番石榴叶炮制品的鉴别方法与流程

本发明涉及中药鉴别领域，特别是一种番石榴叶炮制品的鉴别方法。

背景技术

番石榴叶为桃金娘科植物番石榴(psidiumguajaval.)的叶。在福建、中国台湾、广东、广西、四川和云南等地均有分布或栽培。具有燥湿健脾，清热解毒之功效。常用于治疗泻痢腹痛，食积腹胀，齿龈肿痛，风湿痹痛，湿疹臁疮，疔疮肿毒，跌打肿痛，外伤出血，蛇虫咬伤。

番石榴叶通过炮制后，加强了药物效用，减除毒性或副作用，便于贮藏和便于服用。

关于番石榴叶的生品的质量标准已有记载，但是番石榴叶炮制品的检测方法还没有记载。

技术实现要素：

本发明的一个目的是克服现有技术的缺陷，提供一种简单方便检测番石榴叶炮制品的方法，可有效解决番石榴叶炮制品的鉴定问题。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种番石榴叶炮制品的鉴别方法，包括以下步骤：

步骤一、分别制备番石榴叶炮制品对照药材溶液和供试品溶液；

步骤二、将番石榴叶炮制品对照药材溶液和供试品溶液均按照薄层色谱法试验，得番石榴叶炮制品对照药材薄层色谱和供试品溶液薄层色谱；

步骤三、对比番石榴叶炮制品对照药材薄层色谱和供试品薄层色谱。

优选的是，番石榴叶炮制品对照药材溶液的制备方法如下：

称定番石榴叶炮制品对照药材1-3g，碾碎成粉末，粉末过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液30-80ml，经超声处理0.5-1h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取1-3次，每次5-20ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇1-3ml，作为番石榴叶炮制品对照药材溶液。

优选的是，供试品溶液制备方法如下：

称定供试品1-3g，碾碎成粉末，粉末过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液30-80ml，经超声处理0.5-1h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取1-3次，每次5-20ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇1-3ml，作为供试品溶液。

优选的是，薄层色谱法试验采用的薄层色谱展开板为硅胶g薄层板。

优选的是，薄层色谱法试验所采用的展开剂为石油醚-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇的混合溶液，其中石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇的体积比为10-30:10:1:1，石油醚选择沸程为60℃-90℃的产品。

优选的是，薄层色谱法试验中，将展开后的薄层板晾干，并浸泡10％硫酸乙醇溶液，再加热显色至斑点清晰。

优选的是，薄层色谱法试验中进行点样时，供试品溶液及番石榴叶炮制品对照药材溶液需要点在同一块薄层板上。

优选的是，进行薄层色谱法试验操作时的环境温度为10-60℃，相对湿度为45％-70％。

优选的是，硅胶g薄层板在使用前经过90-105℃的烘干活化处理。

本发明至少包括以下有益效果：本发明方法操作简便、快速、稳定可靠、准确性强、薄层色谱中各斑点分离效果好、有效用于番石榴叶炮制品的鉴定，为番石榴叶炮制品的鉴定提供技术保障，具有良好的经济和社会效益。

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

附图说明

图1为本发明的番石榴叶炮制品对照药材和11份不同批次供试品的薄层色谱图，1为番石榴叶炮制品对照药材，2-12为11份不同批次供试品；

图2为本发明所述环境温度为10℃，相对湿度为70％的薄层色谱图，1为番石榴叶炮制品对照药材，2为供试品；

图3为本发明所述环境温度为60℃，相对湿度为45％的薄层色谱图，1为番石榴叶炮制品对照药材，2为供试品；

图4为本发明所述薄层色谱法试验中展开剂为石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇体积比为30：10：1：1时的薄层色谱图，1为番石榴叶炮制品对照药材，2为供试品；

图5为本发明所述薄层色谱法试验中展开剂为石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇体积比为10：10：1：1时的薄层色谱图，1为番石榴叶炮制品对照药材，2为供试品；

图6为本发明所述薄层色谱法试验中实施例6，仅用石油醚提取后，进行薄层色谱分写的薄层色谱图，1为番石榴叶生品，2为番石榴叶炮制品；

图7为本发明所述薄层色谱法试验中实施例7，不提取，直接用甲醇溶解后点样，进行薄层色谱分写的薄层色谱图，1为番石榴叶生品，2为番石榴叶炮制品。

具体实施方式

下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

<实施例1>

番石榴叶炮制品对照药材溶液的制备方法如下：

称定番石榴叶炮制品对照药材2g，碾碎成粉末，粉末过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作为番石榴叶炮制品对照药材溶液。

供试品溶液制备方法如下：

称定供试品2g，碾碎成粉末，粉末过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作为供试品溶液。

薄层色谱法试验:

用毛细管吸取番石榴叶炮制品对照药材溶液和供试品溶液两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇体积比20:10:1:1为展开剂，点样后，把展开剂倒进展开缸预饱和后展开，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅胶g薄层板加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与番石榴叶炮制品对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，从而实现利用薄层色谱对番石榴叶炮制品的鉴定，薄层色谱图见附图1。

<实施例2>

番石榴叶炮制品对照药材溶液的制备方法如下：

称定番石榴叶炮制品对照药材2g，碾碎成粉末，粉末过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作为番石榴叶炮制品对照药材溶液。

