本发明涉及一种检测草本饮料中马来酸氯苯那敏及其他化学药物的方法。
背景技术：
草本饮料是中国南方(广东、广西、福建等地)流行的一种饮料，以中医养生理论为指导，以中草药为原料，具有清热解毒、生津止渴等功效。草本饮料属于一种普通食品，然而一些不法商家却在草本饮料中添加马来酸氯苯那敏、盐酸苯海拉明、茶碱等药物，用以增强草本饮料的功效，进而提升产品销量，给消费者的健康带来了安全隐患，严重扰乱草本饮料行业的发展。而近十几年，在中成药、保健食品、化妆品和食品中添加化学药物的现象越来越严重，应当加强监管，并进行严厉打击。然而，目前并没有有效的方法对草本饮料中非法添加的化学药物的浓度进行快速测定，因而也无法对市场上的草本饮料进行有效的质量监管。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种检测草本饮料中马来酸氯苯那敏及其他化学药物的方法。
本发明所采取的技术方案是：
一种检测草本饮料中马来酸氯苯那敏及其他化学药物的方法，包括以下步骤：
1)草本饮料样品溶液的制备：固体草本饮料用甲醇-乙腈混合溶液溶解，液体草本饮料用甲醇-乙腈混合溶液稀释，得到草本饮料样品溶液；
2)系列对照样品溶液的制备：先用甲醇-乙腈混合溶液将马来酸氯苯那敏配制成标准溶液，再取多份标准溶液，用甲酸溶液稀释至不同倍数，得到系列对照样品溶液；
3)标准曲线的制作：将系列对照样品溶液分别注入高效液相色谱-质谱联用仪中，得到色谱图和质谱图，依据色谱图以系列对照样品溶液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得出回归方程；
4)草本饮料样品溶液的测定：将草本饮料样品溶液注入高效液相色谱-质谱联用仪中，依据质谱图定性判断草本饮料中是否含马来酸氯苯那敏，依据质谱图和回归方程计算草本饮料中马来酸氯苯那敏的浓度；
5)参照步骤1)～4)的方法，测定草本饮料中其他化学药物的浓度。
步骤1)所述的固体草本饮料为草本饮料颗粒、草本饮料粉末中的一种。
步骤1)和2)所述的甲醇-乙腈混合溶液中甲醇、乙腈的体积比为1:1。
步骤2)所述的标准溶液的浓度为500～1000μg/l。
步骤2)所述的甲酸溶液为质量分数0.5％的甲酸水溶液。
步骤2)所述的系列对照样品溶液中各份溶液的浓度依次为10μg/l、20μg/l、50μg/l、100μg/l和200μg/l。
步骤5)所述的其他化学药物为茶碱、盐酸苯海拉明、枸橼酸喷托维林、磷酸苯丙哌林和氯霉素。
本发明的有益效果是：本发明的检测方法操作简单，检测速度快，精密度良好，灵敏度高，填补了现阶段草本饮料非法添加检测的空白。
具体实施方式
一种检测草本饮料中马来酸氯苯那敏及其他化学药物的方法，包括以下步骤：
1)草本饮料样品溶液的制备：固体草本饮料用甲醇-乙腈混合溶液溶解，液体草本饮料用甲醇-乙腈混合溶液稀释，得到草本饮料样品溶液；
2)系列对照样品溶液的制备：先用甲醇-乙腈混合溶液将马来酸氯苯那敏配制成标准溶液，再取多份标准溶液，用甲酸溶液稀释至不同倍数，得到系列对照样品溶液；
3)标准曲线的制作：将系列对照样品溶液分别注入高效液相色谱-质谱联用仪中，得到色谱图和质谱图，依据色谱图以系列对照样品溶液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得出回归方程；
4)草本饮料样品溶液的测定：将草本饮料样品溶液注入高效液相色谱-质谱联用仪中，依据质谱图定性判断草本饮料中是否含马来酸氯苯那敏，依据质谱图和回归方程计算草本饮料中马来酸氯苯那敏的浓度；
5)参照步骤1)～4)的方法，测定草本饮料中其他化学药物的浓度。
优选的，步骤1)所述的固体草本饮料为草本饮料颗粒、草本饮料粉末中的一种。
优选的，步骤1)和2)所述的甲醇-乙腈混合溶液中甲醇、乙腈的体积比为1:1。
优选的，步骤2)所述的标准溶液的浓度为500～1000μg/l。
优选的，步骤2)所述的甲酸溶液为质量分数0.5％的甲酸水溶液。
优选的，步骤2)所述的系列对照样品溶液中各份溶液的浓度依次为10μg/l、20μg/l、50μg/l、100μg/l和200μg/l。
优选的，步骤5)所述的其他化学药物为茶碱、盐酸苯海拉明、枸橼酸喷托维林、磷酸苯丙哌林和氯霉素。
下面结合具体实施例对本发明作进一步的解释和说明。
实施例1：
一种测定固体草本饮料中马来酸氯苯那敏及其他化学药物浓度的方法，包括以下步骤：
