一种用于检测胶类中药及其复方制剂中狗骨源成分含量的组合物、试剂盒及其检测方法与流程

文档序号:12061426阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于检测胶类中药及其复方制剂中狗骨源成分含量的组合物,所述组合物由多肽及对照品检测基质组成,其特征在于:所述多肽的氨基酸序列为

Gly-Leu-Pro-Gly-Ala-Asp-Gly-Pro-Ala-Gly-Val-Met-Gly-Pro-Hyp-Gly-Pro-Arg,对照品检测基质为鱼骨胶。

2.一种含有权利要求1所述组合物的检测试剂盒。

3.一种用于检测胶类中药及其复方制剂中狗骨源成分含量的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)对照品溶液的制备

1)基质溶液的制备:将称量好的对照品检测基质置于量瓶中,加入NH4HCO3溶液,超声使样品完全溶解,加NH4HCO3溶液稀释至刻度;

2)对照品母液的制备:将称量好的对照品检测基质置于量瓶中,加入NH4HCO3溶液,超声使样品完全溶解,将称量好的的多肽加入该量瓶中,用NH4HCO3溶液溶解并稀释至刻度;

3)对照品溶液制备:以步骤1)制得的基质溶液为溶剂,将步骤2)制得的对照品母液稀释,微孔滤膜过滤,续滤液中加胰蛋白酶溶液,酶解;

(2)待检测样品溶液的制备

将称量好的待测样品胶置于量瓶中,加NH4HCO3溶液,超声使样品胶完全溶解,加NH4HCO3溶液稀释至刻度,摇匀,微孔滤膜过滤,续滤液中加胰蛋白酶溶液,酶解;

(3)液质联用仪检测

分别取步骤(1)制得的对照品溶液、步骤(2)制得的待检测样品溶液放入液质联用仪进行检测,选择m/z540.6→954.5、883.4、826.4作为检测离子对进行MRM扫描,其中选择m/z540.6→954.5作为多肽的定量离子对;

(4)样品中狗骨源成分含量的计算

以对照品溶液的多肽的含量为纵坐标、峰面积为横坐标进行标准曲线的绘制,线性相关系数R≥0.9990,由此计算出样品中多肽的含量,然后,按下式计算出各样品中狗骨源成分的含量:

狗骨源成分的含量(%)=(待测样品中多肽含量/待测样品的重量)÷(5.526×10-3)×100%。

4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(1)及步骤(2)所述的酶解温度为37℃。

5.如权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(3)中液质联用仪检测的液相条件为:C18反相色谱柱,流动相A为0.1%(v/v)甲酸的水溶液,流动相B为0.1%(v/v)甲酸的乙腈溶液,流速0.3ml/min;梯度洗脱:5→20min,流动相A 90%→75%,流动相B 10%→25%,质谱条件:电喷雾正离子模式(ESI+)进行多反应监测。

6.如权利要求1所述的用于检测胶类中药及其复方制剂中狗骨源成分含量的组合物,其特征在于,所述胶类中药为阿胶、黄明胶、龟甲胶、鹿角胶、驴骨胶、牛骨胶、猪骨胶、羊骨胶或其他胶类中药。

7.权利要求1所述的组合物或权利要求2所述的试剂盒在检测胶类中药及其复方制剂中的狗骨源成分含量中的应用。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1