唾液尿酸等标志物特异性检测和诊断痛风的方法与流程

本发明涉及创新代谢标志物用于痛风疾病的无损诊断和监控技术领域，具体为唾液尿酸等标志物特异性检测和诊断痛风的方法。

背景技术：

体外诊断行业是一个充满活力和前景的领域，前几年，全球体外诊断产业规模已超过530亿美元的水平，预计到2020年底世界体外诊断行业的市场规模将达到近750亿美元，作为全球体外诊断产业发展中一个至关重要的市场，中国在近几年中不断涌现出具有市场竞争力的体外诊断企业，由于人口众多，我国在过去的十年间体外诊断产品市场持续保持两位数的高速增长，被认为是亚洲乃至世界发展前景最光明的市场。

作为对传统检测手段的革新，唾液检测将可能和血液、尿液检测一样成为诊断、监测疾病和健康普查的主要手段，目前这一观点在欧美发达国家已逐渐取得共识，唾液是身体循环的一部分，人体内几乎所有的物质都会在唾液中有所表现，在疾病发生过程中，体内某些刺激因子的作用可诱导唾液中生物分子的图谱和表达水平发生特征性的改变，故通过对唾液的分析可找到生物标靶分子，而这些唾液中的特异标靶分子可以用于临床诊断。近几年来美国已投资十亿美元用于唾液诊断技术的研发，唾液检测用于艾滋病的诊断在美国已经是最主流的手段，研发唾液诊断艾滋病的公司orasuretechnologies已经在美国nasdaq成功上市，并且该技术已经被美国fda批准病患可以在家中测试艾滋病毒，目前唾液诊断以及相关的产品在美国的市场已经达到近46亿的规模，并且还在以每年递增近20％的速度在成长，这些信息充分展示了唾液生物标记分子将成为未来医学检测领域的主流方向之一，市场前景非常广阔。

痛风是一种单钠尿酸盐(msu)沉积所致的晶体相关性关节病，与嘌呤代谢紊乱及(或)尿酸排泄减少所致的高尿酸血症直接相关，属代谢性风湿病范畴。痛风可并发肾脏病变，严重者可出现关节破坏、肾功能损害，常伴发高脂血症、高血压病、糖尿病、动脉硬化及冠心病等。痛风是一种常见且复杂的关节炎类型，各个年龄段均可能罹患本病，男性发病率高于女性。痛风患者经常会在夜晚出现突然性的关节疼，发病急，关节部位出现严重的疼痛、水肿、红肿和炎症，疼痛感可能持续几天或几周不等，严重影响日常生活。痛风的这些症状会反复出现，所以一旦关节出现强烈、突然的疼痛后，就要及时诊断和监测，做好症状管理和预防。否则关节本身受到损害，骨质会被腐蚀，导致关节变形，整个发病过程肾脏也会受损，严重的会发生肾结石甚至是肾衰竭，危及生命。痛风在中国是一种常见的慢性病，流行病学研究显示目前我国痛风的患病率在1％～3％(3000万患者左右)，并呈逐年上升趋势。

痛风病人就诊时，医生将对患者的临床表现作出评估，特别是借助x-线检查和实验室生化检查，以此确诊，通常要做血液的尿酸检测。但是血液检测具有入侵性、检测时间长，不可能经常抽血作为慢性痛风病的长期监控手段，也不适合家用检测和监控疾病。同时，采用尿酸一项指标不足以特异性地检测痛风，因为尿酸高并不意味着病人得了痛风，所以也需要更多的唾液代谢分子标志物进一步提高痛风检测的灵敏度和特异性。为此，我们提出唾液尿酸等标志物特异性检测和诊断痛风的方法。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供唾液尿酸等标志物特异性检测和诊断痛风的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：唾液尿酸等标志物特异性检测和诊断痛风的方法，包括以下步骤，

