本发明涉及含量测定技术领域，具体涉及一种复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂的检测方法。
背景技术：
磺胺类药物是较常用的一类药物，磺胺间甲氧嘧啶(sulfamonomethoxine，smm)是一种体内外抗菌作用极强，应用极其广泛的磺胺类药，具有抗菌谱广、性质稳定、价格廉价及有多种制剂可供选择的优点。它可干扰细菌叶酸的合成而影响其生长繁殖，从而抑制大多数革兰氏阳性菌和某些阴性菌，预防和控制猪弓形体、大肠杆菌、巴氏杆菌、链球菌、副猪嗜血杆菌、附红细胞体、放线杆菌等引起的全身性感染具有良好的效果；其具有双重药理作用，既能抗菌，又可抗原虫，对猪球虫、弓形体敏感。虽然近年来抗菌素飞速发展，磺胺类药物不但没有被淘汰，且在抗微生物中仍占有重要的地位，尤其是抗菌增效剂出现后，与抗菌增效剂联合使用，使磺胺间甲氧嘧啶的抗菌活性和疗效大大增强，甚至从抑菌剂变成杀菌剂。
常见的磺胺间甲氧嘧啶制剂有磺胺间甲氧嘧啶片、磺胺间甲氧嘧啶钠注射液和磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂。这些药物针对细菌、原虫的控制有一定的效果，但当前由于细菌、原虫的感染多呈现混合感染或继发感染，如链球菌病与弓形体病、附红细胞体病等混合感染，大肠杆菌病与气喘病混合感染，而这些疾病的感染临床上基本表现为传染性强、高热和炎症，用磺胺间甲氧嘧啶钠注射液的单独治疗效果较差，通常一天注射两次，刺激性较强，注射量大，且对近年来高发的“猪无名高热病”几乎无有效的治疗作用；磺胺间甲氧嘧啶片对胃刺激作用强，对肝脏、肾脏损害大。磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂具有缓释性、控释性，减小对胃的刺激作用，可防止药物的挥发损失，增加药物的稳定性，延长药物的作用时间，因而被较为广泛的应用。但对于磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂，由于其具有缓释作用，若采用药典上常规的检测方法检测其中的磺胺间甲氧嘧啶含量，通常存在检测时间耗时过长或检测过程中磺胺间甲氧嘧啶未完全释放导致检测结果不准确的问题，进而会影响所制备产品的均匀性和投料准确性。
技术实现要素：
为了解决上述技术问题，本发明提供一种复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂的检测方法。
本发明所采用的技术方案是：一种复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂的检测方法，包括以下步骤：
s1、称取复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂，加水混合后，在55～70℃条件下加热搅拌至完全溶解，得溶液一；所述复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂由包含磺胺间甲氧嘧啶、甲氧苄啶、缓释剂、有机溶剂、填充剂的原料制得；
s2、向所述溶液一中加入酸性溶液，冷却后加入溴化钾，混匀；
s3、以亚硝酸钠溶液作为滴定液进行滴定，检测磺胺间甲氧嘧啶的含量。
优选地，所述复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂包含如下重量份的原料：磺胺间甲氧嘧啶5～20份、甲氧苄啶1～4份、缓释剂55～65份、有机溶剂4～10份、填充剂10～30份。
优选地，所述稀释剂为单甘脂；所述有机溶剂为peg4000；所述填充剂为淀粉和轻质碳酸钙的混合体。
优选地，所述复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂由如下制备方法制得：将缓释剂、有机溶剂投入乳化缸中，加热，搅拌，使物料完全融溶；而后开启搅拌投入填充剂，搅拌均匀，投入甲氧苄啶、磺胺间甲氧嘧啶，搅拌均匀，开启乳化器使物料乳化均匀；进而进行喷雾制粒。
优选地，步骤s1中，加热温度为60～65℃。
优选地，步骤s2中，所述酸性溶液选自盐酸溶液。盐酸溶液成本低，采用盐酸溶液可加快反应的速度，使重氮盐在酸性溶液中稳定，同时可防止重氮氨基化合物的形成。
优选地，所述盐酸溶液由体积比为1:1.5～2.5的浓盐酸和水混合而成。
优选地，步骤s3中，所述亚硝酸钠溶液的浓度为0.1～0.2mol/l。
优选地，步骤s3中，用永停滴定法或外指示剂法指示滴定终点。优选采用永停滴定法指示滴定终点。
