本实用新型涉及食品安全检测试剂盒，具体涉及一种用于磺胺类、喹诺酮类快速检测试剂盒。
背景技术：
固相萃取是一种用于各类化合物分析的样品前处理技术，应用领域包括药物分析、农药残留分析、食品添加剂分析、水质监测、兴奋剂检测、生物标记物监测等。该技术主要实现的功能使将化合物从复杂的基质中富集、分离、提纯，用于降低仪器分析的干扰，提高分析灵敏度。
磺胺类药物、喹诺酮类药物是一种广谱抗菌药，临床上主要用于预防和治疗感染性疾病，然而兽医临床和畜牧养殖业中作为饲料添加剂或动物疾病治疗药物广泛应用，但是磺胺类药物、喹诺酮类药物会引起人过敏性反应，且可能有致癌性，使其在动物性食品中残留引起生态环境污染和人类健康危害的潜在威胁已备受关注，而各类检测方法也随之应运而生。在对样本中的磺胺类药物、喹诺酮类药物进行检测时，需要对其进行前处理操作，与传统的仪器检测方法相比，快速检测方法具有检测速度快、检测灵敏度高、实现高通量检测需求等优势，在食品安全检测领域普遍使用。
固相萃取是一种常用的用于食品危害因子快速检测的样本前处理方法，然而现有的固相萃取柱很难实现多种目标物的同时高效吸附，并且洗脱过程常会用到有机溶剂，含有有机溶剂的待测物不能直接应用于基于抗原抗体反应的免疫学快速产品的检测，还需要去除有机溶剂，从而增加了后续的操作流程。
技术实现要素：
为了解决以上现有技术存在的技术问题，本实用新型提供了一种用于磺胺类、喹诺酮类快速检测试剂盒，试剂盒中的前处理固相萃取柱可以实现两类目标物的高效萃取，简化样本前处理流程，提高试剂盒的检测效率。
为了实现上述目的，本实用新型提供以下技术方案：
一种用于磺胺类、喹诺酮类快速检测试剂盒，包括卡和前处理固相萃取柱，所述固相萃取柱包括柱体、填料、洗脱液，所述柱体底部中间为突出的出液口，所述柱体底部设有第一筛板，所述第一筛板上设有第一填料，所述第一填料上设有第二筛板，所述第二筛板上设有第二填料，所述第二填料上端设有第三筛板，所述柱体上端为柱盖，所述柱体通过柱盖中间的通孔与注射器相连通，所述注射器内装有洗脱液；
所述第一填料为羟基化的石墨烯，所述第二填料为羧基化的磁纳米粒子和裸磁纳米粒子的混合物；
磺胺类为磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶等，喹诺酮类为环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、依诺沙星等；
所述洗脱液为含1%DMF，0.5%曲拉通的0.05M PBS。
进一步的，所述磺胺类、喹诺酮类快速检测为二联卡。
进一步的，所述第二填料的填充质量大于第一填料的填充质量。
进一步的，所述第二填料中羧基化的磁纳米粒子和裸磁纳米粒子的质量比为（2~5）:1。
进一步的，所述羧基化的磁纳米粒子和裸磁纳米粒子的粒径为50~200nm。
有益效果：本实用新型提供了一种用于磺胺类、喹诺酮类快速检测试剂盒，该试剂盒包括磺胺类、喹诺酮类快速检测卡和前处理固相萃取柱，前处理固相萃取柱上层使用羧基化的磁纳米粒子和裸磁纳米粒子混合物作为填料，下层使用羟基化的石墨烯，本实用新型采用纳米粒子装填固相萃取柱具有以下优势：纳米粒子的粒径小、比表面积大、吸附位点多、吸附量大、萃取效率高；并且使用两种填料对两类目标物进行吸附，从而降低了两类目标物被同一填料吸附时空间位阻的影响，提高吸附效果，同时上层填料中的裸磁纳米粒子对蛋白质、脂肪、糖类等杂质具有良好的吸附效果，可以有效去除提取物中的大分子杂质。固相萃取柱使用含1%DMF，0.5%曲拉通的0.05M PBS作为洗脱液，洗脱后的溶液基本不含有机溶剂，省略了去除有机溶剂的程序，因此可以直接作为检测样本应用于快检产品的检测，提高了检测效率。本实用新型将二联检测卡与前处理固相萃取柱进行组合制备成快速检测试剂盒，便于样本前处理操作以及目标物检测，该试剂盒制备工艺简单，原料价格低廉，易于实现大规模工业生产。
