一种基于核酸适体的人胰岛素检测方法与流程

文档序号:12118504阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种基于核酸适体的人胰岛素检测方法,其特征在于:包括以下步骤:

1)先通过柠檬酸钠还原氯金酸制备纳米金;

2)再将人胰岛素适配体修饰在所述纳米金表面,得到探针;

3)将一系列不同浓度的人胰岛素标准液先分别与所述探针反应,再分别与NaCl溶液反应,各所得反应液分别通过紫外检测纳米金聚集态及分散态的紫外吸收峰值,建立人胰岛素浓度值对应纳米金聚集态紫外吸收峰值和纳米金分散态紫外吸收峰值比率的标准曲线;

4)将含人胰岛素的待测液按3)步骤通过紫外检测,并依据标准曲线进行分析,即得待测液中人胰岛素的浓度。

2.根据权利要求1所述的基于核酸适体的人胰岛素检测方法,其特征在于:所述的纳米金尺寸为13nm~15nm。

3.根据权利要求1或2所述的基于核酸适体的人胰岛素检测方法,其特征在于:所述纳米金的制备过程为:将浓度为0.005~0.015wt%氯金酸溶液加热至沸腾后,加入浓度为1.5~2.5wt%的柠檬酸钠溶液进行反应,溶液由无色变为紫色再变为酒红色,在酒红色的状态下保持沸腾15~20分钟,再在搅拌条件下冷却至室温,即得纳米金;其中,氯金酸与柠檬酸钠的质量比为1:3~5。

4.根据权利要求1所述的基于核酸适体的人胰岛素检测方法,其特征在于:将人胰岛素适体与纳米金在室温下反应,得到探针。

5.根据权利要求4所述的基于核酸适体的人胰岛素检测方法,其特征在于:人胰岛素适体与纳米金的反应比例为50~80nM:2~5nM。

6.根据权利要求1所述的基于核酸适体的人胰岛素检测方法,其特征在于:将浓度为50pM、250pM、500pM、1nM、10nM、50nM、100nM、150nM和200nM的人胰岛素标准液分别与探针反应15~20min,再分别与50~100mM的NaCl溶液反应10~15min后,分别采用紫外检测人胰岛素标准溶液中纳米金聚集态及分散态的紫外吸收峰值,并建立人胰岛素浓度值对应纳米金聚集态紫外吸收峰值和纳米金分散态紫外吸收峰值比率的标准曲线。

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