一种测定药物中金属元素Ag和Rh残留含量的方法与流程

本发明属于药物中残留金属含量检测
技术领域：
，具体涉及一种测定药物中金属元素ag和rh残留含量的方法。
背景技术：
：近年来，国内外对药物中重金属的限量要求越来越严格，药物生产后需要进行残留金属含量的测定。根据ichq3d指南，金属元素分为3类，第1类：元素砷、镉、汞、铅是对人有毒性的物质，被限制或不再用于药品生产中；第2类是被认为是与摄入途径相关的有毒物质；第3类是在口服摄入是具有相对较低的毒性(pde＞500μg/day)，因此需要控制金属元素在药物中的含量。但是，目前并无质量标准收录ag和rh金属含量的同时测定的方法，且在一般测定ag元素含量的过程中，ag元素在溶液中的存在形式不稳定，对ag元素的回收率和检测结果的准确度存在一定的影响。因此，急需一种能够解决现有问题的测定药物中金属元素ag和rh残留含量的方法。技术实现要素：本发明的目的是提供一种测定药物中金属元素ag和rh残留含量的方法，该方法提供的样品在前处理和icp-ms条件下，2％hno3溶液和供试品溶液无干扰，且该检测方法还具有较好的专属性、准确度和稳定性。本发明提供了如下的技术方案：一种测定药物中金属元素ag和rh残留含量的方法，包括如下步骤：s1、取2种金属元素标准品，加入适量的氨水，以2％hno3溶液为溶剂，配制对照品溶液；s2、取待测药物，用浓硝酸和双氧水消解，加入适量的氨水使其稳定，再用纯水定容，获得供试品溶液；s3、平行配制两份对照品溶液，经icp-ms法检测，分别获得对照品溶液中2种金属元素的响应值，计算各元素响应值与对照品溶液的浓度的比值，得各元素的响应因子，并制作两种元素对应的标准曲线；s4、取供试品溶液经icp-ms法检测，获得供试品溶液的响应值，用响应因子计算供试品溶液中各金属元素的含量。优选的，步骤s3中平行配制的两份对照品溶液分别为对照品溶液-1和对照品溶液-2，所述对照品溶液-1中金属组分为ag，所述对照品溶液-2中金属组分及浓度比为ag：rh＝75:50。优选的，步骤s2步骤中供试品溶液中氨水与浓硝酸、双氧水用量的体积之比为1-4：1：4。优选的，步骤s2步骤中供试品溶液中待测药物的溶解方法为：加入浓硝酸和双氧水，超声5-10min，并置于石墨消解仪中消解30min。优选的，所述石墨消解仪的温度为115-125℃。优选的，s3步骤中制作每个元素对应的标准曲线的方法如下：第一步：基础溶液的配置1)空白溶剂：量取20mlhno3至980ml纯水中，混匀；2)储备溶液-1：精密移取0.75mlag元素标准溶液至10ml容量瓶中，用空白溶剂定容，混匀；3)储备溶液-2：精密移取0.25ml储备溶液-1和1.25mlrh元素标准溶液至25ml容量瓶中，用空白溶剂定容，混匀；4)内标准备溶液：精密移取0.25mlin标准溶液至50ml容量瓶中，用空白溶剂定容，混匀；5)内标溶液:精密移取1.00ml内标储备溶液至100ml容量瓶中，用空白溶剂定容，混匀；第二步：对照品溶液-2的线性溶液的配置1)l-20：精密移取0.10ml储备溶液-2至25ml容量瓶中，加入氨水1ml，用空白溶剂定容，混匀；2)l-50：精密移取0.25ml储备溶液-2至25ml容量瓶中，加入氨水1ml，用空白溶剂定容，混匀；3)l-100：精密移取0.50ml储备溶液-2至25ml容量瓶中，加入氨水1ml用空白溶剂定容，混匀；4)l-150：精密移取0.75ml储备溶液-2至25ml容量瓶中，加入氨水1ml用空白溶剂定容，混匀；5)l-200：精密移取1.00ml储备溶液-2至25ml容量瓶中，加入氨水1ml用空白溶剂定容，混匀；第三步：实验测试并绘制标准曲线将2％hno3溶液、线性溶液，分别注入icp-ms中，记录响应值，并绘制标准曲线。优选的，所述氨水的浓度为25-28％，所述浓硝酸的浓度为67-70％，所述双氧水的浓度为31％。优选的，icp-ms法的参数为：雾化器流量为0.9936l/min，等离子体流量为14l/min，以ked检测模式采用手动进样，rf功率为1550w，样品冲洗时间及样品提升时间均为30s。