本发明涉及一种中药制剂的鉴别方法，特别是涉及一种治疗滑膜炎的中药制剂的鉴别方法，属于中药制剂质量控制技术领域。
背景技术：
好的药品质量是发挥药品疗效的基础和前提，定性鉴别是鉴定药品真伪、保证药品质量的重要一环。中药制剂一般药味众多，成份复杂，自古就有“丸散膏丹，神仙莫辨”之说，说明中药制剂的辨识很难。且现代中药制剂大多经过了提取及纯化，多数药材失去了性状及显微特征，因此给药品的质量控制带来了一定难度，这就要运用现代技术手段去解决。
中药制剂常用的鉴定方法主要有性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、紫外-可见分光光度法、纸色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法及指纹图谱鉴别等。这些鉴别方法各有特点，对一个中药制剂究竟应该选择什么样的鉴别方法，需要反复试验研究和方法学验证来选择，应尽量选用方法简单、容易操作、专属性强、重现性好、经济实用的方法。如果专属性不强，容易发生假阳性。
薄层色谱法（tlc法），系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层，待点样、展开后，根据比移值（rf）与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（rf）作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法具有设备简单、操作方便、快速、显色方式多、灵敏度高（较纸层析）等优点，特别适合于中药制剂的鉴别。
本发明所述的治疗滑膜炎的中药制剂是由黄芪、秦艽、当归、续断、牡丹皮、柴胡、姜黄、桑寄生、绵萆薢、川牛膝、甘草等11味中药制成的颗粒剂，具有益气活血、通利关节、化湿消肿的作用，用于慢性膝关节滑膜炎所致的膝关节肿胀、疼痛、功能受限等症，效果良好。为了控制产品质量，杜志谦等采用薄层色谱法对其中的姜黄、当归、柴胡、续断进行了薄层鉴别，用高效液相色谱法对黄芪甲苷进行了含量测定，有关研究公开于《中国实验方剂学杂志》2010年第8期上，论文题目为：“膝悦颗粒的定性定量方法”。此质量标准作为新药临床前研究的质量标准，对申请新药注册及控制产品质量有积极作用。但后来经过对其多批产品的深入研究，发现其薄层鉴别方法有不足之处，表现在：①姜黄的鉴别中，因姜黄素不溶于水，采用水提法姜黄素很难溶出，因此成品中含量少，很难检出，重现性差，易造成假阴性；②柴胡的鉴别中，样品背景干扰大，展开剂对主斑点的分离能力差，用药材对照对应性差，展开次数多，费时；③续断的鉴别中，样品背景干扰大，展开次数多，费时；④当归的鉴别中，展开剂的极性偏大，色谱主斑点的rf值偏大，主斑点不集中；⑤没有对所含黄芪、秦艽、川牛膝等进行鉴别。
现有技术的以上不足，严重影响到产品的质量控制及结果判断。因此，为了更好的控制产品质量，有必要对其标准中的薄层鉴别项目进行改进提高。
技术实现要素：
针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种治疗滑膜炎的中药制剂的鉴别方法，该方法对于该中药制剂中柴胡、续断、当归、黄芪、秦艽和川牛膝具有较好的鉴别效果，方法简单，专属性强，重现性好，可更好地控制产品质量。
为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案如下：一种治疗滑膜炎的中药制剂的鉴别方法，所述的中药制剂是由黄芪、秦艽、当归、续断、牡丹皮、柴胡、姜黄、桑寄生、绵萆薢、川牛膝和甘草制备而成的颗粒剂，所述鉴别是对该中药制剂中的黄芪、续断、柴胡、秦艽、当归和川牛膝中的至少一种所做的薄层色谱鉴别；
（1）所述黄芪的鉴别方法，包括以下步骤：
a供试品溶液的制备：取本品5g，研细，加水50ml使溶解，离心，取上清液，用乙醚洗涤2次，每次30ml，取水层，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用1%氢氧化钠溶液洗涤3次，每次30ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
b对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
c鉴别方法：照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取供试品溶液2μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（2）所述续断的鉴别方法，包括以下步骤：
a供试品溶液的制备：按照（1）黄芪鉴别方法中，步骤a的操作制备供试品溶液。
b对照品溶液的制备：取川续断皂苷vi对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
c鉴别方法：照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取上述供试品溶液2μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（3）所述柴胡的鉴别方法，包括以下步骤：
a供试品溶液的制备：按照（1）黄芪鉴别方法中，步骤a的操作制备供试品溶液。
b对照品溶液的制备：取柴胡皂苷a对照品、柴胡皂苷b2对照品，分别加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
c鉴别方法：照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取上述供试品溶液与对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸乙醇溶液，在60℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
（4）所述秦艽的鉴别方法，包括以下步骤：
a供试品溶液的制备：
取所述中药制剂1g，研细，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至约5ml，作为供试品溶液。
b对照药材溶液的制备：取小秦艽对照药材0.5g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至约2ml，作为对照药材溶液。
