原料药中氟溴甲烷残留的检测方法与流程

本发明属于分析领域，尤其是涉及原料药中氟溴甲烷残留的检测方法。
背景技术：
：氟溴甲烷(bromofluoromethane，cas：373-52-4)又称一氟一溴甲烷，是重要的化工生产原料，主要用于化学产品中引入氟甲基，是重要的甲基化试剂，反应活性优于氟氯甲烷等其他氟卤甲基化试剂。氟溴甲烷室温下为无色气体，分子式ch2brf，分子量112.93，密度1.76g/ml，沸点很低，17.8℃，易于挥发，应冷冻保存。氟溴甲烷具有疑似基因毒性杂质结构，所以，使用中一定注意防护，对于api来说应严格控制其残留量。经文献调研，对氟溴甲烷的分析方法，含氟溴甲烷残留检测没有报道和收载。故我公司根据氟溴甲烷的理化性质，开发了一套气相色谱体系对其进行测定。技术实现要素：本发明的目的是提供一种氟溴甲烷的检测方法，涉及api中氟溴甲烷残留的测定方法，具体涉及以氟溴甲烷为原料的api合成中氟溴甲烷残留的测定；尤其在原料药丙酸氟替卡松和糠酸氟替卡松中的应用。本发明的技术方案是：一种氟溴甲烷的检测方法，采用气相色谱法，以db-624为色谱柱，载气为氦气，用顶空进样法进样，采用柱温程序升温法，检测器选择氢火焰离子化检测器。所述一种氟溴甲烷的检测方法，进样温度180℃～220℃。所述一种氟溴甲烷的检测方法，进样温度200℃。所述一种氟溴甲烷的检测方法，载气流速为1.8ml/min～2.2ml/min；所述一种氟溴甲烷的检测方法，载气流速为2.0ml/min；所述顶空进样法中，顶空温度为25℃～35℃；顶空时间为25～35min；所述顶空进样法中，顶空温度为28℃～32℃；顶空时间为25～35min；所述顶空进样法中，顶空温度为30℃；顶空时间为30min；所述气相色谱法中定量环的温度为35℃～45℃；所述气相色谱法中传输线的温度为55℃～65℃；所述检测器温度为220℃～280℃；所述柱温升温程序具体为，起始柱温度35℃～45℃，维持5～30分钟，以每分钟3～10℃的速率升至170℃～200℃，维持2～5分钟。所述柱温升温程序具体为，起始柱温度38℃～42℃，维持8～15分钟，以每分钟6～8℃的速率升至170℃～200℃，维持2～5分钟。所述柱温升温程序具体为，起始柱温度40℃，维持10分钟，以每分钟6℃的速率升至180℃，维持3分钟。所述氢火焰离子化检测器中的气体由氢气，空气和尾吹气组成；所述氢火焰离子化检测器中的氢气流速为25ml/min～35ml/min；所述氢火焰离子化检测器中的空气流速为280ml/min～320ml/min；所述氢火焰离子化检测器中的尾吹气为氦气，流速为20ml/min～30ml/min；所述氢火焰离子化检测器中的气体由氢气，空气和尾吹气组成；氢气流速：30ml/min；空气流速：300ml/min；尾吹气流速：25ml/min。一种丙酸氟替卡松原料药中氟溴甲烷残留的检测方法，以n-甲基吡咯烷酮，dmso，dmf，甲苯，dma，丙酮有机试剂为溶剂，将丙酸氟替卡松原料药溶解；采用气相色谱法，以db-624为色谱柱，载气为氦气，载气流速为1.8ml/min～2.2ml/min；顶空温度为25℃～35℃；顶空时间为25～35min；进样温度180℃～220℃；采用柱温程序升温法，所述柱温升温程序具体为，起始柱温度35℃～45℃，维持5～30分钟，以每分钟3～10℃的速率升至170℃～200℃，维持2～5分钟。优选地，采用气相色谱法，以db-624为色谱柱，载气为氦气，载气流速为2.0ml/min；用顶空进样法进样，顶空温度为30℃；顶空时间为30min；进样温度200℃；采用柱温程序升温法，所述柱温升温程序具体为，起始柱温度40℃，维持10.0分钟，以每分钟6℃的速率升至180℃，维持3.0分钟；检测器选择氢火焰离子化检测器。