一种显微定量检测器的制作方法

文档序号:15146536发布日期:2018-08-10 20:31阅读:160来源:国知局

本实用新型涉及药物定量显微观察技术领域,具体而言,涉及一种显微定量检测器。



背景技术:

中药显微特征检测是中国药典收载的中药材(中成药)质量控制的重要方法,其为中药的真伪鉴别、品质评价、质量控制提供了一种简便可行的方法,具有广泛的应用基础与较好的实用价值,是中药质量控制不可或缺的一环。然而,现行的中药显微鉴别多仅提供定性鉴别依据,缺乏定量控制指标,在现代中药质控技术水平不断提高的背景下,有必要进一步开展中药显微鉴别技术提升,特别是对其定量检测能力的提升。

在前期研究中,也有学者提出了中药显微定量检测技术,并应用于部分中药品种,制订了部分显微特征常数,取得了一定的成果。其主要方法有参比物显微定量法(重量分析法),但参比物法显微定量法需要多次称量,易产生称量误差且无法做到理论上的参比物与样品的绝对均匀。



技术实现要素:

本实用新型的目的在于提供一种显微定量检测器,提供一种简单快速的计数方法,能够对不同的药物悬液或药材切面进行数量观察,可重复利用,且使用范围更加广泛,计算更加准确。

本实用新型是采用以下技术方案实现的:

一种显微定量检测器,适用于对药物悬液或药材切面进行定量检测,包括检测器本体和至少两个不同规格的检测台,检测器本体上设置有开口朝上的溢液槽,每个检测台均设置于溢液槽内,且溢液槽的深度低于检测台的高度。

进一步地,在本实用新型较佳的实施例中,上述至少两个不同规格的检测台,包括四个不同规格的检测台,四个检测台分两排两列设置于溢液槽内。

进一步地,在本实用新型较佳的实施例中,上述各检测台均设置于溢液槽内,且各检测台包括外框和至少一个计数框,计数框位于外框内,每个检测台的计数框的尺寸不同。

进一步地,在本实用新型较佳的实施例中,上述检测器本体的两端均设置有手持磨砂台。

进一步地,在本实用新型较佳的实施例中,上述检测器本体具有两个用于承载盖玻片的滑台,每个滑台分别位于溢液槽和手持磨砂台之间。

进一步地,在本实用新型较佳的实施例中,上述每个滑台与手持磨砂台之间设置有滑台凹槽。

进一步地,在本实用新型较佳的实施例中,上述检测器本体上设置有两个用于限制盖玻片位置的封口台,两个封口台均设置于溢液槽外缘,且位于至少两个不同规格的检测台的一侧。

进一步地,在本实用新型较佳的实施例中,上述封口台的高度与手持磨砂台的高度一致。

进一步地,在本实用新型较佳的实施例中,上述手持磨砂台、滑台和封口台的表面均为磨砂面。

进一步地,在本实用新型较佳的实施例中,上述显微定量检测器还包括盖玻片,盖玻片置于滑台上,与检测台形成封闭空间,且盖玻片的两侧与两个滑台外侧边缘齐平且另一端抵于所述封口台内侧。

本实用新型的较佳实施例提供的显微定量检测器的有益效果是:在需要对药物粉末悬液或药材切面进行显微定量分析的时候,将处理过的药物粉末悬液或药材切面置于检测台内,使药物粉末悬液将每个检测台完全浸没,或药材切面放置于适应的检测台内,单位体积显微特征数量较多的药物粉末悬液或药材切面,用规格较小的检测台进行计数,即使用单位面积较小的检测台进行计数;单位体积显微特征数量较少的药物粉末悬液或药材切面,用规格较大的检测台进行计数,即使用单位面积较大的检测台进行计数。根据检测对象的显微特性选择其中一个检测台进行检测观察药药物粉末悬液或药材切面的显微特征数目,提供一种简单快速的计数方法,能够对不同的药物粉末悬液或药材切面进行数量观察,使用范围更加广泛,计算更加准确。

附图说明

为了更清楚地说明本实用新型实施例的技术方案,下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,应当理解,以下附图仅示出了本实用新型的某些实施例,因此不应被看作是对范围的限定,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他相关的附图也属于本实用新型的保护范围。

