本发明涉及检测领域，特别涉及一种果酒中氰化物检测方法。
背景技术：
：氰化物是一种有害物质，果酒中氰化物主要来源于原料中含有的氰甙类配糖体在发酵过程中水解产生，因此，氰化物是酒类的一项重要检测指标，氰化物是严重危害食品安全的剧毒化合物，可通过呼吸道、消化道及皮肤进入人体内。其毒性主要由在体内解离出的cn–引起，cn–与细胞色素氧化酶aa3中的fe3+结合，使酶丧失活性，导致细胞内呼吸中断，阻断电子传递和氧化磷酸化，从根本上抑制三磷腺苷的合成，从而抑制了细胞内氧的利用，造成机体缺氧以致产生中毒效应；现有检测方法精度不高，操作繁琐，检测仪器较昂贵，不适合较小的城市使用和现场的快速监测，难以推广到所有城市及县市。技术实现要素：本发明针对现有技术问题，提供一种果酒中氰化物检测方法，本发明采用分光光度法快速检测果酒中的氰化物，不需要昂贵的仪器设备，操作过程简单易行，条件容易实现，测定过程中的干扰因素较少，测定的灵敏度和精确度较高，适合果酒中氰化物的快速检测。为实现以上目的，本发明采用的技术方案为一种果酒中氰化物检测方法，包括以下步骤：1)用氢氧化钠溶液配制浓度分别为0μg/l、0.5μg/l、1.0μg/l、1.5μg/l、2.0μg/l、2.5μg/l、3.0μg/l氰化物的标准液；2)量取25-30ml果酒样品置于蒸馏器中，加入5-6ml氢氧化钠溶液，碱解10-15min后，调ph呈酸性，进行水蒸气蒸馏，并用10-12ml氢氧化钠溶液吸收蒸汽，得到馏出液，取4-6ml馏出液于比色管中，用氢氧化钠溶液定容至10ml，得到试样液，备用；3)分别向试样液和标准液中滴加2-4滴8g/l酚酞指示剂，再滴加乙酸溶液调至溶液红色褪去后，分别向试样液和标准液加入3-4ml第一混合液，混匀，放置3-5min，再加入5-6ml第二混合液，混匀，于30-35℃水浴25-30min，得到待测试样液和待测标准液，备用；4)用可见分光光度计检测待测试样液和待测标准液在波长638nm处的吸光度。所述调ph呈酸性是用饱和酒石酸溶液调节果酒样品ph值至4-6。所述氢氧化钠溶液是浓度为0.05mol/l的氢氧化钠溶液。所述所述乙酸溶液为体积比1:24的冰醋酸和水的混合液。所述第一混合液由ph7.0磷酸盐缓冲溶液和10g/l氯胺t溶液组成，所述磷酸盐缓冲溶液和氯胺t溶液体积比为15:2。所述第二混合液由异烟酸-吡唑啉酮溶液和50g/l十二烷基磺酸钠溶液组成，所述异烟酸-吡唑啉酮溶液和十二烷基磺酸钠溶液的体积比为4:1。由上述技术方案可知，本发明针对现有技术具有如下有益效果：本方法将样品液在ph7.0磷酸盐缓冲液中，用氯胺t溶液将氰化物氧化生产氯化氰，并用十二烷基磺酸钠溶液作为增溶剂，在胶束条件下与异烟酸-吡唑啉酮溶液反应生成蓝色染料，从而减少测定时的干扰因素，测定的灵敏度和精确度较高，适合果酒中氰化物的快速检测。本发明的加标回收率为87.4-103.7％，rsd≤2.8％，说明本方法能保证检测结果的准确度和重复性，适合果酒中氰化物的快速检测。具体实施方式下面结合具体实施例，对本发明做进一步详细叙述。实施例11)用0.05mol/l氢氧化钠溶液配制浓度分别为0μg/l、0.5μg/l、1.0μg/l、1.5μg/l、2.0μg/l、2.5μg/l、3.0μg/l氰化物的标准液；2)量取25ml果酒样品置于蒸馏器中，加入5ml浓度为0.05mol/l氢氧化钠溶液，碱解10min后，用饱和酒石酸溶液调节果酒样品ph值至4，进行水蒸气蒸馏，并用10ml的0.05mol/l氢氧化钠溶液吸收蒸汽，得到馏出液，取4ml馏出液于比色管中，用0.05mol/l氢氧化钠溶液定容至10ml，得到试样液，备用；3)分别向试样液和标准液中滴加2滴8g/l酚酞指示剂，再滴加体积比1:24的冰醋酸和水的混合液调至溶液红色褪去后，分别向试样液和标准液加入3ml体积比为15:2的ph7.0磷酸盐缓冲溶液和10g/l氯胺t溶液的混合液，混匀，放置3min，再加入5ml体积比为4:1的异烟酸-吡唑啉酮溶液和50g/l十二烷基磺酸钠溶液的混合液，混匀，于30℃水浴25min，得到待测试样液和待测标准液，备用；4)用可见分光光度计检测待测试样液和待测标准液在波长638nm处的吸光度。