一种ABO/Rh血型诊断试纸卡的制作方法

本实用新型属于医学检验技术领域，尤其涉及一种ABO/Rh血型诊断试纸卡。

背景技术：

目前临床常用的ABO/Rh血型检测方法有玻片法、试管法和微柱凝胶法等。以上方法准确、客观，具有高度的敏感性和特异性，但仍有不足之处：(1)需专业人员操作；(2)需特定的实验仪器；(3)需适宜的实验条件；(4)反应时间较长；(5)需要的血量较多；(6)样本需要前处理。因此，传统的血型检测方法虽能满足临床及实验室的需求，但不能满足战地环境、重大自然灾害等特殊情况以及采血现场、家庭使用等非专业人员检测的需要。因此，价格便宜、简便快捷、易于携带、结果直观、易于判读的即时检验(point of care test,POCT)方法对特殊情况的血型检测至关重要。

技术实现要素：

针对现有技术中的上述缺陷，本实用新型的主要目的在于提供一种ABO/Rh血型诊断试纸卡，其能同步检测ABO/Rh血型，且具有易于携带、操作方法简单，结果易于判断等优点。

为了达到上述目的，本实用新型采用如下技术方案：一种ABO/Rh血型诊断试纸卡，包括底板以及底板上粘接的试纸条，所述试纸条设置有多个冲洗区，以及沿层析方向与各个冲洗区对应的多个上样区，所述上样区分别含有抗A、B或Rh血型抗原的固相单克隆抗体，用于加入血液样品以及血型检测结果的判读；所述冲洗区用于加入冲洗液，推动血液样品沿层析方向流动，所述冲洗液包含抗A、B或Rh血型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的3种冲洗液，用于分别标记A型、B型或RH阳性红细胞。

作为进一步的优选，所述试纸条为并列设置的3个，其长度方向与层析方向一致，每个所述试纸条上沿层析方向依次设置有冲洗区及上样区，每个上样区含有不同血型抗原的固相单克隆抗体，所述上样区用于加入血液样品以及血型检测结果的判读，每个所述冲洗区用于加入冲洗液，推动血液样品沿层析方向流动，所述冲洗液包含抗A、B或Rh血型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的3种冲洗液，用于分别标记A型、B型以及RH阳性红细胞。

作为进一步的优选，所述试纸条上方还包括一面板，所述底板与面板形成的空间将所述试纸条固定在内；所述面板上沿层析方向设置有多个冲洗孔，以及沿层析方向与各个冲洗孔对应的多个上样孔，所述冲洗孔用于加入包含抗A、B或Rh血型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的冲洗液，所述上样孔用于加入待检测血液样品。

作为进一步的优选，所述冲洗孔及上样孔分别为3个。

作为进一步的优选，所述底板及面板为有硬质纸、机玻璃、聚苯乙烯、聚碳酸酯类透明或不透明的塑料。

作为进一步的优选，所述底板上还粘接有吸水垫，位于层析方向的末端，与所述试纸条端部搭接。

作为进一步的优选，所述吸水垫为吸水滤纸。

本实用新型的有益效果是：本实用新型ABO/Rh血型诊断试纸卡，包括底板以及底板上粘接的试纸条，所述试纸条设置有多个冲洗区，以及沿层析方向与各个冲洗区对应的多个上样区，所述上样区分别含有抗A、B或Rh血型抗原的固相单克隆抗体，用于加入血液样品以及血型检测结果的判读；所述冲洗区用于加入冲洗液，推动血液样品沿层析方向流动，所述冲洗液包含抗A、B或Rh血型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的3种冲洗液，能分别标记A型、B型或RH阳性红细胞。本实用新型检测时在各上样区加入待检测血样，然后在各冲洗区分别加入不同的冲洗液，所述冲洗液中包含抗A、B或Rh血型抗原的单克隆抗体标记过的纳米金颗粒，所述冲洗液沿层析方向移动，与待检测血样的相应血型的红细胞结合并在上样区显色，例如当所述冲洗液为包含抗A血型抗原的单克隆抗体标记过的纳米金颗粒时，若待检测血样为A型，则待检测血样的A型抗原则与纳米金颗粒上的抗A血型抗原的单克隆抗体在上样区发生特异性结合，从而红细胞固定显色，若不是A型则不在上样区显色，其它血型类似，因而本实用新型可同时检测A、B、Rh血型。

附图说明

为了更清楚地说明本实用新型实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本实用新型的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本实用新型实施例1血型诊断试纸卡的结构示意图。

图2为本实用新型实施例2血型诊断试纸卡的结构示意图。

图3a-3h为本实用新型实施例2血型诊断试纸卡的检测结果示意图。

附图中标记的说明如下:1-底板，2.1、2.2、2.3-试纸条，D-冲洗区，S-上样区，3-面板，D1、D2、D3-冲洗孔，S1、S2、S3-上样孔。

具体实施方式

本实用新型通过提供一种ABO/Rh血型诊断试纸卡，解决了传统的血型检测方法不能满足战地环境、重大自然灾害等特殊情况以及采血现场、家庭使用等非专业人员检测需要的缺陷。