图1为本实用新型实施例提供的显微定量检测器的正视图;

图2为本实用新型实施例提供的显微定量检测器的俯视图;

图3为本实用新型实施例提供的显微定量检测器中第一检测台的结构示意图;

图4为本实用新型实施例提供的显微定量检测器中第二检测台的结构示意图;

图5为本实用新型实施例提供的显微定量检测器中第三检测台的结构示意图;

图6为本实用新型实施例提供的显微定量检测器中第四检测台的结构示意图。

图标:100-显微定量检测器;110-检测器本体;120-检测台;111-溢液槽;121-第一检测台;122-第二检测台;123-第三检测台;124-第四检测框;131-第一外框;132-第一计数框;133-第二外框;134-第二计数框;135-第三外框;136-第三计数框;137-第四外框;138-第四计数框;112-滑台凹槽;113-封口台;114-滑台;115-手持磨砂台。

具体实施方式

为使本实用新型实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合本实用新型实施例中的附图,对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本实用新型一部分实施例,而不是全部的实施例。通常在此处附图中描述和示出的本实用新型实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。因此,以下对在附图中提供的本实用新型的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本实用新型的范围,而是仅仅表示本实用新型的选定实施例。基于本实用新型中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本实用新型保护的范围。

应注意到:相似的标号和字母在下面的附图中表示类似项,因此,一旦某一项在一个附图中被定义,则在随后的附图中不需要对其进行进一步定义和解释。

实施例

本实施例提供一种显微定量检测器100,适用于对药物粉末悬液或药材切面的显微特征进行定量检测,即在显微镜或其他放大仪器下检测单位体积内药物粉末悬液或单位面积内药液切面的显微特征的数量。

显微定量检测器100由检测器本体110、至少两个不同规格的检测台120及盖玻片围合而成,显微定量检测器100需在显微镜或其他放大器材下观察使用,使用时将药物悬液或药材切面置于显微定量检测器100的检测台120,使用盖玻片封闭检测台120,然后将此显微检测器100置于显微镜的物镜下观察。

图1为本实施例提供的显微定量检测器100的正视图,图2为实施例提供的显微定量检测器100的俯视图。请一并参阅图1和图2,本实施例中,本显微定量检测器100包括检测器本体110和至少两个不同规格的检测台120,检测器本体110上设置有开口朝上的溢液槽111,每个检测台120均设置于溢液槽111中央,且每个检测台120的高度低于溢液槽111的深度。

本实施例中,溢液槽111为三行三列的长方形溢液槽相互交连而成,溢液槽111的底壁水平设置,则检测台120水平设置于溢液槽111内,盖玻片与检测器本体110围合时每个检测台120内的药液体积一致。图3-图6为本实施例的第一检测台121、第二检测台122、第三检测台123和第四检测台124的结构示意图。请一并参阅图3-图6,本实施例中,至少两个不同规格的检测台120包括四个不同规格的检测台120,四个检测台120分两排两列设置于溢液槽111内。四个不同规格的检测台120均由外框和计数框组成,计数框位于外框中央,每个检测台的外框尺寸一致,但计数框规格不同。其中第一检测台121由第一外框131及位于第一检测台121中央的第一计数框132组成;第二检测台122由第二外框133及位于第二检测台122中央的第二计数框134组成;第三检测台123由第三外框135及位于第三检测台123中央的第三计数框136组成;第四检测台124由第四外框137及位于第四检测台124中央的第四计数框138组成。

第一外框131的尺寸为7mm×7mm,第一计数框132的尺寸为5mm×5mm;第二外框133尺寸为7mm×7mm,第二计数框134为尺寸为6mm×6mm,由九个小格组成,每小格尺寸为2mm×2mm;第三外框135(尺寸:7mm×7mm),第三计数框136的尺寸为5.5mm×5.5mm,第三计数框136包含2×2大格(每格尺寸:2.5mm×2.5mm),其中每大格又包含5×5小格(每格尺寸:0.5mm×0.5mm);第四外框137的尺寸为7mm×7mm,第四计数框138尺寸为5.8mm×5.8mm,第四计数框138包含5×5大格(每格尺寸:1mm×1mm),其中每大格又包含5×5小格(每格尺寸:0.2mm×0.2mm)。含有四个不同规格的计数框的检测台120的使用范围更广,能够适用于多种不同显微特性的药物悬液或药材切面,进一步提高其使用范围,增加重复利用率。科学的分类计数方法,使显微定量检测器100能够满足各种类型的药物悬液或药材切面的显微特征数量的检测,以便增加其使用广泛性。

