本发明涉及快速检测技术领域，尤其是涉及一种毛发提取液、制备方法和应用以及毒品检测方法。
背景技术：
药物滥用已经成为当今全世界需要面对的重大社会问题之一，药物滥用(尤其是毒品)严重威胁社会治安，使国家社会生产力下降，给国家社会经济带来严重的影响。
常用的吸毒现场检测方法为免疫分析法。免疫层析试纸快速检测技术，是在单克隆抗体技术、免疫层析技术、新材料及标记技术基础上发展起来的一种新型免疫学快速检测技术，是基于抗原抗体特异性结合反应的原理，来检测各种物质如药物、激素、蛋白质。
针对毒品消费者，唾液、尿液中的毒品检测是毒品检查工作必不可少的一部分。研究表明，人员在吸食或注射毒品以后，毒品成分会在很长一段时间内残留于人体的唾液、尿液中。因此，通过检验唾液、尿液中的毒品含量，可以快速甄别嫌疑人的吸毒情况。传统的尿液、血液、唾液等生物体液的缺点：检测时限短(仅能体现生物体在短时间内的吸毒状态)，不易于采集和重复取样(涉及到个人隐私等方面)等缺点。
有鉴于此，特提出本发明。
技术实现要素：
本发明的第一个目的在于提供一种毛发提取液，以至少缓解现有技术中存在的技术问题之一。
本发明的第二个目的在于提供上述毛发提取液的制备方法，该方法工艺简单、操作方便，且制备得到的毛发提取液能够有效检测毛发中的毒品残留。
本发明的第三个目的在于提供上述毛发提取液在毒品检测中的应用。
本发明的第四个目的在于提供一种毒品检测方法，该方法配合本发明提供的毛发提取液，能够有效降低毒品检出限，同时有效增强毒品检测的灵敏度。
本发明提供了一种毛发提取液，所述毛发提取液主要由以下组分组成：100-200mmnacl、0.1-2mmcacl、质量浓度为0.1％-1％的sds、体积浓度为0.01％-0.1％的曲拉通x-100以及50-200μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
进一步地，所述毛发提取液主要由以下组分组成：120-180mmnacl、0.5-1.5mmcacl、质量浓度为0.2％-0.8％的sds、体积浓度为0.02％-0.08％的曲拉通x-100以及60-150μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
进一步地，所述毛发提取液主要由以下组分组成：150mmnacl、1mmcacl、质量浓度为0.5％的sds、体积浓度为0.05％的曲拉通x-100以及100μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
本发明还提供了上述的毛发提取液的制备方法，将nacl、cacl、sds、曲拉通x-100以及蛋白酶k加入pbs溶液中并混合均匀，得到配方浓度的毛发提取液。
本发明还提供了上述的毛发提取液或应用上述的制备方法制备得到的毛发提取液在毒品检测中的应用。
另外，本发明还提供了一种毒品检测方法，将预处理后的待测样品毛发加入上述的毛发提取液或应用上述的制备方法制备得到的毛发提取液中，反应后进行检测。
进一步地，所述预处理包括将待测样品毛发与单油酸甘油酯共同浸泡。
进一步地，所述预处理还包括将浸泡过单油酸甘油酯的待测样品毛发进行粉碎的步骤。
进一步地，将待测样品毛发加入毛发提取液中，进行超声及磁场反应，然后进行检测；
优选地，所述超声的功率为450-550w；
优选地，所述磁场的磁感应强度为200-300mt；
优选地，所述检测为干式荧光检测。
进一步地，在预处理前还包括清洗所述待测样品毛发的步骤；
优选地，使用有机溶剂对所述待测样品毛发进行清洗；
优选地，使用有机溶液和水对所述待测样品毛发进行交替清洗。
本发明提供的毛发提取液主要由以下组分组成：100-200mmnacl、0.1-2mmcacl、质量浓度为0.1％-1％的sds、体积浓度为0.01％-0.1％的曲拉通x-100以及50-200μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。本发明提供的毛发提取液通过特定浓度的各特定组分相互配合，能够有效检测出毛发中的毒品及其代谢物，具有检出限低且灵敏度高等优点。并且，通过各特定组分的特定浓度，能够大大减少蛋白酶的用量，在保证检测效率的基础上，有效节约成本。