所述顶空进样法中，所述气相色谱法中定量环的温度为35℃～45℃；所述气相色谱法中传输线的温度为55℃～65℃；所述检测器温度为220℃～280℃；一种糠酸氟替卡松原料药中氟溴甲烷残留的检测方法，以n-甲基吡咯烷酮为溶剂，将糠酸氟替卡松原料药溶解；采用气相色谱法，以db-624为色谱柱，载气为氦气，载气流速为1.8ml/min～2.2ml/min；顶空温度为25℃～35℃；顶空时间为25～35min；进样温度180℃～220℃；采用柱温程序升温法，所述柱温升温程序具体为，起始柱温度35℃～45℃，维持5～30分钟，以每分钟3～10℃的速率升至170℃～200℃，维持2～5分钟，检测器选择氢火焰离子化检测器。优选地，采用气相色谱法，以db-624为色谱柱，载气为氦气，载气流速为2.0ml/min；用顶空进样法进样，顶空温度为30℃；顶空时间为30min；进样温度200℃；采用柱温程序升温法，所述柱温升温程序具体为，起始柱温度40℃，维持10.0分钟，以每分钟6℃的速率升至180℃，维持3.0分钟。所述顶空进样法中，所述气相色谱法中定量环的温度为35℃～45℃；所述气相色谱法中传输线的温度为55℃～65℃；所述检测器温度为220℃～280℃；鉴于氟溴甲烷的理化性质，以及api的溶解性选择n-甲基吡咯烷酮为溶剂低温配制氟溴甲烷的对照品溶液。采用外标法检测控制api中氟溴甲烷的残留量。氟溴甲烷常温为气体，配制成溶液后直接进样，可能引起溶液中氟溴甲烷挥发，导致进样量不准，故此我公司采用顶空进样检测。色谱柱选择中等极性色谱柱db-624(6％氰丙基苯基-94％二甲基聚氧硅烷，30m×0.53mm×3.0μm),该色谱柱能兼顾不同极性的各种残留溶媒的检测。且适用温度范围较广在-20～260℃。氟溴甲烷是活性很强的氟甲基化试剂，顶空温度过高，会导致其与api或其含有的杂质反应，导致氟溴甲烷未检出或检出的回收率太低，达不到药典标准，根据我们的多次试验顶空温度高于35℃，回收率会低于80％。因此我们降低顶空温度到25℃～35℃来检测，在此温度检测氟溴甲烷可完全气化，即保证了氟溴甲烷不发生反应，又避免了使用直接进样时氟溴甲烷的挥发，从而保证了检测的精密度。我们做了相关方法学验证，证明该方法能够真实的控制氟溴甲烷的残留。本方法可快速准确检测氟溴甲烷的残留，具有良好的专属性及准确性，适用于api中氟溴甲烷残留的检测。附图说明图1是本发明的方法的实施例1的气相色谱图；图2是实施例2的空白溶剂气相色谱图；图3是实施例2的标准品溶液气相色谱图；图4是实施例2的供试品溶液气相色谱图；图5是实施例2的测试溶液气相色谱图；图6是实施例3的空白溶剂气相色谱图；图7是实施例3的标准品溶液气相色谱图；图8是实施例3的供试品溶液气相色谱图；图9是实施例3的测试溶液气相色谱图；图10是实施例4的测试溶液气相色谱图；具体实施方式下面将通过实施例对本发明作进一步的描述，这些描述并不是对本
发明内容作进一步的限定。本领域的技术人员应理解，对本发明的技术特征所作的等同替换，或相应的改进，仍属于本发明的保护范围之内。