检测器本体110上设置有两个用于限制盖玻片位置的封口台113,两个封口台113均设置于溢液槽111外缘,且位于至少两个不同规格的检测台120的一侧。封口台113的高度与溢液槽111外侧深度一致,即封口台113设置在溢液槽111内以后,盖玻片能够稳定的盖在封口台113上,避免盖玻片与封口台113之间造成间隙,避免药液溢出,方便对其药液进行计数,计数更加准确。

检测器本体110的两端均设置有手持磨砂台115,使用者用手持于显微定量检测器100左右两端的手持磨砂台115(此处为手持磨砂台编号),以便将其置于显微镜物镜下进行观察。优选地,检测器本体110具有两个用于限制盖玻片放置位置的滑台114,每个滑台114分别位于溢液槽111和手持磨砂台115之间,每个滑台114与手持磨砂台115之间设置有滑台凹槽112。显微定量检测器100还包括盖玻片(图未示),盖玻片的左右两侧分别卡接于两个滑台114外侧,即滑台凹槽112内侧附合,且上端抵于封口台113内侧。方便使盖玻片正好置于四个检测台120所处位置的正上方,所形成的半封闭空间以便充满定量的药液(药物悬液),方便对其药液中的显微特征进行更加准确的计数。

显微定量检测器本体110尺寸为75mm×26mm×2mm;手持磨砂台尺寸为22mm×26mm×2mm;滑台尺寸为2mm×26mm×0.4mm;封口台尺寸为7mm×2mm×0.5mm;检测台尺寸为7mm×7mm×0.2mm;位于手持磨砂台与滑台中间的滑台凹槽尺寸为内侧深0.4mm,外侧深0.5mm,2.5mm×26mm;四个检测台内侧横竖溢液槽交叉呈“十”字形,横竖溢液槽尺寸均为2mm×16mm。

使用时,将通用盖玻片左右两端与左右两滑台114的外侧附和,沿滑台114向封口台113方向移动,直至盖玻片上下两端中的一端抵于封口台113内侧,另一端抵于检测器本体110边缘。当盖玻片四端边缘完全拟合时,盖玻片与检测器本体110围合成一半封闭空间,且四个检测台120呈两行两列的排列方式正好居中位于盖玻片下方。根据盖玻片与检测台120两平面间的高度,可以得出使用显微镜观察时相应倍数视野下被测药物悬液的固定体积,从而可以依据被测药物悬液的浓度以及检测得出的显微特征数目,快速准确的计算出该单位质量的被测药物中所含的显微特征数目。

优选地,手持磨砂台115、滑台114和封口台113的表面均为磨砂面,磨砂面的检测器本体110能够更加方便使用者取用和转移,同时,盖玻片的设置更加稳定,效果更好,进一步避免药液溢出。

在需要对药液进行显微定量分析的时候,将处理过的药物悬液倒入溢液槽111内,使药液将每个检测台120完全浸没或将药材切面置于检测台120上,单位体积显微特征较多的药物悬液或药材切面,采用规格较小的计数框进行计数,即使用单位面积较小的计数框进行计数;单位体积显微特征较少的药物悬液或药材切面,采用规格较大的计数框进行计数,即使用单位面积较大的计数框进行计数。根据药液的特性选择其中一个检测台120的计数框进行检测观察药物悬液或药材切面的显微特征数目,提供一种简单快速的计数方法,能够对不同的药液进行数量观察,使用范围更加广泛,计算更加准确。

本实用新型使用的显微定量检测器的检测方法为:在显微镜本体下,依次提高放大倍数观察相应的显微特征。

方案一:按显微特征体积大小:

1.在显微镜视野(4×10)下,将显微定量检测器100的第一检测框121移至视野中央,初步观察药材粉末,确定显微实验找寻的后含物目标。

2.根据被检测的粉末显微特征的体积大小,调整物镜放大倍数,依次选择第二检测框122、第三检测框123和第四检测框124进行计数。

3.旋转物镜转换器,将物镜调至10×,移动显微镜载物台,将第二计数框122调至视野中央,随机观察计数框134其中一格,如果目标后含物数量在该视野下较少,则从第二检测台122中第二计数框134的左上角第1格开始,沿“弓”字形方向移动并计录视野范围中每一个格子中目标后含物所有数量;

4.如果在步骤3的观察倍数下,目标后含物在该视野范围内较多,则旋转物镜转换器,将物镜调至40×。移动显微镜托物台,使第三检测台123移至视野中央,随机观察第三计数框136中一大格(包含有5×5小格),如果目标后含物数量在该视野下较少,则从第三检测台123中的左上角的第1格开始,沿“弓”字形方向移动并随机挑选计录视野范围中每一个格子中目标后含物所有数量;

5.如果在步骤4的观察倍数下,目标后含物在该视野范围内较多,则旋转物镜转换器,将物镜调至100×。移动显微镜托物台,使第四检测台124移至视野中央,依次在第四计数框138每个大格(包含5×5个小格)中随机的挑取几个小格,观察并记录视野中每个小格中所含的目标后含物的数量。

方案二:显微组织化学比例:

采用相应的组织化学染色方法进行着色,使用方法参照方案一,记录计数框120内着色比例。

数量数出来以后,进行计算,计算方法为:

其中p:药材显微特征常数(个/mg)

X:每小格药材显微特征数均值(个)

V:定量药材混悬液总体积(ml)

V’:盖玻片下药材每小格所含混悬液体积(其中第二计数框134下每小格含混悬液体积为8×10-4ml,第三计数框136下每小格含混悬液体积为5×10-5ml,第四计数框138下每小格含混悬液体积为8×10-6ml);其中,混悬液体积与每个计数框120的高度有关,根据高度的变化,体积会发生变化。

W:定量药材的重量(以干燥品计)(mg)

具体的检测实例有:

一、三叶青中草酸钙针晶的计数:

1、取三叶青样品粉碎,过65目筛,精密称取36mg于10ml量瓶中,加入甘油4ml,用水合氯醛溶液定容至刻度,充分混匀;

2、精密吸取一定量样品混悬液(180-220ul)于显微定量检测器100中,使其充满检测台120。在显微镜视野(10×10)下,将显微定量检测器100的第一检测台121移至视野中央,初步观察三叶青粉末,确定针晶为显微特征目标物;

3、根据三叶青中针晶的体积大小,调整物镜放大倍数,逐次调整检测框,最终根据其针晶大小选择第二检测台122进行计数。对9个小格进行计数,平行计5块显微定量检测器。观察并记录显微定量检测器中观察视野下每个小格(9×5:45个小格)中所含的目标后含物数目。求得平均值为2.5个/小格;

4、根据公式求得,三叶青中草酸钙针晶数目为868.10个/mg。

二、三叶青中淀粉粒的计数:

1、取三叶青样品粉碎,过65目筛,精密称取36mg于10ml量瓶中,加入甘油4ml,用水合氯醛溶液定容至刻度,充分混匀;

2、精密吸取一定量样品混悬液(180-220ul)于显微定量检测器100中,使其充满检测台120。在显微镜视野(40×10)下,将中药显微定量检测器100的第一检测台121移至视野中央,初步观察三叶青粉末,确定淀粉粒为显微特征目标物;

3、根据三叶青中针晶的体积大小,调整物镜放大倍数,逐次调整检测框,最终根据其针晶大小选择第三检测台123进行计数。依次在每个大格(共25个大格,每个大格又包含5×5个小格)中随机的挑取5个小格,每个显微定量检测板共计挑选20个小格进行计数,平行计2块显微定量检测框。观察并记录显微定量检测器中观察视野下每个小格(20×2:40个小格)中所含的目标后含物数目。求得平均值为13.25个/小格;

4、根据公式求得,三叶青中淀粉粒数目为73611.11个/mg。

以上所述仅为本实用新型的优选实施例而已,并不用于限制本实用新型,对于本领域的技术人员来说,本实用新型可以有各种更改和变化。凡在本实用新型的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本实用新型的保护范围之内。

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