1)草本饮料样品溶液的制备：将固体草本饮料研细混匀，称取0.2g，加入25ml容量瓶中，加入甲醇-乙腈混合溶液，超声提取15分钟，静置，加甲醇-乙腈混合溶液定容，摇匀，精密量取上述试液5ml于10ml容量瓶中，用甲酸水溶液稀释至刻度，摇匀，过滤，滤液即为草本饮料样品溶液；(甲醇-乙腈混合溶液中甲醇、乙腈的体积比为1:1；甲酸溶液为质量分数0.5％的甲酸水溶液)
2)系列对照样品溶液的制备：先用甲醇-乙腈混合溶液将马来酸氯苯那敏配制成浓度为500μg/l的标准溶液，再取5份标准溶液，用甲酸溶液稀释至不同倍数，得到浓度依次为10μg/l、20μg/l、50μg/l、100μg/l和200μg/l的系列对照样品溶液；(甲醇-乙腈混合溶液中甲醇、乙腈的体积比为1:1；甲酸溶液为质量分数0.5％的甲酸水溶液)
3)标准曲线的制作：将系列对照样品溶液分别注入高效液相色谱-质谱联用仪中，得到色谱图和质谱图，依据色谱图以系列对照样品溶液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得出回归方程；
4)草本饮料样品溶液的测定：将草本饮料样品溶液注入高效液相色谱-质谱联用仪中，依据质谱图定性判断草本饮料中是否含马来酸氯苯那敏，依据质谱图和回归方程计算草本饮料中马来酸氯苯那敏的浓度；
5)参照步骤1)～4)的方法，测定固体草本饮料中其他化学药物的浓度。
定性判断：草本饮料样品溶液与对照样品溶液所选择的两对离子的质核比一致的色谱图中，如出现保留时间偏差在±2.5％之内的色谱峰，且草本饮料样品溶液定性离子对应的lc-ms/ms色谱峰的相对丰度与浓度相当的对照品溶液的定性离子的相对丰度比较时，相对偏差不超过下表规定的范围，可确定草本饮料样品溶液中添加了相应的化学成分。
表1相对离子丰度和相对偏差表
定量计算：
草本饮料中目标成分的含量计算如下：
式中：
xi——供试品中目标成分的含量，mg/100ml(液体供试品)或mg/g(固体供试品)；
ci——由标准曲线计算得到的供试品溶液中目标成分的浓度，ng/ml；
v——供试品稀释液体积，ml；
m——供试品的取样量，g或ml。
实施例2：
一种测定液体草本饮料中马来酸氯苯那敏及其他化学药物浓度的方法，包括以下步骤：
1)将液体草本饮料摇匀，静置，称取10ml上清液，加入50ml容量瓶中，加入30ml甲醇-乙腈混合溶液，超声30分钟，放冷至室温，加甲醇-乙腈混合溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取上述试液5ml于10ml容量瓶中，用甲酸水溶液稀释至刻度，摇匀，过滤，得到草本饮料样品溶液；(甲醇-乙腈混合溶液中甲醇、乙腈的体积比为1:1；甲酸溶液为质量分数0.5％的甲酸水溶液)
2)系列对照样品溶液的制备：先用甲醇-乙腈混合溶液将马来酸氯苯那敏配制成浓度为500μg/l的标准溶液，再取多份标准溶液，用甲酸溶液稀释至不同倍数，得到浓度依次为10μg/l、20μg/l、50μg/l、100μg/l和200μg/l的系列对照样品溶液；(甲醇-乙腈混合溶液中甲醇、乙腈的体积比为1:1；甲酸溶液为质量分数0.5％的甲酸水溶液)
3)标准曲线的制作：将系列对照样品溶液分别注入高效液相色谱-质谱联用仪中，得到色谱图和质谱图，依据色谱图以系列对照样品溶液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得出回归方程；
4)草本饮料样品溶液的测定：将草本饮料样品溶液注入高效液相色谱-质谱联用仪中，依据质谱图定性判断草本饮料中是否含马来酸氯苯那敏，依据质谱图和回归方程计算草本饮料中马来酸氯苯那敏的浓度；
5)参照步骤1)～4)的方法，测定液体草本饮料中其他化学药物的浓度。
实施例1和2中的色谱仪的相关参数指标如下：色谱柱：thermoaccucorec18柱2.6μm，100mm×2.1mm；流动相：质量分数0.5％的甲酸水溶液；梯度洗脱程序见表2，溶剂a为质量分数0.5％的甲酸水溶液，溶剂b为甲醇；流速：0.3ml/min；柱温：35℃；进样量：10μl；检测波长：254nm、220nm；扫描波长范围：200～400nm。
表2梯度洗脱程序
实施例1和2中的质谱检测器的相关参数指标如下：采用质谱检测器，电喷雾离子化源(esi)，毛细管电压正离子模式为5500v，负离子模式为-4500v，进行多反应监测(mrm)，各化合物质谱参数可参考下表的规定：
表3各化合物的质谱参数表
*定量离子
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。