c对照品溶液的制备：取龙胆苦苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
d鉴别方法：照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶gf254薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水（10∶2∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
（5）所述当归的鉴别方法，包括以下步骤：
a供试品溶液的制备：取所述中药制剂10g，研细，加水50ml，微热使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次50ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
b对照药材溶液的制备：取当归对照药材0.2g，加乙醚20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。
c鉴别方法：照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（9∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
（6）所述川牛膝的鉴别方法，包括以下步骤：
a供试品溶液的制备：取所述中药制剂5g，研细，加水50ml，超声处理30分钟，离心，取上清液，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
b对照药材溶液的制备：取川牛膝对照药材1g，加乙酸乙酯30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，制成对照药材溶液。
c鉴别方法：照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-丙酮（8∶4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
进一步的，在所述（6）川牛膝鉴别方法的步骤a和步骤b中，所述超声处理时的超声功率为300w，频率为50khz。
有益效果
本发明提供的一种治疗滑膜炎的中药制剂的鉴别方法，相对于现有技术来说，改良了柴胡、续断、当归的鉴别方法，增加了黄芪、秦艽、川牛膝的鉴别方法，删除了姜黄的鉴别。方法本身操作简单，色谱斑点清晰，阴性无干扰，最大限度的减少了样品背景的干扰，专属性强，展开次数少，重现性好，可更好地控制产品质量，有良好的应用价值。
附图说明
图1为本发明对于黄芪的鉴别检视结果图片；
图2为本发明对于续断的鉴别检视结果图片；
图3为本发明对于柴胡的日光下鉴别检视结果图片；
图4为本发明对于柴胡的紫外光灯下鉴别检视结果图片；
图5为本发明对于秦艽的鉴别检视结果图片；
图6为本发明对于当归的鉴别检视结果图片；
图7为本发明对于川牛膝的鉴别检视结果图片。
具体实施方式
以下结合实施例，对本发明进行具体描述。
首先，进行本申请中所述的一种治疗滑膜炎的中药制剂（以下称膝悦颗粒）的制备：
【处方】黄芪1875g，秦艽937.5g，当归625g，续断625g，牡丹皮625g，柴胡625g，姜黄750g，桑寄生750g，绵萆薢937.5g，川牛膝375g，甘草187.5g。
【制法】以上十一味，分别加10倍重量的水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.18～1.22（80℃），放冷至40℃，加乙醇使含醇量达50%（体积浓度），充分搅拌，静置24小时，取上清液，备用。药渣加50%乙醇（体积浓度）适量，搅匀，静置12小时，滤过，滤液与上清液合并，回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.08～1.14（65℃）的清膏，加糊精125g和阿司巴坦2.1g，混匀，喷雾干燥，干法制粒，制成1000g，即得中药制剂。
其次，采用上述步骤制备的中药制剂进行其中黄芪、续断、柴胡、秦艽、当归、川牛膝的鉴别。
（1）黄芪的鉴别方法：
取本品5g，研细，加水50ml使溶解，离心，取上清液，用乙醚洗涤2次，每次30ml，取水层，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用1%氢氧化钠溶液洗涤3次，每次30ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取供试品溶液2μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（2）续断的鉴别方法：
取上述（1）黄芪鉴别方法项下的供试品溶液作为供试品溶液。
另取川续断皂苷vi对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取供试品溶液2μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（3）柴胡的鉴别方法：
取上述（1）黄芪鉴别方法项下的供试品溶液作为供试品溶液。
另取柴胡皂苷a对照品、柴胡皂苷b2对照品，分别加甲醇制成每1ml各含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取供试品溶液与上述对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸乙醇溶液，在60℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
（4）秦艽的鉴别方法：
取本品1g，研细，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至约5ml，作为供试品溶液。
另取小秦艽对照药材0.5g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至约2ml，作为对照药材溶液。