本发明的有益效果是：(1)本发明采用样品前处理和icp-ms方法来测定药物中金属元素ag和rh残留含量，本发明在前处理过程中加入了氨水，能够使得ag元素以更稳定的形式存在于溶液中，不仅解决了溶液稳定性问题，而且样品前处理过程简单高效。此外，前处理过程中添加氨水的操作大大提高了测定ag元素的回收率，而对rh元素回收率的测定无明显影响。(2)本发明在提供的icp-ms条件下，通过外标一点法对ag和rh元素的残留含量进行测定，并进行了系列的验证，试验结果表明该方法具有较好的专属性、准确度和稳定性。附图说明附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：图1是ag标准曲线；图2是rh标准曲线。具体实施方式本发明提供的检测方法中所用试剂均可由市场购得，待测药物为wxsh0024，批号为h21628-077-p1，由上海药明康德新药开发有限公司提供。实施例1-金属残留含量的测定一种测定药物中金属元素ag和rh残留含量的方法，包括如下步骤：s1、取2种金属元素标准品，加入适量的氨水，以2％hno3溶液为溶剂，配制对照品溶液，其中氨水的浓度为25-28％；s2、取待测药物，用浓硝酸和双氧水消解，超声10min，置于120℃石墨消解仪中消解30min，并加入适量的氨水使其稳定，再用纯水定容，获得供试品溶液，氨水与浓硝酸、双氧水用量的体积之比为2：1：4；s3、平行配制两份对照品溶液-1和对照品溶液-2，经icp-ms法检测，获得对照品溶液-2中2种金属元素的响应值，计算各元素响应值与对照品溶液的浓度的比值，得各元素的响应因子，并制作两种元素对应的标准曲线，具体的，对照品溶液-1中金属组分为ag，对照品溶液-2中金属组分及浓度比为ag：rh＝75:50；s4、取供试品溶液经icp-ms法检测，获得供试品溶液的响应值，用响应因子计算供试品溶液中各金属元素的含量。具体的，其中氨水的浓度为25-28％，浓硝酸的浓度为67-70％，双氧水的浓度为31％。具体的，icp-ms法的参数为：雾化器流量为0.9936l/min，等离子体流量为14l/min，以ked检测模式采用手动进样，rf功率为1550w，样品冲洗时间及样品提升时间均为30s。具体的，制作每个元素对应的标准曲线的方法为：第一步：基础溶液的配置1)空白溶剂：量取20mlhno3至980ml纯水中，混匀，即为2％hno3溶液；2)储备溶液-1(ag：75000ng/ml)：精密移取0.75mlag元素标准溶液至10ml容量瓶中，用空白溶剂定容，混匀；3)储备溶液-2(ag：750ng/ml、rh：500ng/ml)：精密移取0.25ml储备溶液-1和1.25mlrh元素标准溶液至25ml容量瓶中，用空白溶剂定容，混匀；4)内标准备溶液(in：50000ng/ml)：精密移取0.25mlin标准溶液至50ml容量瓶中，用空白溶剂定容，混匀；5)内标溶液(50ng/ml):精密移取1.00ml内标储备溶液至100ml容量瓶中，用空白溶剂定容，混匀；第二步：对照品溶液-2的线性溶液的配置1)l-20：精密移取0.10ml储备溶液-2至25ml容量瓶中，加入氨水1ml，用空白溶剂定容，混匀；2)l-50：精密移取0.25ml储备溶液-2至25ml容量瓶中，加入氨水1ml，用空白溶剂定容，混匀；3)l-100：精密移取0.50ml储备溶液-2至25ml容量瓶中，加入氨水1ml用空白溶剂定容，混匀；4)l-150：精密移取0.75ml储备溶液-2至25ml容量瓶中，加入氨水1ml用空白溶剂定容，混匀；5)l-200：精密移取1.00ml储备溶液-2至25ml容量瓶中，加入氨水1ml用空白溶剂定容，混匀；第三步：实验测试并绘制标准曲线将2％hno3溶液、对照品溶液-2的线性溶液，分别注入icp-ms中，记录响应值，并得到ag和rh标准曲线结果。对照品溶液-2的线性溶液中各线性点浓度如表1所示，ag和rh的标准曲线结果如表2和表3所示，ag和rh的标准曲线如图1和图2所示：表1ag、rh元素各线性点浓度表表2ag标准曲线结果表3rh标准曲线结果试验结果表明，ag和rh元素在浓度范围内呈线性关系，且线性关系良好，符合要求。