式，计算无水葡萄糖的浓度：
测定时，测定管的长度l为1dm，则：
经过计算得出，无水葡萄糖的标示量为100.8％，标示量是测得的无水葡萄糖浓度与理论值的比值，即2.288÷2.27×100％＝100.8％；这里无水葡萄糖的浓度虽然用％来表示，但是，其是指质量与体积比的浓度，即w/v，单位是g/100ml，即100ml药液中含有的无水葡萄糖的质量g。
3、准确度试验
对上述复方制剂进行准确度试验，按照上述复方制剂的处方分别将无水葡萄糖的浓度设定80％、100％、120％3个梯度。每个浓度梯度精密称取3份105℃干燥至恒重的无水葡萄糖原料，分别置于3个100ml量瓶中，并精密加入阴性溶液至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取上述供试品溶液，按照上述无水葡萄糖含量测定方法测定无水葡萄糖的含量，并计算标示量和标示量的相对标准偏差，试验结果如表1所示，检出量即本发明的方法测得的无水葡萄糖的浓度。
由表1可以看出，采用本发明的无水葡萄糖含量测定方法，腹膜透析液(乳酸盐)中无水葡萄糖的测定含量与其投入量基本一致，其标示量为100.4％，rsd为0.35％，准确度试验结果良好。
表1腹膜透析液(乳酸盐)无水葡萄糖准确度试验结果
4、精密度试验
对上述复方制剂进行精密度试验，取上述复方制剂6份，按照上述含量测定法，测得其旋光度，计算无水葡萄糖含量、标示量及相对标准偏差，试验结果如表2所示。
由表2可以看出，采用本发明的测定方法对腹膜透析液(乳酸盐)中无水葡萄糖的含量进行测定时，6次重复测定结果之间的rsd为0.04％，表明其精密度试验结果良好。
表2腹膜透析液(乳酸盐)无水葡萄糖精密度试验结果
5、稳定性试验
对上述复方制剂进行稳定性试验，取上述复方制剂1份，按照上述含量测定法，分别于0、2、4、6、8小时各测定一次，记录其旋光度，计算无水葡萄糖含量、标示量及相对标准偏差，试验结果如表3所示。
由表3可以看出，采用本发明的测定方法对腹膜透析液(乳酸盐)中无水葡萄糖的含量进行测定时，其rsd为0.06％，这说明供试品溶液在8h内稳定性良好。
表3腹膜透析液(乳酸盐)无水葡萄糖稳定性试验结果
实施例二
采用本发明的方法测定含有麦芽糖糊精和乳酸钠的麦芽糖糊精腹膜透析液(乳酸盐)中麦芽糖糊精的含量，具体步骤如下。当然，本发明所述测定方法也适用于含有乳酸钠等多种旋光性化合物复方制剂中葡萄糖或葡萄糖聚合物的含量。
1、制剂性质：
复方制剂规格：含6.0％麦芽糖糊精，2000ml；
【处方】如下：
2、测定方法
(1)由于本品为液体，浓度较稀，本品无需稀释，即稀释因子为1。
(2)根据上述配制方法，可以得出除了麦芽糖糊精之外的其它旋光性化合物即乳酸钠的浓度c1＝0.448％；
本实施例是通过溶液配制的过程中，直接得到乳酸钠的浓度的；当然，本发明也可以采用高效液相色谱法或其它方法测定乳酸钠的浓度，从而获得除了葡萄糖聚合物之外的其它旋光性化合物的浓度。
(3)按照旋光度测定法，测定本品的旋光度[α]＝11.812，并查得麦芽糖糊精的比旋光度[α]0＝195.61°、其它旋光性化合物即乳酸钠的比旋光度[α]1＝-12.08°。
(4)按以下公式，计算麦芽糖糊精的浓度：
测定时，测定管的长度l为1dm，则：
经过计算得出，麦芽糖糊精的标示量为101.1％，这里麦芽糖糊精的浓度虽然用％来表示，但是，其是指质量与体积比的浓度，即w/v，单位是g/100ml。
3、准确度试验
对上述复方制剂进行准确度试验，按照上述复方制剂的处方分别将麦芽糖糊精的浓度设定80％、100％、120％3个梯度；每个浓度梯度精密称取3份105℃干燥至恒重的麦芽糖糊精原料，分别置9个100ml量瓶中，用阴性溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取上述供试品溶液，按照上述麦芽糖糊精含量测定方法测定麦芽糖糊精的含量，计算标示量和标示量的相对标准偏差，结果如表5所示。
由表5可以看出，利用本发明的麦芽糖糊精含量测定方法，麦芽糖糊精腹膜透析液中麦芽糖糊精的测定含量与其投入量基本一致，麦芽糖糊精标示量为99.87％，rsd为0.13％，因此，准确度试验结果良好。
表5麦芽糖糊精腹膜透析液中麦芽糖糊含量精准确度试验结果
5、精密度试验
对上述复方制剂进行重复性试验，取上述方法配制的复方制剂6份，按照上述麦芽糖糊精含量测试方法，计算其标示量及相对标准偏差，结果见表6。
由表6可以看出，麦芽糖糊精腹膜透析液中麦芽糖糊精含量测定方法重复性试验的rsd为0.22％，重复性试验良好。
表6麦芽糖糊精腹膜透析液中麦芽糖糊精含量精密度试验结果
6、稳定性试验
对上述复方制剂进行稳定性试验，取上述方法配制的复方制剂1份，按照上述含量测定法，分别于0、2、4、6、8、12、24小时各测定一次，记录其旋光度，计算其标示量及相对标准偏差，结果见表8。
表8麦芽糖糊精腹膜透析液中麦芽糖糊精含量稳定性试验结果
由表8可以看出，利用本发明的麦芽糖糊精含量测定方法，rsd分别为0.40％，供试品溶液在24h内稳定性良好。
本发明的有益效果是：本发明利用旋光度法测定了复方制剂中同时含有两个或两个以上旋光性化合物的葡萄糖或葡萄糖聚合物含量，该测定方法简单，操作便捷，大大避免了间接碘量法和反滴定法所规定的很多的实验条件，无需精密加入碘滴定液、氢氧化钠滴定液、边加边振摇、水封、在暗处放置30分钟等操作；实验结果稳定，准确，平行性好，消除了滴定法判断终点会带有一定的主观性的弊端。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。