再取龙胆苦苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶gf254薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水（10∶2∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
（5）当归的鉴别方法：
取本品10g，研细，加水50ml，微热使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次50ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
另取当归对照药材0.2g，加乙醚20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。
照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（9∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
（6）川牛膝的鉴别方法：
取本品5g，研细，加水50ml，超声处理30分钟，离心，取上清液，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
取川牛膝对照药材1g，加乙酸乙酯30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，制成对照药材溶液。
照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-丙酮（8∶4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
以上实施例仅为了对本发明作进一步的说明，而本发明的范围不受所举实施例的局限。
实验论证：以下通过具体的实验来进一步说明本发明的有益效果。
一、试验材料
膝悦颗粒，河南省洛正药业有限责任公司生产，批号：150601、150602、150603；所用对照药材及对照品，均购自中国食品药品检定研究院；硅胶g及硅胶gf254薄层板，烟台化学工业研究所；所用试剂均为分析纯。
二、本发明方法对膝悦颗粒中黄芪、续断、柴胡、秦艽、当归、川牛膝的鉴别实验例
（1）黄芪的鉴别：
a供试品溶液的制备：分别取三个不同批次的中药制剂各5g，研细，分别加水50ml使溶解，离心，取上清液，用乙醚洗涤2次，每次30ml，取水层，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用1%氢氧化钠溶液洗涤3次，每次30ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
b阴性对照溶液的制备：取处方中除去黄芪的其他药味，按处方比例及工艺制成缺黄芪的阴性样品，同供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。
c对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
d鉴别过程：照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取三份供试品溶液各2μl、对照品溶液5μl及阴性对照溶液2μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
实验结果：检视结果图见附图1。图1中从左至右依次为膝悦颗粒150601供试品溶液、膝悦颗粒150602供试品溶液、膝悦颗粒150603供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液。
图中显示：三个供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，且阴性对照样品无干扰。
（2）续断的鉴别：
a供试品溶液的制备：取上述（1）黄芪鉴别方法项下的三份供试品溶液作为供试品溶液。
b阴性对照溶液的制备：取处方中除去续断的其他药味，按处方比例及工艺制成缺续断的阴性样品，同供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。
c对照品溶液的制备：取川续断皂苷vi对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
d鉴别过程：照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取三份供试品溶液各2μl、对照品溶液5μl及阴性对照溶液2μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
实验结果：检视结果图见附图2。图2中从左至右依次为膝悦颗粒150601供试品溶液、膝悦颗粒150602供试品溶液、膝悦颗粒150603供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液。
图中显示：三个供试品色谱中，色谱背景清晰，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，且阴性对照样品无干扰。
（3）柴胡的鉴别：
a供试品溶液的制备：取上述（1）黄芪鉴别方法项下的三份供试品溶液作为供试品溶液。
b阴性对照溶液的制备：取处方中除去柴胡的其他药味，按处方比例及工艺制成缺柴胡的阴性样品，同供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。
c对照品溶液的制备：取柴胡皂苷a对照品、柴胡皂苷b2对照品，分别加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为两份对照品溶液。
d鉴别过程：照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取三份供试品溶液、对照品溶液及阴性对照溶液各5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸乙醇溶液，在60℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365nm）下检视。
实验结果：检视结果图见附图3和4。附图3为日光下的检视结果图；附图4为紫外光灯（365nm）下的检视结果图。