供试品溶液制备方法如下：

称定供试品2g，碾碎成粉末，粉末过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作为供试品溶液。

薄层色谱法试验:

用毛细管吸取番石榴叶炮制品对照药材溶液和供试品溶液两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，在环境温度为10℃，相对湿度为70％条件下，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇体积比20:10:1:1为展开剂，点样后，把展开剂倒进展开缸预饱和后展开，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅胶g薄层板加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与番石榴叶炮制品对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，从而实现利用薄层色谱对番石榴叶炮制品的鉴定，薄层色谱图见附图2。

<实施例3>

番石榴叶炮制品对照药材溶液的制备方法如下：

称定番石榴叶炮制品对照药材2g，碾碎成粉末，粉末过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作为番石榴叶炮制品对照药材溶液。

供试品溶液制备方法如下：

称定供试品2g，碾碎成粉末，粉末过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作为供试品溶液。

薄层色谱法试验:

用毛细管吸取番石榴叶炮制品对照药材溶液和供试品溶液两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，在环境温度为60℃，相对湿度为45％条件下，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇体积比20:10:1:1为展开剂，点样后，把展开剂倒进展开缸预饱和后展开，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅胶g薄层板加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与番石榴叶炮制品对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，从而实现利用薄层色谱对番石榴叶炮制品的鉴定，薄层色谱图见附图3。

根据上述实施例可以得出，本发明的番石榴叶炮制品的鉴别方法具有很广的湿度和温度耐受性，稳定可靠。

<实施例4>

番石榴叶炮制品对照药材溶液的制备方法如下：

称定番石榴叶炮制品对照药材2g，碾碎成粉末，粉末过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作为番石榴叶炮制品对照药材溶液。

供试品溶液制备方法如下：

称定供试品2g，碾碎成粉末，粉末过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作为供试品溶液。

薄层色谱法试验:

用毛细管吸取番石榴叶炮制品对照药材溶液和供试品溶液两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇体积比30:10:1:1为展开剂，点样后，把展开剂倒进展开缸预饱和后展开，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅胶g薄层板加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与番石榴叶炮制品对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，从而实现利用薄层色谱对番石榴叶炮制品的鉴定，薄层色谱图见附图4。

<实施例5>

番石榴叶炮制品对照药材溶液的制备方法如下：

称定番石榴叶炮制品对照药材2g，碾碎成粉末，粉末过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作为番石榴叶炮制品对照药材溶液。

供试品溶液制备方法如下：

称定供试品2g，碾碎成粉末，粉末过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作为供试品溶液。

薄层色谱法试验:

用毛细管吸取番石榴叶炮制品对照药材溶液和供试品溶液两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇体积比10:10:1:1为展开剂，点样后，把展开剂倒进展开缸预饱和后展开，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅胶g薄层板加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与番石榴叶炮制品对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，从而实现利用薄层色谱对番石榴叶炮制品的鉴定，薄层色谱图见附图5。

根据上述实施例可以得出，本发明的番石榴叶炮制品的鉴别方法再展开剂的选取上有很广泛的耐受性，稳定可靠。

<实施例6>

番石榴叶生品溶液制备方法如下：

称定番石榴叶生品2g，碾碎，过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，浓缩至2ml，作为生品溶液。

番石榴叶炮制品溶液的制备方法如下：

称定番石榴叶炮制品2g，碾碎成粉末，过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，浓缩至2ml，作为番石榴叶炮制品对照药材溶液。

薄层色谱法试验:

用毛细管吸取番石榴生品溶液和番石榴叶炮制品溶液两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇体积比20:10:1:1为展开剂，点样后，把展开剂倒进展开缸预饱和后展开，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅胶g薄层板加热至斑点清晰。

在对比色谱中，番石榴叶生品色谱与番石榴叶炮制品色谱在相应的位置上，斑点有明显差别，得出番石榴叶生品与番石榴叶炮制品在化学成分上有明显不同，薄层色谱图见附图6。

<实施例7>

番石榴叶生品溶液制备方法如下：

称定番石榴叶生品2g，碾碎，过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为生品溶液。

番石榴叶炮制品溶液的制备方法如下：

称定番石榴叶炮制品2g，碾碎成粉末，过筛，倒入带塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，经超声处理0.5h，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为番石榴叶炮制品溶液。

薄层色谱法试验:

用毛细管吸取番石榴叶炮制品对照药材溶液和供试品溶液两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇体积比20:10:1:1为展开剂，点样后，把展开剂倒进展开缸预饱和后展开，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅胶g薄层板加热至斑点清晰。

在对比色谱中，明显可以看出斑点很多，分离不开，得出采用石油醚进行提取后再进行薄层色谱分析是有必要的，薄层色谱图见附图7。

由上述可知，本发明提供了一种利用薄层色谱法鉴定番石榴叶炮制品的方法，该方法操作简便、快速、专属性强、薄层色谱中各斑点分离效果良好，可有效用于番石榴叶炮制品的质量鉴定。

另外发明人针对番石榴叶生品也进行了薄层色谱分析研究，对照番石榴叶炮制品，发现番石榴叶生品和番石榴叶炮制品再化学成份上有明显不同，番石榴叶生品已有质量标准，因此针对番石榴叶炮制品的检测方法进行了研究。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。