以亚硝酸钠溶液作为滴定液采用永停滴定法滴定混合液，具体可包括：采用两支相同的铂电极，将铂-铂电极插入混合液中，在两电极间加一低电压(如50mv),电极在溶液中极化，将装有亚硝酸钠滴定液的滴定管尖端插入混合液液面下约2/3处，进行滴定；在滴定终点前，仅有很小或无电流通过，但当达到终点时，微过量的滴定液生成亚硝酸(hno2)及其分解产物(no)为可逆电对，在电极上发生氧化还原反应，使电极去极化，混合液中即有电流流过，电流计指针突然偏转，并不再回复，而指示终点。
以亚硝酸钠溶液作为滴定液采用外指示剂法滴定混合液，具体可包括：采用碘化钾和淀粉一起制成糊状指示剂，将指示剂在白瓷板上铺成一厚约1mm的均匀薄层，用细玻璃棒蘸取少许所述混合液划过，若已到终点，溶液中应有亚硝酸存在，亚硝酸可氧化i-成i2，i2与淀粉作用显蓝色，即为终点。或者，将采用碘化钾和淀粉一起制成指示剂试纸，滴定达到近终点时，细玻璃棒蘸取混合液少许，点在指示剂试纸上，若接触后立即出现蓝点，即已达终点。
优选地，步骤s1中，所述复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂的称取量相当0.3～0.6g磺胺间甲氧嘧啶；水添加量为40ml；步骤s2中，所述酸性溶液的添加量为15ml，所述溴化钾的添加量为2g。
本发明的有益技术效果是：本发明提供一种复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂的检测方法，该检测方法针对具有缓释作用的复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂，在检测其中的磺胺间甲氧嘧啶含量时，在溶解复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂过程增加加热搅拌处理，且严格控制加热温度，以加快其中磺胺间甲氧嘧啶的充分释放，利于后续的准确检测，提高检测效率和准确性；通过利用亚硝酸钠滴定液在酸性溶液下与芳伯氨基化合物发生重氮化反应，定量生成重氮盐，来测定其中的磺胺间甲氧嘧啶含量，操作简单方便；另外，通过加入溴化钾，可加快重氮化反应的速度，进一步缩短检测时间，提高检测效率。综上，本发明复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂的检测方法操作简单、方便、快速、高效、准确，应用于产品制备，可保证所制备产品的均匀性和投料的准确性。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
复合磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂的制备：
一)分别按照表1所示的原料及配比进行取料；
表1原料及配比
二)具体按照如下步骤进行制备：
1)设定乳化缸水加热温度为95℃，将缓释剂、有机溶剂投入乳化缸中，待物料温度上升至80℃左右，开启搅拌，使物料完全融溶。
2)物料完全融溶后，将乳化缸水加热温度调整为82℃，开启搅拌投入填充剂，待物料搅拌至无明显堆积情况，投入甲氧苄啶、磺胺间甲氧嘧啶，待物料搅拌至无明显堆积情况后，开启乳化器4次使物料完全乳化均匀，将水温调整为85℃，物料温度控制在85℃左右。
3)打开低速喷雾制粒机电源，设定转速，按下运行键，待机器运行正常后，打开下料阀门，控制流量阀门以物料不甩罐壁为最佳，喷雾完成后，关闭下料阀门，关闭喷雾制粒机电源。
4)检验合格后，将物料进行过直线振动筛选取需要粒度物料。
三)产品均匀度试验
依据《兽药国家标准汇编》-兽药地方标准上升国家标准进行检测，结果如下：
表2产品均匀度试验结果
由上表2可知，样品1～3中的产品混合均匀度≤15.0，含磺胺间甲氧嘧啶和甲氧苄啶应为标示量的91.0％～110.0％。
实施例2
取实施例1中一符合国标的复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂(标示含量为90％～110％)进行检测；具体如下：称取适量的待检测样品(约相当于磺胺间甲氧嘧啶0.5g)，精密称定，加水40ml后于可加热磁力搅拌器中加热至60℃搅拌约5～10min至样品完全溶解，而后关闭加热，再加入盐酸溶液(1→2)15ml，放冷后加入溴化钾2g，得混合液，采用两支相同的铂电极，将铂-铂电极插入混合液中，在两电极中加50mv电压，将装有亚硝酸钠滴定液(0.1mol/l)的滴定管尖端插入混合液液面下约2/3处，进行滴定，记录滴定液用量，进而计算出磺胺间甲氧嘧啶的含量。每1ml亚硝酸钠滴定液(0.1mol/l)相当于28.03mg的c11h12n4o3s。取五次样，进行五次检测实验，记录检测时间和检测所得磺胺间甲氧嘧啶的含量，结果如下表3所示：