本发明提供的毛发提取液的制备方法，将nacl、cacl、sds、曲拉通x-100以及蛋白酶k加入pbs溶液中并混合均匀，得到配方浓度的毛发提取液。该方法工艺简单、操作方便，且制备得到的毛发提取液能够有效检测毛发中的毒品残留。
本发明提供的毒品检测方法，将预处理后的待测样品毛发加入本发明提供的毛发提取液中，反应后进行检测，该方法配合本发明提供的毛发提取液，能够有效降低毒品检出限，同时有效增强毒品检测的灵敏度。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
需要说明的是：
本发明中，如果没有特别的说明，本文所提到的所有实施方式以及优选实施方法可以相互组合形成新的技术方案。
本发明中，如果没有特别的说明，本文所提到的所有技术特征以及优选特征可以相互组合形成新的技术方案。
本发明中，如果没有特别的说明，百分数(％)或者份指的是相对于组合物的重量百分数或重量份。
本发明中，如果没有特别的说明，所涉及的各组分或其优选组分可以相互组合形成新的技术方案。
本发明中，除非有其他说明，数值范围“a～b”表示a到b之间的任意实数组合的缩略表示，其中a和b都是实数。例如数值范围“3～30”表示本文中已经全部列出了“3～30”之间的全部实数，“3～30”只是这些数值组合的缩略表示。
本发明所公开的“范围”以下限和上限的形式，可以分别为一个或多个下限，和一个或多个上限。
本发明中，除非另有说明，各个反应或操作步骤可以顺序进行，也可以按照顺序进行。优选地，本文中的反应方法是顺序进行的。
除非另有说明，本文中所用的专业与科学术语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法或材料也可应用于本发明中。
本发明提供了一种毛发提取液，所述毛发提取液主要由以下组分组成：100-200mmnacl、0.1-2mmcacl、质量浓度为0.1％-1％的sds、体积浓度为0.01％-0.1％的曲拉通x-100以及50-200μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
其中，nacl例如可以为，但不限于100mm、110mm、120mm、130mm、140mm、150mm、160mm、170mm、180mm、190mm或200mm；cacl例如可以为，但不限于0.1mm、0.2mm、0.5mm、0.8mm、1mm、1.2mm、1.5mm、1.8mm或2mm；sds的质量浓度例如可以为，但不限于0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％或1％；曲拉通x-100的体积浓度例如可以为，但不限于0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％或0.1％；蛋白酶k例如可以为，但不限于50μg/ml、80μg/ml、100μg/ml、120μg/ml、150μg/ml、180μg/ml或200μg/ml。需要说明的是，在本发中，各组分的浓度均为其在毛发提取液中的终浓度。溶剂pbs为磷酸缓冲盐溶液，在本发明中，溶剂pbs可以为普通市售购得，也可以为实验室自行配置。
本发明提供的毛发提取液通过特定浓度的各特定组分相互配合，能够有效检测出毛发中的毒品及其代谢物，具有检出限低且灵敏度高等优点。并且，通过各特定组分的特定浓度，能够大大减少蛋白酶的用量，在保证检测效率的基础上，有效节约成本。同时，毛发作为一种吸毒认定的检测材料，比传统的尿液、血液、唾液等生物体液分析具有明显的优越性，例如毛发具有检测时限长，易于采集和重复取样，可以长期保存等特点。
