LHJ增溶剂在难溶食品添加剂定量测定中的应用的制作方法

背景技术：
：本人从事多年高效液相色谱工作，发现<<中华人民共和国国家标准食品卫生检验方法(一)P1-709，(二)P1-596仅适应液体样品(如汽水、饮料、配制酒)，对固体-半固体食品，如果冻、陈皮、果酱、蜜饯、糕点等食品中防腐剂、甜味剂、色素、增白剂等，定量测定回收率(30％-60％)，无法准确测定添加剂真实含量，更不能严格控制超标食品流入市场！对人民群众健康非常不利，特别致癌物！为此进行长期研究工作，用水或流动相溶解难溶解食品，有许多胶体-悬浮体，胶块-悬浮体分子间(范德华力、氢键、内聚能)引力很大，特别内聚能，用蛋白沉淀剂-超声也不降低，将添加剂牢牢吸附囊裹着！多年来一直寻找一种试剂，消除悬浮体引力-剥离分散悬浮体粒度，把添加剂从悬浮体中拽出来，充分暴露溶解水相中；后来儿子吃果冻时，用芦荟汁滴在果冻上，结果，果冻溶解一个坑！这下提醒了我，为此开始长达数年LHJ提取混配-应用研究工作，LHJ研究成功用于难溶解食品中苯甲酸、山梨酸钾、糖精钠、过氧化苯甲酰定量测定中，《LHJ增溶剂用于果冻中苯甲酸和山梨酸定量测定的研究》，论文刊登<<中国卫生检验杂志>>2004.12.14卷6期P713-714，获市科技进步二等奖。《深色、难溶食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠LHJ增溶高效液相色谱测定法》刊登在《职业与健康》2009年25卷23期；《面粉中过氧化苯甲酰的硫代硫酸钠还原LHJ增溶高效液相色谱测定法》刊登在2009年25卷24期，几种方法加标回收率在90％-110％之间，符合仪器分析要求。《LHJ增溶剂对难溶性食品中添加剂定量测定的研究、高效夜相色法》，获市科学技术进步二等奖(2013年)；其它添加剂定量测定方法正在研究中。

技术实现要素：
：将难食品粉碎，称取1.0-2.5克样品，放入10.0-25.0毫升比色管，加5.0-10.0毫升流动相，振摇，加LHJ2.0-5.0ml充分振摇，放30min，加入200g/L乙酸锌和100g/L亚铁氰化钾各0.5ml或2.5mL，充分振摇，加流动相定容到10.0mL-25.0mL刻度，摇匀，离心，取上清液过0.45um滤膜，取10.0uL样品溶液和标准溶液注入高效液相色谱仪进行定量测定。

高效液相色谱采用反向柱分离，紫外或二极管鉴定器定量测定添加剂真实含量；关键是LHJ把含有植-动物胶、蛋白、脂肪、碳水化合物、增稠剂等，酶解-增溶-剥离，使悬浮体粒度最小化！添加剂充分暴露溶解水相，再离心、过微孔滤膜，上高效液相色谱定量测定。

实施例1、LHJ增溶剂在难溶食品中防腐剂定量测定的应用：

(附图说明：附图1是用与不用LHJ对果冻中苯甲酸、山梨酸定量测定结果对比)食品防腐剂28种；对含植-动物胶、蛋白、脂肪、碳水化合物、增稠剂等(如果冻、陈皮、酱类、蜜饯、软糖、果酱、肉、蛋、鱼、禽制品、胶原蛋白糖衣、果酱糕点面包、蛋糕、月饼)等，苯甲酸、山梨酸定量测定，在没用LHJ前，果冻加标回收率只有30％，当用上LHJ，胶体完全消失，苯甲酸、山梨酸完全溶解在水相中，加标回收率苯甲酸90.7％、山梨酸钾96.7％，完全符合仪器分析要求，论文刊登在《中国卫生检验杂志》2004、12、14、6期P713-714，2005年，获市科进步二等奖。