表3复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂的检测结果
对比例1
取与实施例2相同的复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂(标示含量为90％～110％)进行检测；具体如下：称取适量的待检测样品(约相当于磺胺间甲氧嘧啶0.5g)，精密称定，加水40ml后搅拌约5～10min，而后加入盐酸溶液(1→2)15ml，放冷后加入溴化钾2g，得混合液，采用两支相同的铂电极，将铂-铂电极插入混合液中，在两电极中加50mv电压，将装有亚硝酸钠滴定液(0.1mol/l)的滴定管尖端插入混合液液面下约2/3处，进行滴定，记录滴定液用量，进而计算出磺胺间甲氧嘧啶的含量。每1ml亚硝酸钠滴定液(0.1mol/l)相当于28.03mg的c11h12n4o3s。取五次样，进行五次检测实验，分别记录检测时间和检测所得磺胺间甲氧嘧啶的含量，结果如下表4所示：
表4复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂的检测结果
对比表3和表4的检测结果可知，采用实施例2中检测方法，无论是检测准确性、所消耗的检测时间和实验误差均优于对比例1中的检测方法。
实施例3
取与实施例2相同的复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂(标示含量为90％～110％)，溶解过程分别采用不同的加热温度(分别为30℃、40℃、50℃、50℃、70℃、80℃、90℃、100℃)，按照与实施例2类似检测方法，检测复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂中磺胺间甲氧嘧啶的含量，并统计检测耗时，所得结果如下表5所示：
表5溶解过程不同加热温度对检测的影响
根据实际投料量计算，该批产品的磺胺间甲氧嘧啶含量在99％～101％以内，由上表5可知，溶解过程加热温度在55～70℃，通过以上检测所得的磺胺间甲氧嘧啶含量与实际含量较为贴合，检测准确性高，且检测时间短，效率高；若溶解过程加热温度在55℃以下，磺胺间甲氧嘧啶释放不完全，检测结果不准确，且检测耗时过长；若溶解过程加热温度在70℃以上，检测含量也与实际偏离(偏高)，检测结果不准确。
为了验证复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂中辅料在不同温度下对检测结果的影响，以上复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂的辅料单独分离出来进行实验，具体将辅料在不同温度(分别为30℃、40℃、50℃、50℃、70℃、80℃、90℃、100℃)下分别加热5min和10min后，按与实施例2类似的方法，加入盐酸溶液和溴化钾，进而采用亚硝酸钠滴定液进行滴定，并以永停滴定法指示终点，检测出影响磺胺间甲氧嘧啶检测的物质的含量，所得结果如下表6所示：
表6微囊制剂中辅料在不同温度下对检测结果的影响
由上表6可知，复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂中的辅料在70℃以上高温条件下会释放出一些影响磺胺间甲氧嘧啶检测的物质，影响复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂中磺胺间甲氧嘧啶的检测，使检测结果不准确。
由上可知，在对复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂进行检测过程中，针对本申请中待检测物复方磺胺间甲氧嘧啶微囊制剂独特的性能特性，可通过加热搅拌处理促进微囊制剂中磺胺间甲氧嘧啶的释放，以提高检测效率和准确性；但加热温度不能过低，温度过低，磺胺间甲氧嘧啶释放不完全，影响检测准确性且耗时较长；另外，也不能按常规思路，为追求检测效率而一味提高加热温度，因为温度过高会导致微囊制剂中辅料性质改变，释放出一些影响磺胺间甲氧嘧啶检测的物质，使检测结果偏高。因此，溶解过程需要严格控制加热温度，在保证其他辅料不发生变性影响检测结果的前提下，促使微囊制剂中磺胺间甲氧嘧啶的完全释放，提高检测效率和准确性。
尽管结合优选实施方案具体展示和介绍了本发明，但所属领域的技术人员应该明白，在不脱离所述权利要求书所限定的本发明的精神和范围内，在形式上和细节上可以对本发明做出各种变化，均为本发明的保护范围。