在一些优选的实施方式中，所述毛发提取液主要由以下组分组成：120-180mmnacl、0.5-1.5mmcacl、质量浓度为0.2％-0.8％的sds、体积浓度为0.02％-0.08％的曲拉通x-100以及60-150μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
在一些更优选的实施方式中，所述毛发提取液主要由以下组分组成：150mmnacl、1mmcacl、质量浓度为0.5％的sds、体积浓度为0.05％的曲拉通x-100以及100μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
通过对毛发提取液中各组分浓度的进一步限定，能够使得本发明提供的毛发提取液能够更有效地提取毛发中的毒品及代谢产物，具有更高的检出率和更高的灵敏度。
本发明还提供了上述的毛发提取液的制备方法，将nacl、cacl、sds、曲拉通x-100以及蛋白酶k加入pbs溶液中并混合均匀，得到配方浓度的毛发提取液。
该方法工艺简单、操作方便，且制备得到的毛发提取液能够有效检测毛发中的毒品残留。
需要说明的是，在制备本发明提供的毛发提取液时，对各组分的加入顺序不做限定，只要最终各组分的浓度在本发明的限定范围内即可。优选地，最后加入蛋白酶k，最后加入蛋白酶k能够更有效的保证酶的活性，保证检测效率及高灵敏度。
本发明还提供了上述的毛发提取液或应用上述的制备方法制备得到的毛发提取液在毒品检测中的应用。
另外，本发明还提供了一种毒品检测方法，将预处理后的待测样品毛发加入上述的毛发提取液或应用上述的制备方法制备得到的毛发提取液中，反应后进行检测。
该方法配合本发明提供的毛发提取液，能够有效降低毒品检出限，同时有效增强毒品检测的灵敏度。
在本发明中，待测样品毛发可以为头发、汗毛、腋毛、鼻毛或眉毛等。
在一些优选的实施方式中，所述预处理包括将待测样品毛发与单油酸甘油酯共同浸泡。
通过将待测样品毛发和单油酸甘油酯共同浸泡，能够有效软化毛发组织，更有利于后期处理，进而提高检测效率。
在一些优选的实施方式中，所述预处理还包括将浸泡过单油酸甘油酯的待测样品毛发进行粉碎的步骤。
通过对毛发样品进行粉碎的处理，能够进一步使毛发样品中的物质充分释放溶出，能够进一步降低检出限，提高检测的灵敏度。
其中，对粉碎的方式不做限定，可以使用粉碎机进行粉碎，也可以使用研钵进行研磨。优选地，在惰性氛围下进行粉碎，在惰性氛围下进行粉碎可以尽可能的保证待测样品中所含的物质不受氧化影响，提高检测的准确性。
在一些优选的实施方式中，将待测样品毛发加入毛发提取液中，进行超声及磁场反应，然后进行检测。通过超声及磁场反应的配合联用，能够使待测样品在毛发提取液中更充分的溶解，并促使待测样品毛发中的各物质溶出，达到降低检出限，提高检测的灵敏度的效果。
优选地，所述超声的功率为450-550w，例如可以为，但不限于450w、460w、470w、480w、490w、500w、510w、520w、530w、540w或550w。
优选地，所述磁场的磁感应强度为200-300mt，例如可以为，但不限于200mt、210mt、220mt、230mt、240mt、250mt、260mt、270mt、280mt、290mt或300mt。
当待测样品毛发在上述限定的超声功率及磁感应强度的作用下与毛发提取液进行反应时，检出率更低，灵敏度更高。
优选地，所述检测为干式荧光检测。
在一些优选的实施方式中，在预处理前还包括清洗所述待测样品毛发的步骤。通过在检测前对待测样品进行清洗，能够去除不必要的杂质，提高检测的效率及准确性。
优选地，使用有机溶剂对所述待测样品毛发进行清洗。
优选地有机溶剂包括低碳醇，典型的低碳醇可以为甲醇、乙醇或丙醇，优选为乙醇。乙醇来源广泛，并且没有毒副作用，并且具有成本低廉的优点。