实施例1专属性试验实施例1.1分别取甲醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃、正己烷、甲苯、氟溴甲烷、二氯甲烷、二乙胺、三乙胺、乙酸乙酯、二甲基乙酰胺(dma)、异亚丙基丙酮，取各溶剂的api限度一百倍混合，加入到n-甲基吡咯烷酮溶剂中混合，作为专属性混样溶液，取2ml置于20ml顶空瓶中，密封备用；将上述溶液分别进样，色谱条件如下：采用气相色谱法，以db-624为色谱柱(6％氰丙基苯基-94％二甲基聚氧硅烷，30m×0.53mm×3.0μm)，载气为氦气，载气流速为2.0ml/min；用顶空进样法进样，顶空温度为30℃；顶空时间为30min；进样温度200℃；采用柱温程序升温法，所述柱温升温程序具体为，起始柱温度40℃，维持10.0分钟，以每分钟6℃的速率升至180℃，维持3.0分钟；检测器选择氢火焰离子化检测器。所述顶空进样法中，所述气相色谱法中定量环的温度为40℃；所述气相色谱法中传输线的温度为60℃；所述检测器温度为250℃；检测结果如图1所示，色谱中的峰与溶剂的对应关系如下表所示：出峰顺序物质名称保留时间分离度1甲醇5.4552氟溴甲烷6.4624.043丙酮8.5728.134乙腈9.6253.495二氯甲烷10.1501.706正己烷12.0487.017二乙胺12.5311.468乙酸乙酯14.6634.239四氢呋喃15.2122.6810三乙胺17.3819.1911甲苯21.69420.9012异亚丙基丙酮23.55312.7313二甲基乙酰胺27.45525.8314n-甲基吡咯烷酮32.88236.67实施例1.2分别取甲醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃、正己烷、甲苯、氟溴甲烷、二氯甲烷、二乙胺、三乙胺、乙酸乙酯、二甲基乙酰胺(dma)、异亚丙基丙酮，取各溶剂的api限度一百倍混合，加入到n-甲基吡咯烷酮溶剂中混合，作为专属性混样溶液，取2ml置于20ml顶空瓶中，密封备用；将上述溶液分别进样，色谱条件如下：采用气相色谱法，以db-624为色谱柱(6％氰丙基苯基-94％二甲基聚氧硅烷，30m×0.53mm×3.0μm)，载气为氦气，载气流速为2.2ml/min；用顶空进样法进样，顶空温度为35℃；顶空时间为28min；进样温度210℃；采用柱温程序升温法，所述柱温升温程序具体为，起始柱温度35℃，维持12.0分钟，以每分钟8℃的速率升至200℃，维持2.0分钟；检测器选择氢火焰离子化检测器。所述顶空进样法中，所述气相色谱法中定量环的温度为42℃；所述气相色谱法中传输线的温度为55℃；所述检测器温度为260℃；检测的色谱中的峰与溶剂的对应关系如下表所示：出峰顺序物质名称保留时间分离度1甲醇6.2362氟溴甲烷7.5634.253丙酮9.6577.614乙腈10.3693.375二氯甲烷11.4671.946正己烷12.4691.917二乙胺13.0961.628乙酸乙酯14.8694.319四氢呋喃15.7572.8010三乙胺17.5486.9411甲苯21.04717.5212异亚丙基丙酮23.60213.6913二甲基乙酰胺27.69923.3114n-甲基吡咯烷酮31.06230.11实施例1.3分别取甲醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃、正己烷、甲苯、氟溴甲烷、二氯甲烷、二乙胺、三乙胺、乙酸乙酯、二甲基乙酰胺(dma)、异亚丙基丙酮，取各溶剂的api限度一百倍混合，加入到n-甲基吡咯烷酮溶剂中混合，作为专属性混样溶液，取2ml置于20ml顶空瓶中，密封备用；将上述溶液分别进样，色谱条件如下：采用气相色谱法，以db-624为色谱柱(6％氰丙基苯基-94％二甲基聚氧硅烷，30m×0.53mm×3.0μm)，载气为氦气，载气流速为1.8ml/min；用顶空进样法进样，顶空温度为35℃；顶空时间为28min；进样温度210℃；采用柱温程序升温法，所述柱温升温程序具体为，起始柱温度45℃，维持12.0分钟，以每分钟8℃的速率升至200℃，维持2.0分钟；检测器选择氢火焰离子化检测器。