按照该方法测得药物wxsh0024中ag元素的含量为0.788ppm，低于限度15ppm，rh元素的含量为0.148ppm，低于限度10ppm，符合要求。实施例2-专属性测定供试品溶液：精密称取待测药物25mg，置于50ml离心管中，加入浓硝酸0.50ml和双氧水2.00ml，超声反应10min，盖紧离心管盖后，置于120℃石墨消解仪中加热消解30min，冷却加入1ml氨水，再用纯水转移至25ml容量瓶中定容至刻度，混匀。对照品溶液-1：精密移取0.50ml实施例1中的储备溶液-1至25ml容量瓶中，加入1ml氨水，用空白溶剂定容定容，混匀。对照品溶液-2：精密移取0.50ml实施例1中的储备溶液-2至25ml容量瓶中，加入1ml氨水，用空白溶剂定容定容，混匀。本发明采用实施例1中的icp-ms条件，分别对照品溶液-2和供试品溶液进行icp-ms分析，所得专属性结果如表4所示：表4专属性结果ag元素响应值rh元素响应值空白溶剂95377对照品溶液-29756941085174供试品溶液5732916271样品加标8612161074917试验结果表明，空白溶剂及供试品溶液无干扰，样品加标(指供试品溶液+对照品溶液-2)与样品相比，有明显响应。实施例3-准确度分析100％回收率溶液-1：精密称取待测药物25mg，置于50ml离心管中，加入浓硝酸0.50ml、双氧水2.00ml和0.50ml实施例1中的储备溶液-2，超声反应10min，盖紧离心管盖后，置于120℃石墨消解仪中加热消解30min，取出后冷却，再转移至25ml容量瓶中用空白溶剂定容至刻度，混匀，平行配制两份。100％回收率溶液-2：精密称取待测药物25mg，置于50ml离心管中，加入浓硝酸0.50ml、双氧水2.00ml和0.50ml实施例1中的储备溶液-2，超声反应10min，盖紧离心管盖后，置于120℃石墨消解仪中加热消解30min，冷却加入0.5ml氨水，再转移至25ml容量瓶中用空白溶剂定容至刻度，混匀，平行配制两份。100％回收率溶液-3：精密称取待测药物25mg，置于50ml离心管中，加入浓硝酸0.50ml、双氧水2.00ml和0.50ml实施例1中的储备溶液-2，超声反应10min，盖紧离心管盖后，置于120℃石墨消解仪中加热消解30min，冷却加入1ml氨水，再转移至25ml容量瓶中用空白溶剂定容至刻度，混匀，平行配制六份。100％回收率溶液-4：精密称取待测药物25mg，置于50ml离心管中，加入浓硝酸0.50ml、双氧水2.00ml和0.50ml实施例1中的储备溶液-2，超声反应10min，盖紧离心管盖后，置于120℃石墨消解仪中加热消解30min，冷却加入2ml氨水，再转移至25ml容量瓶中用空白溶剂定容至刻度，混匀，平行配制两份。按照本发明的实施例1中的icp-ms条件，分别将各100％回收率溶液注入仪器中，记录响应值，试验结果如表5和表6所示。其中回收率计算公式为：表5ag回收率结果表6rh回收率结果从试验结果中可以看出，氨水的加入对ag元素的回收率影响较大，且随着氨水加入量的增多，回收率呈逐渐增大的趋势，说明过量氨水的加入能够使ag元素以更稳定的形式存在于溶液内，有助于提高本实验方法的准确度。而对于rh元素来说，氨水的加入对rh元素的回收率没有明显影响。当氨水加入量为1ml时，ag元素和rh元素的回收率分别达到88％和98％，表明本方法具有良好的准确度。实施例4-稳定性试验取实施例2中的对照品溶液-2、实施例3中的100％回收率溶液-3，于室温下，考察8h内溶液稳定性。按本发明的实施例1中的icp-ms法，分别进样，记录2种金属元素的响应值，计算对照品溶液-2和100％回收率-3溶液相对于0h点的回收率，结果见表7和表8。表7对照品溶液-2稳定性结果表表8供试品加标溶液稳定性结果表试验结果表明，8h内，对照品溶液-2和100％回收率溶液-3的回收率均在80～120％，说明ag、rh元素的对照品溶液-2和ag、rh元素供试品加标溶液-3在8h内稳定，因而说明本实验方法具有良好的稳定性。以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12