优选地，使用有机溶液和水对所述待测样品毛发进行交替清洗。可以理解的是，交替清洗例如可以为，先使用有机溶剂对待测样品毛发进行清洗，去除有机溶剂后，使用水对待测样品毛发进行清洗，去除水后，再使用有机溶剂对待测样品毛发进行清洗。采用有机溶液和水对所述待测样品毛发进行交替清洗的方式，能够更彻底的去除待测样品毛发中不必要的杂质，进一步提高检测的效率及准确性。
下面结合具体实施例和对比例对本发明作详细说明。
实施例1
本实施例提供了一种毛发提取液，毛发提取液主要由以下组分组成：
100mmnacl、2mmcacl、质量浓度为0.1％的sds、体积浓度为0.1％的曲拉通x-100以及50μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
实施例2
本实施例提供了一种毛发提取液，毛发提取液主要由以下组分组成：
200mmnacl、0.1mmcacl、质量浓度为1％的sds、体积浓度为0.01％的曲拉通x-100以及200μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
实施例3
本实施例提供了一种毛发提取液，毛发提取液主要由以下组分组成：
120mmnacl、1.5mmcacl、质量浓度为0.2％的sds、体积浓度为0.08％的曲拉通x-100以及60μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
实施例4
本实施例提供了一种毛发提取液，毛发提取液主要由以下组分组成：
180mmnacl、0.5mmcacl、质量浓度为0.8％的sds、体积浓度为0.02％的曲拉通x-100以及150μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
实施例5
本实施例提供了一种毛发提取液，毛发提取液主要由以下组分组成：
150mmnacl、1mmcacl、质量浓度为0.5％的sds、体积浓度为0.05％的曲拉通x-100以及100μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
对比例1
本对比例提供了一种毛发提取液，毛发提取液主要由以下组分组成：
80mmnacl、2.4mmcacl、质量浓度为0.08％的sds、体积浓度为0.12％的曲拉通x-100以及30μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
对比例2
本对比例提供了一种毛发提取液，毛发提取液主要由以下组分组成：
150mmnacl、质量浓度为0.5％的sds、体积浓度为0.05％的曲拉通x-100以及100μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
对比例3
本对比例提供了一种毛发提取液，毛发提取液主要由以下组分组成：
150mmnacl、1mmcacl、质量浓度为0.5％的sds以及100μg/ml蛋白酶k，溶剂为pbs溶液。
实施例6-10
本实施例提供了一种毒品检测方法，包括如下步骤：
(a)将待测样品毛发依次经过乙醇、水、乙醇进行清洗，清洗后在37℃烘干；
(b)将步骤(a)得到的待测样品毛发与单油酸甘油酯共同浸泡10min；
(c)在氮气氛围下将步骤(b)得到的待测样品毛发在37℃烘干后进行粉碎处理；
(d)称取5mg粉碎后的毛发，加入到实施例1-5提供的毛发提取液中，然后在500w超声及250mt磁场条件下反应5min。
(e)将步骤(d)得到的毛发提取液滴加在氯胺酮检测试纸条并结合广州大陌公司的干式荧光检测仪进行测试。
实施例11
本实施例提供了一种毒品检测方法，包括如下步骤：
(a)将待测样品毛发依次经过乙醇、水、乙醇进行清洗，清洗后在37℃烘干；
(b)将步骤(a)得到的待测样品毛发与单油酸甘油酯共同浸泡10min；
(c)在氮气氛围下将步骤(b)得到的待测样品毛发在37℃烘干后进行粉碎处理；
(d)称取5mg粉碎后的毛发，加入到实施例5提供的毛发提取液中，然后在500w超声及250mt磁场条件下反应5min。