所述顶空进样法中，所述气相色谱法中定量环的温度为42℃；所述气相色谱法中传输线的温度为55℃；所述检测器温度为260℃；检测的色谱中的峰与溶剂的对应关系如下表所示：出峰顺序物质名称保留时间分离度1甲醇6.5462氟溴甲烷7.7524.083丙酮9.7877.434乙腈10.8533.375二氯甲烷11.5231.976正己烷12.0131.867二乙胺12.9611.928乙酸乙酯13.9693.129四氢呋喃15.2573.8010三乙胺16.6557.5411甲苯20.43118.4412异亚丙基丙酮22.54213.1413二甲基乙酰胺27.69920.2814n-甲基吡咯烷酮30.74332.11实施例2糠酸氟替卡松原料药中氟溴甲烷残留的检测溶液配制空白溶剂：2ml的n-甲基吡咯烷酮，置于20ml顶空瓶中，密封备用；标准品溶液：取4.2g/50ml的氟溴甲烷2ml加入n-甲基吡咯烷酮溶解，置于20ml顶空瓶中，密封备用；供试品溶液：取糠酸氟替卡松原料药0.4g，置于20ml顶空瓶中，加入2mln-甲基吡咯烷酮，密封备用；测试溶液：取糠酸氟替卡松原料药0.4g，置于20ml顶空瓶中，加入2ml标准品溶液，密封备用；将上述溶液分别进样，色谱条件如下：采用气相色谱法，以db-624为色谱柱(6％氰丙基苯基-94％二甲基聚氧硅烷，30m×0.53mm×3.0μm)，载气为氦气，载气流速为2.2ml/min；用顶空进样法进样，顶空温度为30℃；顶空时间为30min；进样温度200℃；采用柱温程序升温法，所述柱温升温程序具体为，起始柱温度35℃，维持15.0分钟，以每分钟8℃的速率升至190℃，维持3.0分钟；检测器选择氢火焰离子化检测器。所述顶空进样法中，所述气相色谱法中定量环的温度为40℃；所述气相色谱法中传输线的温度为60℃；所述检测器温度为250℃；检测结果如图2～图5所示。结果中保留时间为32.8的峰为n-甲基吡咯烷酮的溶剂峰；14.7左右的峰为糠酸氟替卡松中合成的乙酸乙酯的峰；保留时间为6.4的物质为氟溴甲烷的峰，只有标准品溶液和测试溶液中存在氟溴甲烷，检测的糠酸氟替卡松api中没有氟溴甲烷残留。实施例3丙酸氟替卡松原料药中氟溴甲烷残留的检测溶液配制空白溶剂：2ml的n-甲基吡咯烷酮，置于20ml顶空瓶中，密封备用；标准品溶液：取4.2g/50ml的氟溴甲烷2ml加入n-甲基吡咯烷酮溶解，置于20ml顶空瓶中，密封备用；供试品溶液：取丙酸氟替卡松原料药0.4g，置于20ml顶空瓶中，加入2mln-甲基吡咯烷酮，密封备用；测试溶液：取丙酸氟替卡松原料药0.4g，置于20ml顶空瓶中，加入2ml标准品溶液，密封备用；将上述溶液分别进样，色谱条件如下：采用气相色谱法，以db-624为色谱柱，载气为氦气，载气流速为2.0ml/min；用顶空进样法进样，顶空温度为30℃；顶空时间为30min；进样温度200℃；采用柱温程序升温法，所述柱温升温程序具体为，起始柱温度40℃，维持10.0分钟，以每分钟6℃的速率升至180℃，维持3.0分钟；检测器选择氢火焰离子化检测器。分流比：3:1。所述顶空进样法中，所述气相色谱法中定量环的温度为40℃；所述气相色谱法中传输线的温度为60℃；所述检测器温度为250℃；检测结果如图6～图9所示。结果中保留时间为32.8的峰为n-甲基吡咯烷酮的溶剂峰；保留时间为6.4的物质为氟溴甲烷的峰，只有标准品溶液和测试溶液中存在氟溴甲烷，检测的丙酸氟替卡松api中没有氟溴甲烷残留。