一种电化学发光标记液的制作方法

文档序号:12268358阅读:768来源:国知局

本发明属于医疗诊断仪器用试剂领域,具体涉及一种电化学发光标记液。



背景技术:

目前,针对人体中疾病相关痕量物质的定量检测常用的方法有化学发光免疫法和电化学发光免疫法,化学发光免疫发和电化学发光免疫法不但对检测者身体无害,检测敏感度和精密度较高,而且试剂稳定,并可进行全自动分析,是理想的标记免疫测定方法。电化学发光免疫法以其高灵敏度和良好的重复性得到了广泛的应用。电化学发光免疫法分为有机化合物的发光体系和无机物的发光体系。有机发光物有酰肼类化合物、吖啶酯和光泽精等,无机化合物电化学发光体系中,最典型的发光试剂是钌联吡啶化合物,该试剂在水溶液和有机溶液中的溶解度好,发光效率高,可进行可逆的单电子反应,在电化学发光理论和应用研究中占有重要的地位。

然而,现有的电化学发光标记液主要有磷酸盐吡啶钌、硼砂吡啶钌,但是存在成本高、灵敏度差、发光效率低等不足。



技术实现要素:

针对现有技术存在的上述不足,本发明解决现有电化学发光标记液发光效率不高的问题,旨在提供一种发光效率高、稳定性好,反应迅速的电化学发光标记液。

解决上述技术问题,本发明采用如下技术方案:一种电化学发光标记液,其特征在于,由三联吡啶钌、缓冲物质和蒸馏水混合而成,主要原料按以下重量体积比配制:

三联吡啶钌 0.22-0.52g,

磷酸氢二钠 1.88-3.02g,

磷酸二氢钾 2.06-3.18g,

加蒸馏水定容至300ml,调节PH至6.5-7.6;

其中,所述三联吡啶钌为2,2':6',2”-Terpyridine[4’-(N-琥珀酰氧羰基丙基)-2,2’:6’,2”-三联吡啶](2,2’:6’,2”-三联吡啶)钌,结构式为:

进一步,还包括柠檬酸三钠0.6-0.98g。

相比现有技术,本发明具有如下有益效果:

1、本发明由单一溶液组成,采用2,2':6',2”-Terpyridine[4’-(N-琥珀酰氧羰基丙基)-2,2’:6’,2”-三联吡啶](2,2’:6’,2”-三联吡啶)钌(II)作为标记物,大大提高了单位发光量,发光效率明显提高。

2、使用2,2':6',2”-Terpyridine[4’-(N-琥珀酰氧羰基丙基)-2,2’:6’,2”-三联吡啶](2,2’:6’,2”-三联吡啶)钌(II),利用其分子的高共轭效应,具有市面相同功能产品更高的检测灵敏度。

3、缓冲体系中加入柠檬酸三钠增加标记蛋白的溶解度和提高标记率,从而降低标记成本,同时提高单位浓度反应物的发光量。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明。

一种电化学发光标记液,由三联吡啶钌、缓冲物质混合而成,由以下原料按如下重量体积比配制:

其中,所述三联吡啶钌为2,2':6',2”-Terpyridine[4’-(N-琥珀酰氧羰基丙基)-2,2’:6’,2”-三联吡啶](2,2’:6’,2”-三联吡啶)钌,结构式为:

一、实施例配方:

二、应用领域及方式:

本发明应用于电化学发光免疫检测试剂盒的开发,按配方配制标记液后直接应用于抗体标记过程。

三、使用方法:

使用方法如下:室温下,取1ml抗体(1mg/ml)加入10uL上述标记液,轻微混匀后于37℃水浴中反应30分钟,取出后,10000rpm离心5分钟,去上清继续后续操作。

应当指出,以上所述实施方式可以使本领域的技术人员更全面地理解本发明的应用,但不以任何方式限制本发明。因此,尽管本说明书对本发明已进行了详细的说明,但是,本领域技术人员应当理解,仍然可以对本发明进行修改或者等同替换;而一切不脱离本发明的精神实质的技术方案及其改进,其均应涵盖在本发明专利的保护范围当中。

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