为了解决上述缺陷，本实用新型实施例的主要思路是：

本实用新型实施例ABO/Rh血型诊断试纸卡，包括底板以及底板上粘接的试纸条，所述试纸条设置有多个冲洗区，以及沿层析方向与各个冲洗区对应的多个上样区，所述上样区分别含有抗A、B或Rh血型抗原的固相单克隆抗体，用于加入血液样品以及血型检测结果的判读；所述冲洗区用于加入冲洗液，推动血液样品沿层析方向流动，所述冲洗液包含抗A、B或Rh血型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的3种冲洗液，用于分别标记A型、B型或RH阳性红细胞。

纳米金，即指直径在1-100nm的金微小颗粒，具有高电子密度、催化作用和介电特性，能够与多种生物大分子相结合，且不影响其生物学活性。基于纳米金的免疫探针标记技术是以纳米金作为示踪物质应用于抗原抗体间特异性反应的一种新型免疫标记技术，是继酶免疫标记、突光免疫标记和同位素免疫标记之后的新型免疫标记技术。这种标记技术不仅具有准确、简单、快速及无污染等优点，而且不依赖昂贵的检测仪器，可以用肉眼进行辨别，特别适合广大基层单位、医院、和大范围的普查等。

所述冲洗液的基液可选自：柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、乙酸-乙酸钠缓冲液、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液、甘氨酸-盐酸缓冲液等，或者它们的稀释液。

本实用新型实施例利用制备纳米金探针作为检测示踪物，及不同单克隆细胞来源的抗A、B、Rh血型抗原的鼠单克隆抗体作为检测用的固相抗体，研发出能联合检测ABO/Rh血型的快速诊断试纸卡，使之获得满意的灵敏性、特异性、重复性、稳定性。

本实用新型实施例能够同步检测ABO/Rh血型；体积小、重量轻，易于携带；无需外接电源或其它实验室设备；结果准确可靠，具有较高的敏感性和特异性；操作方法简单，结果易于判断，即使非专业人员也可使用。因而特别适合于战场环境及重大自然灾害等特殊环境下，非专业人员对伤员进行血型快速检测，同时本实用新型实施例产品也能满足采供血机构、军队、基层医院及家庭用户对血型检测的简单、快速及无污染的需求。

下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。

实施例1

利用单克隆抗体技术制备表达抗A、B或Rh血型抗原特异性抗体的鼠单克隆杂交瘤细胞，并用腹水法制备、收集单克隆抗体。

利用纳米金探针标记技术，将抗A、B或Rh血型抗原的单克隆抗体对纳米金颗粒进行标记，从而获得能检测A、B或Rh血型抗原的纳米金探针。

如图1所示，本实施例ABO/Rh血型诊断试纸卡，包括底板1以及底板1上粘接的三个试纸条(2.1、2.2、2.3)，分别为A型试纸条、B型试纸条和Rh型试纸条，三个试纸条的长度方向与层析方向一致，且并列设置；每个试纸条上沿层析方向依次设置有冲洗区D及上样区S；上样区S用于加入被检测血液1-2滴，和进行血型抗原结果的判读；

其中A型试纸的上样区S含有抗A血型抗原的固相单克隆抗体，B型试纸的上样区S含有抗B血型抗原的固相单克隆抗体，Rh型试纸的上样区S含有抗Rh血型抗原的固相单克隆抗体；每个所述冲洗区D用于加入冲洗液，用于推动血液样品沿层析方向流动，所述冲洗液包含抗A、B或Rh血型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的3种冲洗液，能分别标记A型、B型以及RH阳性红细胞。A型试纸用抗A血型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的冲洗液，B型试纸用抗B血型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的冲洗液，Rh型试纸用抗Rh血型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的冲洗液。

检测时，先在三个试纸条(2.1、2.2、2.3)的各自上样区分别滴加待检测血样，然后分别在试纸条2.1的冲洗区加入包含抗A型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的冲洗液、在试纸条2.2的冲洗区加入包含抗B型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的冲洗液，以及在试纸条2.3的冲洗区加入包含Rh血型的抗D抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的冲洗液。上述冲洗区的各冲洗液沿层析方向移动至上样区时，与待检测血样的相应血型的红细胞结合并显色，例如：当所述冲洗液包含抗B血型抗原的单克隆抗体标记过的纳米金颗粒时，如果待检测血样为B型，则待检测血样的B型抗原与纳米金颗粒上的抗B血型抗原的单克隆抗体发生特异性结合，从而在上样区红细胞固定显色，若不是B型，则在上样区不显色。其他血型类似。因而本实施例可同时检测A、B、Rh血型，且肉眼可见。

