本发明涉及食品安全检测技术领域,具体为一种克伦特罗检测方法及检测卡。
背景技术:
克伦特罗也叫瘦肉精,是一种平喘药,该药物既不是兽药,也不是饲料添加剂,而是肾上腺类神经兴奋剂,别名有盐酸双氯醇胺;克喘素;氨哮素;氨必妥;氨双氯喘通;氨双氯醇胺,克伦特罗在家畜和人体内吸收好,而且与其它β-兴奋剂相比,它的生物利用度高,以至食用了含有克伦特罗的猪肉出现中毒。
其中盐酸克伦特罗是克伦特罗中的一种,盐酸克伦特罗是一种β2-受体激动剂,具有蛋白同化作用,可以减少脂肪的形成,提高瘦肉和脂肪的比率,因而被滥用于饲养业,造成该药在动物体内蓄积,尤其是肝脏组织中的浓度较高,人类食用含有克伦特罗残留的肉品后会出现头晕、心悸、手指震颇等中毒症状,滥用瘦肉精已成为重大的食品安全问题。
然而现有的盐酸克伦特罗的检测方法包括仪器分析方法和免疫分析方法,仪器分析方法主要包括气相色谱质谱联用法,高效液相色谱法,高效液相色谱质谱联用法,毛细管电泳法等。免疫分析方法主要包括酶联免疫法,放射免疫分析法胶体金免疫亲和层析法等,然而由于食品样品的复杂性和样品数量巨大,现有的方法检测相当困难,而且现有的检测技术不便于观察,这样严重影响了人们的工作。
技术实现要素:
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足,本发明提供了一种克伦特罗检测方法及检测卡,解决了克伦特罗检测过于复杂,不便于观测的问题。
(二)技术方案
为实现以上目的,本发明通过以下技术方案予以实现:
一种克伦特罗检测方法,包括以下步骤:
S1:先从动物身体组织、粪便或者饲料中提取5-10份,然后把这些这些原料通过粉碎机进行粉碎,然后再进行加入蒸馏水20-30克,得到糊状物品,在对糊状物品进行加热搅拌处理,加热时间1-1.5小时,加热温度90-100摄氏度,然后进行冷却,形成胶体状物体;
S2:将胶体状态的物体与植物辣根过氧化物酶0.01-0.02放置在保温箱内,进行混合保温,保温时间为4-5小时,保温温度为25-35摄氏度,然后形成酶偶联克伦特罗;
S3:将固相载体上已包被的抗体与特异性的抗克伦特罗抗体结合,结合时间为1-2小时,形成结合体,然后加入待测克伦特罗和酶偶联克伦特罗加入结合体内,结合时间1-1.5小时,形成反应物;
S4:将反应物加入3-4克蒸馏水清洗,等清洗完成的反应物与底物进行结合,然后把结合物放置在克伦特罗检测卡内,根据有色物的变化计量待测克伦特罗量。
S5:目测法观察出颜色的变化,测定样品中的克伦特罗含量,并作出记录。
优选的,S4的清洗流程包括:
A1:先把需要清洗的反应物放置在过滤器上,然后通过胶头滴管给反应物进行不间断的冲洗,冲洗时间1-2分钟,得到洁净的反应物;
A2:然后把洁净的反应物防止在温室内进行晾干,温室的温度为25-35摄氏度,晾干时间为2-3小时,得到稳定的反应物;
A3:然后把稳定的反应物通过镊子放置在克伦特罗检测卡的表面,进行检测对比。
优选的,所述比色的最佳波长为450nm,参比波长应大于600nm。
一种克伦特罗检测卡,包括卡板,所述卡板的前表面开设有凹槽,所述凹槽的内部安装有底物板,所述卡板的前表面且位于凹槽底部固定安装有第一比色板,所述卡板的前表面且位于凹槽的一侧固定安装有第二比色板,所述卡板的一侧固定安装有连接板,所述连接板远离卡板的一侧固定安装有把手。
优选的,所述第一比色板的长度大于第二比色板的长度。
(三)有益效果
本发明提供了一种克伦特罗检测方法及检测卡。具备以下有益效果:
(1)、该克伦特罗检测方法及检测卡,通过对植物辣根过氧化酶、固相载体和酶偶联克伦特罗的设置,使需要检测的克伦特罗能够有效的着色,这样方便了人们的检测和观察,提高了人们的工作效率,方便了工作人员的使用,同时也减少了使用大型器械,提高了检测的适应性。
(2)、该克伦特罗检测方法及检测卡,通过对第一比色板和第二比色板的设置,使工作人员在观察的过程中更加方便,提高了检测的准确性,从而提高了工作人员的检测质量。
附图说明
图1为本发明克伦特罗检测卡的结构示意图。
图中:1卡板、2凹槽、3底物板、4第一比色板、5第二比色板、6连接板、7把手。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例一
一种克伦特罗检测方法,包括以下步骤:
S1:先从动物身体组织、粪便或者饲料中提取5份,然后把这些这些原料通过粉碎机进行粉碎,然后再进行加入蒸馏水20克,得到糊状物品,在对糊状物品进行加热搅拌处理,加热时间1小时,加热温度90摄氏度,然后进行冷却,形成胶体状物体;
S2:将胶体状态的物体与植物辣根过氧化物酶0.01放置在保温箱内,进行混合保温,保温时间为4小时,保温温度为25摄氏度,然后形成酶偶联克伦特罗;
S3:将固相载体上已包被的抗体与特异性的抗克伦特罗抗体结合,结合时间为1小时,形成结合体,然后加入待测克伦特罗和酶偶联克伦特罗加入结合体内,结合时间1小时,形成反应物;
S4:将反应物加入3克蒸馏水清洗,等清洗完成的反应物与底物进行结合,然后把结合物放置在克伦特罗检测卡内,根据有色物的变化计量待测克伦特罗量。
S4的清洗流程包括:
A1:先把需要清洗的反应物放置在过滤器上,然后通过胶头滴管给反应物进行不间断的冲洗,冲洗时间1分钟,得到洁净的反应物;
A2:然后把洁净的反应物防止在温室内进行晾干,温室的温度为25摄氏度,晾干时间为2小时,得到稳定的反应物;
A3:然后把稳定的反应物通过镊子放置在克伦特罗检测卡的表面,进行检测对比。
S5:目测法观察出颜色的变化,测定样品中的克伦特罗含量,并作出记录。
实施例二
一种克伦特罗检测方法,包括以下步骤:
S1:先从动物身体组织、粪便或者饲料中提取7.5份,然后把这些这些原料通过粉碎机进行粉碎,然后再进行加入蒸馏水25克,得到糊状物品,在对糊状物品进行加热搅拌处理,加热时间1.25小时,加热温度95摄氏度,然后进行冷却,形成胶体状物体;
S2:将胶体状态的物体与植物辣根过氧化物酶0.015放置在保温箱内,进行混合保温,保温时间为4.5小时,保温温度为30摄氏度,然后形成酶偶联克伦特罗;
S3:将固相载体上已包被的抗体与特异性的抗克伦特罗抗体结合,结合时间为1.5小时,形成结合体,然后加入待测克伦特罗和酶偶联克伦特罗加入结合体内,结合时间1.25小时,形成反应物;
S4:将反应物加入3.5克蒸馏水清洗,等清洗完成的反应物与底物进行结合,然后把结合物放置在克伦特罗检测卡内,根据有色物的变化计量待测克伦特罗量;
S4的清洗流程包括:
A1:先把需要清洗的反应物放置在过滤器上,然后通过胶头滴管给反应物进行不间断的冲洗,冲洗时间1.5分钟,得到洁净的反应物;
A2:然后把洁净的反应物防止在温室内进行晾干,温室的温度为30摄氏度,晾干时间为2.5小时,得到稳定的反应物;
A3:然后把稳定的反应物通过镊子放置在克伦特罗检测卡的表面,进行检测对比。
S5:目测法观察出颜色的变化,测定样品中的克伦特罗含量,并作出记录。
实施例三
一种克伦特罗检测方法,包括以下步骤:
S1:先从动物身体组织、粪便或者饲料中提取10份,然后把这些这些原料通过粉碎机进行粉碎,然后再进行加入蒸馏水30克,得到糊状物品,在对糊状物品进行加热搅拌处理,加热时间1.5小时,加热温度100摄氏度,然后进行冷却,形成胶体状物体;
S2:将胶体状态的物体与植物辣根过氧化物酶0.02放置在保温箱内,进行混合保温,保温时间为5小时,保温温度为35摄氏度,然后形成酶偶联克伦特罗;
S3:将固相载体上已包被的抗体与特异性的抗克伦特罗抗体结合,结合时间为2小时,形成结合体,然后加入待测克伦特罗和酶偶联克伦特罗加入结合体内,结合时间1.5小时,形成反应物;
S4:将反应物加入4克蒸馏水清洗,等清洗完成的反应物与底物进行结合,然后把结合物放置在克伦特罗检测卡内,根据有色物的变化计量待测克伦特罗量;
S4的清洗流程包括:
A1:先把需要清洗的反应物放置在过滤器上,然后通过胶头滴管给反应物进行不间断的冲洗,冲洗时间2分钟,得到洁净的反应物;
A2:然后把洁净的反应物防止在温室内进行晾干,温室的温度为35摄氏度,晾干时间为3小时,得到稳定的反应物;
A3:然后把稳定的反应物通过镊子放置在克伦特罗检测卡的表面,进行检测对比。
S5:目测法观察出颜色的变化,测定样品中的克伦特罗含量,并作出记录。
实施例一、实施例二和实施例三中,S1中的加热过程,把糊状物体放置试管中,然后把试管进行水浴锅加热,这样能够更加良好的控制温度,方便了人们的使用,提高了加热效果,S5中,人们需要把检测的颜色与克伦特罗检测卡上的第一比色板和第二比色板进行比较,这样比较的更加透彻,提高了实验的精确性。
请参阅图1,本发明提供一种克伦特罗检测卡,卡板1的前表面开设有凹槽2,凹槽2的内部安装有底物板3,卡板1的前表面且位于凹槽2底部固定安装有第一比色板4,卡板1的前表面且位于凹槽2的一侧固定安装有第二比色板5,第一比色板4的长度大于第二比色板5的长度,卡板1的一侧固定安装有连接板6,连接板6远离卡板1的一侧固定安装有把手7。
底物板3具有放置底物的作用,方便了人们的使用,凹槽2的设置,避免实验中的液体漏出,有效的保护了工作人员,避免了工作人员受到伤害,通过对把手7的设置,方便了人们的使用和拿取。
需要说明的是,在本文中,诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来,而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且,术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含,从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素,而且还包括没有明确列出的其他要素,或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下。由语句“包括一个......限定的要素,并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素”。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例,对于本领域的普通技术人员而言,可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。