实施例4丙酸氟替卡松原料药中氟溴甲烷残留的检测溶液配制空白溶剂：2ml的丙酮，置于20ml顶空瓶中，密封备用；标准品溶液：取4.2g/50ml的氟溴甲烷2ml加入丙酮溶解，置于20ml顶空瓶中，密封备用；供试品溶液：取丙酸氟替卡松原料药0.4g，置于20ml顶空瓶中，加入2ml丙酮，密封备用；测试溶液：取丙酸氟替卡松原料药0.4g，置于20ml顶空瓶中，加入2ml标准品溶液，密封备用；将上述溶液分别进样，色谱条件如下：采用气相色谱法，以db-624为色谱柱，载气为氦气，载气流速为1.8ml/min；用顶空进样法进样，顶空温度为32℃；顶空时间为30min；进样温度200℃；采用柱温程序升温法，所述柱温升温程序具体为，起始柱温度40℃，维持10.0分钟，以每分钟6℃的速率升至180℃，维持3.0分钟；检测器选择氢火焰离子化检测器。分流比：3:1。所述顶空进样法中，所述气相色谱法中定量环的温度为40℃；所述气相色谱法中传输线的温度为60℃；所述检测器温度为250℃；测试溶液中检测结果如图10所示。结果中保留时间为8.812的峰为丙酮的溶剂峰；保留时间为6.694的物质为氟溴甲烷的峰，只有标准品溶液和测试溶液中存在氟溴甲烷，检测的丙酸氟替卡松api中没有氟溴甲烷残留。对照实施例对照实施例1分别取甲醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃、正己烷、甲苯、氟溴甲烷、二氯甲烷、二乙胺、三乙胺、乙酸乙酯、二甲基乙酰胺(dma)、异亚丙基丙酮，取各溶剂的api限度一百倍混合，加入到n-甲基吡咯烷酮溶剂中混合，作为专属性混样溶液，取2ml置于20ml顶空瓶中，密封备用；将上述溶液分别进样，色谱条件如下：采用气相色谱法，以db-624为色谱柱(6％氰丙基苯基-94％二甲基聚氧硅烷，30m×0.53mm×3.0μm)，载气为氦气，载气流速为2.5ml/min；用顶空进样法进样，顶空温度为30℃；顶空时间为30min；进样温度200℃；采用柱温程序升温法，所述柱温升温程序具体为，起始柱温度45℃，维持10.0分钟，以每分钟6℃的速率升至180℃，维持3.0分钟；检测器选择氢火焰离子化检测器。所述顶空进样法中，所述气相色谱法中定量环的温度为40℃；所述气相色谱法中传输线的温度为60℃；所述检测器温度为250℃；检测结果的色谱中的峰与溶剂的对应关系如下表所示：对照实施例2分别取甲醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃、正己烷、甲苯、氟溴甲烷、二氯甲烷、二乙胺、三乙胺、乙酸乙酯、二甲基乙酰胺(dma)、异亚丙基丙酮，取各溶剂的api限度一百倍混合，加入到n-甲基吡咯烷酮溶剂中混合，作为专属性混样溶液，取2ml置于20ml顶空瓶中，密封备用；将上述溶液分别进样，色谱条件如下：采用气相色谱法，以db-624为色谱柱(6％氰丙基苯基-94％二甲基聚氧硅烷，30m×0.53mm×3.0μm)，载气为氦气，载气流速为2.0ml/min；用顶空进样法进样，顶空温度为35℃；顶空时间为28min；进样温度210℃；采用柱温程序升温法，所述柱温升温程序具体为，起始柱温度48℃，维持12.0分钟，以每分钟8℃的速率升至220℃，维持2.0分钟；检测器选择氢火焰离子化检测器。所述顶空进样法中，所述气相色谱法中定量环的温度为42℃；所述气相色谱法中传输线的温度为55℃；所述检测器温度为260℃；检测的色谱中的峰与溶剂的对应关系如下表所示：以上对本发明的一个实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。当前第1页12