实施例21)用0.05mol/l氢氧化钠溶液配制浓度分别为0μg/l、0.5μg/l、1.0μg/l、1.5μg/l、2.0μg/l、2.5μg/l、3.0μg/l氰化物的标准液；2)量取27ml果酒样品置于蒸馏器中，加入5.5ml浓度为0.05mol/l氢氧化钠溶液，碱解13min后，用饱和酒石酸溶液调节果酒样品ph值至5，进行水蒸气蒸馏，并用11ml的0.05mol/l氢氧化钠溶液吸收蒸汽，得到馏出液，取5ml馏出液于比色管中，用0.05mol/l氢氧化钠溶液定容至10ml，得到试样液，备用；3)分别向试样液和标准液中滴加3滴8g/l酚酞指示剂，再滴加体积比1:24的冰醋酸和水的混合液调至溶液红色褪去后，分别向试样液和标准液加入3.5ml体积比为15:2的ph7.0磷酸盐缓冲溶液和10g/l氯胺t溶液的混合液，混匀，放置4min，再加入5.5ml体积比为4:1的异烟酸-吡唑啉酮溶液和50g/l十二烷基磺酸钠溶液的混合液，混匀，于33℃水浴28min，得到待测试样液和待测标准液，备用；4)用可见分光光度计检测待测试样液和待测标准液在波长638nm处的吸光度。实施例31)用0.05mol/l氢氧化钠溶液配制浓度分别为0μg/l、0.5μg/l、1.0μg/l、1.5μg/l、2.0μg/l、2.5μg/l、3.0μg/l氰化物的标准液；2)量取30ml果酒样品置于蒸馏器中，加入6ml浓度为0.05mol/l氢氧化钠溶液，碱解15min后，用饱和酒石酸溶液调节果酒样品ph值至6，进行水蒸气蒸馏，并用12ml的0.05mol/l氢氧化钠溶液吸收蒸汽，得到馏出液，取6ml馏出液于比色管中，用0.05mol/l氢氧化钠溶液定容至10ml，得到试样液，备用；3)分别向试样液和标准液中滴加4滴8g/l酚酞指示剂，再滴加体积比1:24的冰醋酸和水的混合液调至溶液红色褪去后，分别向试样液和标准液加入4ml体积比为15:2的ph7.0磷酸盐缓冲溶液和10g/l氯胺t溶液的混合液，混匀，放置5min，再加入6ml体积比为4:1的异烟酸-吡唑啉酮溶液和50g/l十二烷基磺酸钠溶液的混合液，混匀，于35℃水浴30min，得到待测试样液和待测标准液，备用；4)用可见分光光度计检测待测试样液和待测标准液在波长638nm处的吸光度。用723型可见分光光度计检测标准液的638nm处的吸光度，以吸光度为横坐标(x)，氰化物浓度μg/l为纵坐标y，得出氰化物浓度和吸光度的线性关系y＝7.71x+13.75。用723型可见分光光度计检测实施例1-3样品液中氰化物的含量，结果如下表1所示：表1项目实施例1实施例2实施例3吸光度0.4680.4750.480氰化物浓度(μg/l)17.3617.4117.45表1可以看出，实施例1-3中氰化物含量在17.36-17.45μg/l之间，依据gb-2757-1981酒类卫生标准判定，合格率为100％。取氰化物的标准液，检测回收率为87.4-103.7％，rsd≤2.8％，说明本方法能保证检测结果的准确度和重复性，适合果酒中氰化物的检测。以上所述实施方式仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。当前第1页12