图3中从左至右依次为膝悦颗粒150601供试品溶液、膝悦颗粒150602供试品溶液、膝悦颗粒150603供试品溶液、柴胡皂苷a对照品溶液、柴胡皂苷b2对照品溶液和阴性对照溶液。
图4中从左至右依次为膝悦颗粒150601供试品溶液、膝悦颗粒150602供试品溶液、膝悦颗粒150603供试品溶液、柴胡皂苷a对照品溶液、柴胡皂苷b2对照品溶液和阴性对照溶液。
图中显示：三个供试品色谱中，色谱背景清晰，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，且阴性对照样品无干扰。
（4）秦艽的鉴别：
a供试品溶液的制备：分别取三个不同批次的中药制剂各1g，研细，分别加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至约5ml，作为三份供试品溶液。
b阴性对照溶液的制备：取处方中除去秦艽的其他药味，按处方比例及工艺制成缺秦艽的阴性样品，同供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。
c对照药材溶液的制备：取小秦艽对照药材0.5g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至约2ml，作为对照药材溶液。
d对照品溶液的制备：取龙胆苦苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
e鉴别过程：照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取三份供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液和阴性对照溶液各2μl，分别点于同一硅胶gf254薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水（10∶2∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。
实验结果：检视结果图见附图5。图5中从左至右依次为膝悦颗粒150601供试品溶液、膝悦颗粒150602供试品溶液、膝悦颗粒150603供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液和阴性对照溶液。
图中显示：三个供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且阴性对照样品无干扰。
（5）当归的鉴别：
a供试品溶液的制备：分别取三个不同批次的中药制剂各10g，研细，分别加水50ml，微热使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次50ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为三份供试品溶液。
b阴性对照溶液的制备：取处方中除去当归的其他药味，按处方比例及工艺制成缺当归的阴性样品，同供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。
c对照药材溶液的制备：取当归对照药材0.2g，加乙醚20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。
d鉴别过程：照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取三份供试品溶液、对照药材溶液和阴性对照溶液各10μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（9∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
实验结果：检视结果图见附图6。图6中从左至右依次为膝悦颗粒150601供试品溶液、膝悦颗粒150602供试品溶液、膝悦颗粒150603供试品溶液、对照药材溶液和阴性对照溶液。
图中显示：三个供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且阴性对照样品无干扰。色谱主斑点的rf值适宜，主斑点集中。
（6）川牛膝的鉴别：
a供试品溶液的制备：分别取三个不同批次的中药制剂各5g，研细，分别加水50ml，超声处理30分钟，离心，取上清液，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为三份供试品溶液。
b阴性对照溶液的制备：取处方中除去川牛膝的其他药味，按处方比例及工艺制成缺川牛膝的阴性样品，同供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。
c取川牛膝对照药材1g，加乙酸乙酯30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，制成对照药材溶液。
d鉴别过程：照中国药典2015年版通则0502薄层色谱法试验，吸取三份供试品溶液、对照药材溶液和阴性对照溶液各5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-丙酮（8∶4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
实验结果：检视结果图见附图7。图7中从左至右依次为膝悦颗粒150601供试品溶液、膝悦颗粒150602供试品溶液、膝悦颗粒150603供试品溶液、对照药材溶液和阴性对照溶液。
图中显示：三个供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且阴性对照样品无干扰。
本发明的鉴定方法是在经过大量摸索、比较及实验基础上形成的，包括样品的处理方法（提取及纯化）、对照品的选择（对照品及对照药材）、展开系统的选择及优化、薄层板的比较、显色剂的选择及显色方法等等，方法简单，专属性强，重现性好。本发明方法的另一个优点在于制备一份样品供试液即可用于黄芪、续断及柴胡的鉴别，黄芪、续断的鉴别更可于同一块薄层板上同时进行，减少了操作步骤。本发明克服了现有技术的缺点，是一个巨大的进步，具有创造性。本说明书中选择的实施例及实验例仅仅是所有实验中的一部分，是最优方案，并不影响对本发明的保护。