一种快速检测钙卫蛋白的试剂盒的制作方法

文档序号:12453912阅读:来源:国知局

技术特征:

1.组合物,其特征在于:包括如下组分:

含多聚物的缓冲液;

以及结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液;

所述多聚物为Triton系列表面活性剂、Tween系列表面活性剂、月桂醚、聚氧乙烯烷基苯基醚、聚氧乙烯壬基苯基醚和聚氧乙烯辛基苯醚中的至少一种;

所述聚苯乙烯胶乳的颗粒直径为100-300nm。

2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于:

所述含多聚物的缓冲液中,多聚体的质量占其总体积百分比为0.1%-5.0%;

任选的,结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液的固含量w/v为0.5-5.0%。

3.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于:

所述结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液中的聚苯乙烯胶乳与抗人钙卫蛋白抗体的包被是采用化学交联法制备;

任选的,所述化学交联法采用的化学交联缓冲液选自2-(N-吗啡啉)乙磺酸MES缓冲液、3-吗啉-2-羟基丙磺酸MOPSO缓冲液、3-(N-吗啉)丙磺酸MOPS缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES缓冲液和磷酸缓冲液中的至少一种;

任选的,所述化学交联法采用的化学交联剂选自碳化亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基硫代琥珀酰亚胺、酰肼和异氰酸酯中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于:

所述含多聚物的缓冲液包括如下组分:三羟甲基氨基甲烷、氯化钠、Triton X-100、牛血清蛋白、乙二醇聚氧乙烯醚和叠氮钠;

或所述含多聚物的缓冲液包括如下组分:三羟甲基氨基甲烷、氯化钠、Tween-20、牛血清蛋白、乙二醇聚氧乙烯醚和叠氮钠;

或所述含多聚物的缓冲液包括如下组分:磷酸盐、氯化钠、Triton X-100、牛血清蛋白、乙二醇聚氧乙烯醚和叠氮钠;

所述结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液包括如下组分:磷酸盐、抗人钙卫蛋白抗体包被胶乳颗粒、氯化钠、牛血清蛋白和叠氮钠。

5.根据权利要求4所述的组合物,其特征在于:

所述含多聚物的缓冲液包括如下浓度的各组分:

三羟甲基氨基甲烷或磷酸盐 20-100mmol/L

氯化钠 7-10g/L

Triton X-100或Tween-20 4-12g/L

牛血清蛋白 4-7g/L

乙二醇聚氧乙烯醚 40-60g/L

叠氮钠 3-6g/L

任选的,所述含多聚物的缓冲液的pH值为6.5-7.5;

任选的,所述结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液包括如下浓度的各组分:

磷酸盐 80-120mmol/L

抗人钙卫蛋白抗体包被胶乳颗粒 10-35%

氯化钠 7-10g/L

牛血清蛋白 4-7g/L

叠氮钠 4-6g/L

任选的,所述结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液的pH值为7-8。

6.根据权利要求5所述的组合物,其特征在于:

所述含多聚物的缓冲液包括如下浓度的各组分:

三羟甲基氨基甲烷 25mmol/L

氯化钠 8.5g/L

Triton X-100 5g/L

牛血清蛋白 5g/L

乙二醇聚氧乙烯醚 50g/L

叠氮钠 4g/L

任选的,所述含多聚物的缓冲液的pH值为7.0;

任选的,所述结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液包括如下浓度的各组分:

磷酸盐 100mmol/L

抗人钙卫蛋白抗体包被胶乳颗粒 15%

氯化钠 8.5g/L

牛血清蛋白 5g/L

叠氮钠 5g/L;

任选的,所述结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液的pH值为7.5。

7.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于:还包括校准品;

任选的,所述校准品为钙卫蛋白校准品,所述钙卫蛋白校准品的浓度分别为10,30,100,300,600ug/g。

8.根据权利要求7所述的组合物,其特征在于:所述结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液采用以下方法制备而成:

取聚苯乙烯胶乳加入MES缓冲液中,同时加入EDC和NHS,待溶解混合均匀后,活化胶乳,当胶乳活化完成后,将胶乳均分为两份,其中一份胶乳加入抗人钙卫蛋白单克隆抗体A,另一份胶乳加入抗人钙卫蛋白单克隆抗体B,并将两者均进行交联,交联完成后均进行离心,弃去上清液,分别将两者的沉淀溶于MES缓冲液中,得到两者的钙卫蛋白单克隆抗体标记液,然后将两者的钙卫蛋白单克隆抗体标记液进行混合,即制得结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液。

9.根据权利要求8所述的组合物,其特征在于:所述两者的钙卫蛋白单克隆抗体标记液是按1:1的体积比进行混合。

10.权利要求1至9任一项所述的组合物在制备检测钙卫蛋白的产品中的应用;

任选的,所述产品为试剂盒。

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