整合薄层层析与质谱检测的方法与流程

本发明涉及一种用于质谱仪检测的方法，特别是涉及一种整合薄层层析与质谱检测的方法。

背景技术：

参阅图1，薄层层析法(thinlayerchromatography,tlc)是一种在平面上分离混合物种的层析分离方法，主要是利用一层析板1来执行。所述层析板1是在一以玻璃、塑料，或者金属制成的基板上，涂覆硅胶、氧化铝、纤维素等材料而构成。执行薄层层析法时，是先将一样品溶液10滴于所述层析板1上，并使所述层析板1利用毛细现象而由底部吸收一有机溶剂11。当所述有机溶剂11逐渐向上移动，则所述样品溶液10中的各种成分会因受到不同的作用力，在所述层析板1上分离。此时，在所述层析板1上分离的多种成分中，部分肉眼不可见的成分还必须照射特定波长的紫外光，或者喷洒特定种类的化学溶剂，才能显现样品点19。

然而，薄层层析法虽然可分离所述样品溶液10的多种成分，但分离分辨率不佳，无法准确判断物质种类。而质谱检测法是一种可通过分子量来精确得知样品成分组成的检测法，具有极佳的灵敏度及鉴定能力。若配合薄层层析法及质谱仪检测，即能同时发挥两种检测方式的优点。

执行质谱检测法时，必须先将样品脱附，再使脱附后的样品游离，才能形成能供质谱仪检测的游离化样品。配合薄层层析法时，目前现有的技术是使用电喷洒辅助激光脱附游离法(electrospraylaserionizationspectrometry,eldi)，也就是直接使用激光将所述层析板1上的分析物，连同静相粒子(gelparticle)一起脱附，才执行电喷洒而游离样品。或者使用脱附电喷洒游离法(desorptionelectrosprayionization,desi)，使用带电荷的加速液滴冲击所述层析板1表面而脱附，再执行电喷洒而游离样品。然而，上述两种方式在取样过程中皆会形成静相粒子，容易对质谱仪检测造成干扰甚至损坏。

另外，若使用直接实时分析(directanalysisinrealtime,dart)，则是使用加热后的介稳态气流直接冲击所述层析板1，同时产生热脱附以及游离效果。但也由于其需要通过热能产生脱附，对于容易热分解以及不易热挥发的大分子检测效果较为不佳。因此，如何妥善整合薄层层析法及质谱分析，发挥两者在简便检测以及灵敏度高的优点，而不对质谱仪造成干扰或者损坏，则成为物质检测领域需研发突破的要点。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种能整合薄层层析法及质谱检测，且不会对质谱检测造成干扰或损坏的整合薄层层析与质谱检测的方法。

本发明整合薄层层析与质谱检测的方法，包含预备步骤、层析步骤、裁切步骤、电喷洒步骤，及检测步骤。

所述预备步骤是预备层析板及质谱仪。

所述层析步骤是将样品溶液滴于所述层析板上，再使所述层析板的一端浸润于有机溶剂，通过毛细作用对所述样品溶液产生沿一条参考线的作用力，使所述样品溶液在所述层析板上分离，形成多个沿所述参考线相间隔的样品点。