a.利用采集盖提取待检测人员唾液；

b.向采集盖内添加靶向反应分子；或者添加特异性分子标志物标准；

c.检测唾液中分子标志物的比值；

d.将采集盖放入收集瓶内。

优选的，步骤a中采集盖为一种可以密封的盖体，且待检测人员在提取唾液时需要使用纯净水漱口三次，漱口后等待五分钟待检测人员提供唾液样品。

优选的，步骤a中采集唾液含量为0.5至2ml。

优选的，步骤b中加入靶向反应分子，常温下等待2-3分钟，使靶向分子与唾液分子标志物反应，并生成可检测信号。由于开发的代谢分子标志物很多，其中一些代谢分子标志物可以采用标准标志物加入回收法检测。

优选的，步骤c中靶向分子与唾液分子标志物反应后，采用酶标仪可以准确读取反应信号，检测痛风代谢标志物的比值。如果采用标准标志物加入回收法，采用质谱检测仪器，检测唾液中代谢分子标志物的比值。

优选的，步骤d中采集盖放入收集瓶内，且收集瓶放入存储箱内，并调节温度恒定-60℃至-70℃。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1、本发明具有无损伤性，与血检相比，采用唾液代谢分子标志物检测痛风使患者避免了采血的痛苦。

2、本发明安全可靠。与血检相比，可完全避免通过血液传染疾病的发生。

3、本发明成本低廉且便于操作。唾液是人体中最容易获取的一种体液，便于收集和处理，可以实现快速诊断痛风。

4、本发明可用于疾病动态跟踪监测。与血液相比，唾液收集可随时反复进行，这使得疾病大量的动态监测成为可能。

5、本发明可以用于大规模筛查疾病。唾液检测方法比现在的血液或尿液分析更加简单、快捷、便宜，容易被接受和推广，适合中国国情，特别是用于广大乡镇居民的疾病检测和筛查。

附图说明

图1为本发明痛风和高尿酸血症病患唾液中代谢分子标志物的比较分析表格图；

图2为本发痛风病人和健康人群唾液中代谢分子标志物的比较分析表格图一；

图3为本发痛风病人和健康人群唾液中代谢分子标志物的比较分析表格图二。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

请参阅图1-3，本发明提供一种技术方案：唾液尿酸等标志物特异性检测和诊断痛风的方法，包括以下步骤，

a.利用采集盖提取待检测人员唾液；

b.向采集盖内添加靶向反应分子；或者添加特异性分子标志物标准；

c.检测唾液中分子标志物的比值；

d.将采集盖放入收集瓶内。

步骤a中采集盖为一种可以密封的盖体，且待检测人员在提取唾液时需要使用纯净水漱口三次，漱口后等待五分钟待检测人员提供唾液样品。

步骤a中采集唾液含量为0.5至2ml。

步骤b中加入靶向反应分子，常温下等待2-3分钟，使靶向分子与唾液分子标志物反应，并生成可检测信号。由于开发的代谢分子标志物很多，其中一些代谢分子标志物可以采用标准标志物加入回收法检测。

步骤c中靶向分子与唾液分子标志物反应后，采用酶标仪可以准确读取反应信号，检测痛风代谢标志物的比值。如果采用标准标志物加入回收法，采用质谱检测仪器，检测唾液中代谢分子标志物的比值。

步骤d中采集盖放入收集瓶内，且收集瓶放入存储箱内，并调节温度恒定-60℃至-70℃。

实施例：

待检测人员先利用生理盐水漱口，在将唾液涂在收集盖内提给检测人员，检测人员向采集盖内注入靶向分子，并放入恒温箱内反应，等反应完后，通过分子量检测仪器检测唾液中代谢分子标志物的比值，并对检测的代谢分子标志物的比值进行分析比较，判断出待检测人员的身体状况，最后将采集盖密封盖住，放入储箱内，并调节温度恒定-60℃至-70℃，以方便后续的检测。

需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。