(e)将步骤(d)得到的毛发提取液滴加在甲基苯丙胺检测试纸条并结合广州大陌公司的干式荧光检测仪进行测试。
实施例12
本实施例提供了一种毒品检测方法，包括如下步骤：
(a)将待测样品毛发依次经过乙醇、水、乙醇进行清洗，清洗后在37℃烘干；
(b)将步骤(a)得到的待测样品毛发与单油酸甘油酯共同浸泡10min；
(c)在氮气氛围下将步骤(b)得到的待测样品毛发在37℃烘干后进行粉碎处理；
(d)称取5mg粉碎后的毛发，加入到实施例5提供的毛发提取液中，然后在500w超声及250mt磁场条件下反应5min。
(e)将步骤(d)得到的毛发提取液滴加在吗啡检测试纸条并结合广州大陌公司的干式荧光检测仪进行测试。
实施例13
本实施例提供了一种毒品检测方法，包括如下步骤：
(a)将待测样品毛发经过乙醇进行清洗，清洗后在37℃烘干；
(b)将步骤(a)得到的待测样品毛发在37℃烘干后进行粉碎处理；
(c)称取5mg粉碎后的毛发，加入到实施例5提供的毛发提取液中，反应5min。
(d)将步骤(c)得到的毛发提取液滴加在氯胺酮检测试纸条并结合广州大陌公司的干式荧光检测仪进行测试。
实施例14
本实施例提供了一种毒品检测方法，包括如下步骤：
(a)将待测样品毛发依次经过乙醇、水、乙醇进行清洗，清洗后在37℃烘干；
(b)将步骤(a)得到的待测样品毛发与单油酸甘油酯共同浸泡10min；
(c)在氮气氛围下将步骤(b)得到的待测样品毛发在37℃烘干后进行粉碎处理；
(d)称取5mg粉碎后的毛发，加入到实施例1-5提供的毛发提取液中，然后在300w超声及400mt磁场条件下反应5min。
(e)将步骤(d)得到的毛发提取液滴加在氯胺酮检测试纸条并结合广州大陌公司的干式荧光检测仪进行测试。
对比例4-6
本对比例提供了一种毒品检测方法，包括如下步骤：
(a)将待测样品毛发依次经过乙醇、水、乙醇进行清洗，清洗后在37℃烘干；
(b)将步骤(a)得到的待测样品毛发与单油酸甘油酯共同浸泡10min；
(c)在氮气氛围下将步骤(b)得到的待测样品毛发在37℃烘干后进行粉碎处理；
(d)称取5mg粉碎后的毛发，加入到对比例1-3提供的毛发提取液中，然后在500w超声及250mt磁场条件下反应5min。
(e)将步骤(d)得到的毛发提取液滴加在氯胺酮检测试纸条并结合广州大陌公司的干式荧光检测仪进行测试。
上述检测结果如下表所示：
从上述结果中可以看出，本发明实施例1-5提供的毛发提取液，通过特定浓度的各特定组分相互配合，能够有效检测出毛发中的毒品及其代谢物，具有检出限低且灵敏度高等优点。而对比例1-3提供的毛发提取液均未能够检测出样品中的毒品。
其中，实施例6-10分别应用了本发明实施例1-5提供的毛发提取液对待测样品毛发进行检测，实施例1-5提供的毛发提取液其原料组分均相同，仅各组分的含量不同。但实施例5提供的毛发提取液对毒品的检测率要优于实施例1-4，实施例2和3提供的毛发提取液对毒品的检测率要优于实施例1和2。说明通过对各组分的含量进行进一步的调整和优化，使得本发明提供的毛发提取液具有更低的检出限及更高的灵敏度。
实施例11和实施例12分别应用本发明实施例5提供的毛发提取液对待测样品毛发中的甲基苯丙胺及吗啡进行检测，得到毛发中甲基苯丙胺及吗啡的含量，说明本发明提供的毛发提取液对多种毒品均具有检出效果。
实施例10及实施例13和14均是采用本发明实施例5提供的毛发提取液对待测样品毛发进行检测，但实施例13所用的毒品检测方法没有交替清洗、浸泡单油酸甘油酯及超声和磁场等优选步骤，实施例14所用的毒品检测方法中超声的功率及磁场的磁感应强度均不在本发明的优选范围内，实施例10的检测率要高于实施例13和14，说明在所用的毛发提取液相同的条件下，应用本发明提供的优选检测方法具有更低的检出限及更高的灵敏度。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。