所述裁切步骤是沿所述参考线左右来回裁切所述层析板，使所述层析板形成多个位置对应所述样品点的尖端。

所述电喷洒步骤是在所述层析板的其中一个尖端滴上电喷洒液，并对所述层析板施加高电压，直接透过所述尖端执行电喷洒，使对应之样品点游离而形成多个分析物离子。

所述检测步骤是使所述分析物离子输入所述质谱仪，执行质谱检测。

本发明的目的及解决其技术问题还可采用以下技术措施进一步实现。

较佳地，前述整合薄层层析与质谱检测的方法，其中，所述检测步骤完成后，选择所述层析板的另一个尖端，重新执行所述电喷洒步骤及所述检测步骤。

本发明的有益的效果在于：在所述裁切步骤中直接裁切所述层析板，能以简单的方式形成可直接进行电喷洒的尖端，不需采用可能对所述质谱仪造成干扰甚至破坏的脱附方式，即可直接连接高电压，透过其中一个尖端产生尖端放电而执行电喷洒，确实在不对质谱检测造成干扰或损坏的情况下，整合薄层层析法以及质谱检测的优点。经由薄层层析法得到的物质分析初步结果，能立刻在相同的载体上，以简单的步骤再透过质谱分析再次确认结果，且所述尖端的有序排列除了便于辨识以及操作，也有利于机械化、自动化地执行检测。

附图说明

图1是一示意图，说明利用一现有的层析板执行薄层层析法的情况；

图2是一方块流程图，说明本发明整合薄层层析与质谱检测的方法的一实施例；

图3是一流程示意图，辅助图2说明所述实施例的执行动作；及

图4是一示意图，说明针对多个样品点依序执行检测的情况。

具体实施方式

下面结合附图及实施例对本发明进行详细说明。

参阅图2、图3，本发明整合薄层层析与质谱检测的方法的一实施例，包含一预备步骤21、一层析步骤22、一裁切步骤23、一电喷洒步骤24，及一检测步骤25。

所述预备步骤21是预备一层析板3及一质谱仪4。

所述层析步骤22是将一样品溶液9滴于所述层析板3上，再使所述层析板3的一端浸润于一有机溶剂80，通过毛细作用对所述样品溶液9产生沿一条参考线l的作用力，使所述样品溶液9在所述层析板3上分离，形成多个沿所述参考线l相间隔的样品点91。在所述层析步骤22中，所述样品溶液9所分离出的多个样品点91，即已通过受力不同的机制初步分离，可先行得到以薄层层析法检测的物质分析结果。

所述裁切步骤23是沿所述参考线l左右来回裁切所述层析板3，也就是反复以z型的裁切线，将所述层析板3裁切为锯齿状，即能使所述层析板3形成多个位置对应所述样品点91的尖端31。

所述电喷洒步骤24是在所述层析板3的其中一尖端31滴上电喷洒液81，并以一电源82对所述层析板3施加高电压，直接透过所述尖端执行电喷洒，使对应的样品点91如图4所示地游离而形成多个分析物离子500。在所述电喷洒步骤24中，由于是对裁切后的所述层析板3直接施加高电压而进行电喷洒，故因使用相同的样品载体而能有效简化执行质谱检测的前置作业。只要在所述裁切步骤23中，确实使得裁切而形成的所述尖端31确实对应所述样品点91，无论是可见或不可见、热不稳定性、热非挥发性的物质，皆可确实在接收电能后，通过尖端放电的机制产生电喷洒现象，形成游离后而可供所述质谱仪4执行检测的所述分析物离子500，且不会形成可能对所述质谱仪4造成干扰的静相粒子。

所述检测步骤25是使所述分析物离子500输入所述质谱仪4，执行质谱检测，以确定执行检测之样品点91的物质。在所述检测步骤25中，能以质谱检测对在所述层析步骤22中所获得的结果执行再次检测，进一步确认薄层层析法针对所述样品溶液9所得到的分析结果，除了确实整合薄层层析法及质谱分析法而提高能检测样品的泛用性以外，也能提高针对特定物质检测结果的可靠度。

在执行完所述样品溶液9的其中一个样品点91的检测后，由于所述样品点91是彼此分离，故得以如图4所示地，接着在对应另一个样品点91的尖端31滴上电喷洒液81，并连接所述电源82而执行电喷洒，继续对另一个样品点91执行检测，也就是对另一个样品点91继续执行所述电喷洒步骤24及所述检测步骤25，依序确认下一个样品点91的分析结果。

值得特别说明的是，由于所述样品点91的距离在执行完所述层析步骤22后即可固定，故有利于通过可程序化设定的机械装置，在每次检测移动特定距离而执行简单操作动作的情况下，自动化地执行检测。