附图说明
图1为本实用新型的结构示意图。其中（A）为磺胺类、喹诺酮类二联快速检测卡，T1线为磺胺类药物的检测线，T2线为喹诺酮类药物的检测线，C线为质控线；（B）为前处理固相萃取柱。
图中：1、出液口；2、第一筛板；3、第一填料；4、第二筛板；5、第二填料；6、第三筛板；7、柱盖。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本实用新型，但实施例仅是范例性的，并不对本实用新型的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本实用新型的精神和范围下可以对本实用新型技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本实用新型的保护范围内。
以下实施例所用磺胺类、喹诺酮类快速检测卡、羟基化的石墨烯、羧基化的磁纳米粒子、裸磁纳米粒子均从市场上购得。
实施例1
一种用于磺胺类、喹诺酮类快速检测试剂盒，包括磺胺类、喹诺酮类快速检测卡和前处理固相萃取柱，前处理固相萃取柱包括柱体、填料、洗脱液，所述柱体底部中间为突出的出液口1，所述柱体底部设有第一筛板2，所述第一筛板2上设有第一填料3，所述第一填料3上设有第二筛板4，所述第二筛板4上设有第二填料5，所述第二填料5上端设有第三筛板6，所述柱体上端为柱盖7，所述柱体通过柱盖7中间的通孔与注射器相连通，所述注射器内装有洗脱液；
所述第一填料为20mg羟基化的石墨烯，所述第二填料为羧基化的磁纳米粒子和裸磁纳米粒子，两种磁纳米粒子的粒径为100nm，磁纳米粒子和裸磁纳米粒子的质量分别为30mg和10mg；所述洗脱液为含1%DMF，0.5%曲拉通的0.05M PBS。
1、前处理固相萃取柱的组装
在柱体内按照第一筛板、第一填料、第二筛板、第二填料、第三筛板、柱盖的顺序进行组装。
2、样本预处理
取2g组织样本，加入2mL含0.05%曲拉通（V/V），0.5%EDTA（W/V）的0.05M pH4.5的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液，充分振荡后离心。上清加入步骤1制备的前处理固相萃取柱中，控制流速在2滴/秒左右；待上样液体全部流出萃取柱后，分别加入0.5mL酸性/碱性 洗脱液进行洗脱，控制流速在2滴/秒左右。将收集到的洗脱液等体积合并后，用于检测。
3、添加回收实验
向阴性样本中分别添加不同含量的喹诺酮类（环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、依诺沙星）和磺胺类（磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶）标准品溶液，添加含量分别为0、1、2、3、4 μg/kg，其中0的添加为空白对照。将添加目标物后的阴性样本按照步骤2的前处理方法进行前处理，得到洗脱液进行检测。
将步骤3得到的洗脱液滴加到磺胺类、喹诺酮类快速检测卡上进行检测，从表1中得出，空白对照中未测出目标物的存在，含有目标物的样本经过前处理固相萃取柱处理后直接应用到检测卡上进行检测，磺胺类药物在3μg/kg及以上，喹诺酮类药物在2μg/kg浓度及以上时，均可以检测，判定为阳性结果。说明目标物的添加回收结果较好，该试剂盒可以应用于含有磺胺类和喹诺酮类样本的前处理操作以及直接检测。
表1
4、实际样本检测
分别选取经过仪器方法检测确认的阴性和阳性样本，采用本实用新型的快速检测试剂盒进行检测，并对结果进行统计分析，其检测结果见表2：
表2