实施例2-1、LHJ增溶剂在难溶解食品中甜味剂定量测定的应用：

(附图说明：附图2是用与不用LHJ对难溶食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠定量测定结果对比)；GB 2760-2013，甜味剂有十几种，常用有糖精钠、甜蜜素、安塞蜜、阿力甜，阿斯巴甜、纽甜等；样品处理：将含(植-动物胶、蛋白、脂肪、碳水化合物、增稠剂)等食品，如蜜饯、雪糕、冰淇类罐头、果酱等捣碎放入水或流动相，有许多胶体-悬浮体出现！对甜味剂有很强吸附囊裹作用，造成定量测定回收率在40％左右；用上LHJ大大提高了甜味剂的溶解度；原理与实施例1相同，论文《深色、难溶食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的LHJ增溶高效液相色谱测定法》刊登在《职业与健康》2009年25卷23期，加标回收率苯甲酸90％-108％，山梨酸90％-100％，糖精钠90％；技术指标都符合仪器分析要求。

实施例2-2、LHJ增溶剂在难溶解食品中甜味剂(甜蜜素)定量测定的应用：

将果冻样品倒碎，放入试管中，加少量水溶解，加LHJ充分振摇溶解定容，在酸性介质中甜蜜素与亚硝酸反应生成环己醇亚硝酸酯，用正己烷提取，气相色谱分离，保留时间定性，外标法定量；结果该方法在0.25-10毫克范围内线性关系良好，相关系数为0.9996，检出限为0.001g/kg，回收率90％-102％；结论，该方法灵敏度-精密度好，回收率高，用LHJ处理样品甜蜜素测定结果提高2-3倍；论文《LHJ增溶剂对冻中甜蜜素定量测定的应用》刊登在《医学动物防制》2015年08期。

实施例3、LHJ增溶剂在增白剂定量测定中的应用：

(附图说明：附图3是用与不用LHJ面粉中过氧化苯甲酰定量测定结果对比)增白剂有多种，过氧化苯甲酰属于食品禁止使用物，因在人体分解成苯甲酸，有致癌作用！可不法分子总在使用，所以研究准确定量方法很有必要；有资料报道，用乙醇溶解再与碘化钾反应生成苯甲酸，因乙醇和碘化钾加入量太大，基线不归零，溶剂峰特宽与过氧化苯甲酰分解产物苯甲酸峰分不开，无法准确测定苯甲酸真实含量，乙醇和碘化钾加入量太少过氧化苯甲分解不完全，还有大分子对苯甲酸吸附囊裹作用，几种因素所致！过氧化苯甲酰含量忽高忽低，无法测定真值。采用硫代硫酸钠还原，LHJ酶解-增溶-剥离，消除悬浮体对苯甲酸吸附作用，使苯甲酸充分暴露溶解在水相，溶剂峰变窄，苯甲酸在基线归零情况下才出峰，最终建立过氧化苯甲酰准确定量方法，《面粉中过氧化苯甲酰的硫代硫酸钠还LHJ增溶高效液相色谱测定法》加标回收率92.0％，技术指标均符合仪器分析要求。

实施例4、LHJ增溶剂在难溶食品中着色剂定量的应用：

GB2760-2013着色剂有几十种，合成色素有七种(笕菜红、胭脂红、赤鲜红、新红、柠檬黄、日落黄、亮蓝、靛蓝)，含动-植物胶和增稠剂难溶解食品有糖果、糕点、青梅、山楂制品、红绿丝、染色樱桃罐头、红肠肠衣，冰淇淋、调味酱、果冻西瓜酱罐头、糖果、雪糕、饼干等，这些食品在溶解过程中有胶体-悬浮体对色素有吸附囊裹性，色素不能溶解在水中，定量测定回收率很低，加上LHJ回收率90％-110％之间，符合仪器分析要求。

实施例5、色素测对高效液相色谱柱损害严重，一次色素测定，当天没有把柱子冲洗干净，第二天冲洗，色素粘附柱子上，用水-甲醇怎么也洗不净，后来用LHJ很快就冲下许多物质，剃度洗脱3次柱子冲洗好了；高效液相色谱测定关键是柱子冲洗，许多有机-无机物黏附在柱子上，用流动相或甲醇需要冲洗很长时间，用LHJ很快洗干净，使用方法，在进样口反复注射LHJ即可。

实施例6、LHJ在难溶解体系是具酶解-增溶-剥离为一体化学试剂，能解决国标方法对难溶解食品添加剂定量测定回收率非常低的难题。