当然，上述试纸条2.1、2.2及2.3的加入单克隆抗体的类型以及先后加入顺序均可以变化。

所述冲洗液的基液为邻苯二甲酸-盐酸缓冲液，PH值为4.2，用量为50μl。

上述底板1为聚苯乙烯塑料。

实施例2

利用单克隆抗体技术制备表达抗A、B或Rh血型抗原特异性抗体的鼠单克隆杂交瘤细胞，并用腹水法制备、收集单克隆抗体。

利用纳米金探针标记技术，将抗A、B或Rh血型抗原的单克隆抗体对纳米金颗粒进行标记，从而获得能检测A、B或Rh血型抗原的纳米金探针。

如图2所示，本实施例ABO/Rh血型诊断试纸卡，包括底板1、面板3以及在底板1与面板3之间粘接固定的三个试纸条(2.1、2.2、2.3)，三个试纸条的长度方向与层析方向一致，且并列设置；所述面板3上沿层析方向设置有多个冲洗孔D1、D2、D3，以及沿层析方向与各个冲洗孔对应的多个上样孔S1、S2、S3，所述冲洗孔D1、D2、D3用于分别加入包含抗A、B或Rh血型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的冲洗液，所述上样孔S1、S2、S3用于分别加入待检测血液样品及结果判读。

检测时，先在三个试纸条(2.1、2.2、2.3)的各自上样孔(S1、S2、S3)分别滴加待检测血样，然后分别在试纸条2.1的冲洗孔D1加入包含抗A型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的冲洗液、在试纸条2.2的冲洗孔D2加入包含抗B型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的冲洗液，以及在试纸条2.3的冲洗孔D3加入包含Rh血型的抗D抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的冲洗液。上述各冲洗液沿层析方向移动，与待检测血样的相应血型的红细胞结合并显色，例如：当所述冲洗液包含抗A血型抗原的单克隆抗体标记过的纳米金颗粒时，如果待检测血样为A型，则待检测血样的A型抗原与纳米金颗粒上的抗A血型抗原的单克隆抗体发生特异性结合，从而红细胞固定显色，若不是A型，则不显色。其他血型类似。因而本实施例可同时检测A、B、Rh血型，且肉眼可见。并且面板3的设置避免了杂质的污染，使检测结果更灵敏、准确。

当然，上述试纸条2.1、2.2及2.3的加入单克隆抗体的类型以及先后加入顺序均可以变化。

所述冲洗液的基液为柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液，PH值为4.7，用量为20μl。

上述底板1及面板3为聚碳酸酯塑料。

图3a-3h为本实用新型实施例2血型诊断试纸卡的检测结果示意图。

实施例3

本实施例3与实施例1类似，不同之处在于：所述底板1上还粘接有吸水垫，位于层析方向的末端，与所述试纸条2.1、2.2、2.3端部搭接；吸取多余液体，提高液体由前向后运动速度，缩短检测时间。所述吸水垫为吸水滤纸。所述冲洗液的基液为磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液缓冲液，PH值为3.7，用量为10μl。

上述本申请实施例中的技术方案，至少具有如下的技术效果或优点：

本实用新型ABO/Rh血型诊断试纸卡，包括底板以及底板上粘接的试纸条，所述试纸条设置有多个冲洗区，以及沿层析方向与各个冲洗区对应的多个上样区，所述上样区分别含有抗A、B或Rh血型抗原的固相单克隆抗体，用于加入血液样品以及血型检测结果的判读；所述冲洗区用于加入冲洗液，推动血液样品沿层析方向流动，所述冲洗液包含抗A、B或Rh血型抗原的单克隆抗体标记的纳米金探针的3种冲洗液，能分别标记A型、B型或RH阳性红细胞。本实用新型检测时在各上样区加入待检测血样，然后在各冲洗区分别加入不同的冲洗液，所述冲洗液中包含抗A、B或Rh血型抗原的单克隆抗体标记过的纳米金颗粒，所述冲洗液沿层析方向移动，与待检测血样的相应血型的红细胞结合并在上样区显色，例如当所述冲洗液为包含抗A血型抗原的单克隆抗体标记过的纳米金颗粒时，若待检测血样为A型，则待检测血样的A型抗原则与纳米金颗粒上的抗A血型抗原的单克隆抗体在上样区发生特异性结合，从而红细胞固定显色，若不是A型则不在上样区显色，其它血型类似，因而本实用新型可同时检测A、B、Rh血型。

尽管已描述了本实用新型的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本实用新型范围的所有变更和修改。显然，本领域的技术人员可以对本实用新型进行各种改动和变型而不脱离本实用新型的精神和范围。这样，倘若本实用新型的这些修改和变型属于本实用新型权利要求及其等同技术的范围之内，则本实用新型也意图包含这些改动和变型在内。