一种C3转化酶功能检测试剂盒的制作方法

本实用新型涉及试剂盒技术领域，尤其涉及一种c3转化酶功能检测试剂盒。

背景技术：

补体是存在于正常人和脊椎动物的血清和组织液中的一组具有酶原活性的蛋白质，包括30余种可溶性蛋白质分子组成的复杂调控系统。补体是免疫系统的重要组成部分，在天然防御和免疫调控中具有重要的功能。补体功能检测的实验要求较高，步骤较复杂，目前临床检验已基本不开展此类检测，而只开展补体相关成分含量的检测。但由于补体成分含量和补体活性之间并无显著性的相关关系，因此，含量测定和活性测定并不能相互取代。

补体的激活分为经典途径、旁路途径和凝集素途径。其中，补体经典途径c3转化酶能否正常生成以及功能是否正常，是衡量补体经典途径生理功能是否正常的重要指标。而补体经典途径c3转化酶功能的检测较为复杂，一般情况下，非专业实验室或非专业检测人员无法开展此项检测。本发明针对目前临床检测和科研中缺乏补体经典途径c3转化酶形成及其功能检测试剂盒的现状，旨在提供一种可方便地进行补体经典途径c3转化酶功能检测的试剂盒。

技术实现要素：

为了达到上述目的，本实用新型提供一种c3转化酶功能检测试剂盒，解决了现有技术中存在的问题。

本实用新型所采用的技术方案是，一种c3转化酶功能检测试剂盒，包括盒体1、上盖2，盒体1与上盖2间设有易撕线3，盒体1上表面设有多个反应管槽4，反应管槽4内设置有反应管孔5；盒体1两相对侧壁分别凹陷设有第一侧腔6和第二侧腔7，第一侧腔6和第二侧腔7内分别设有第一试剂台8和第二试剂台9，试剂台一端与对应侧腔连接，连接方式为销轴连接；试剂台上表面设有多个试剂孔10；反应管槽4内水平放置有反应管11，试剂孔10内放置有试剂瓶组12。

优选的，所述反应管孔5孔径大小与反应管11直径相匹配，反应管孔5为盲孔。

优选的，所述侧腔底面设有多个定位孔13，试剂台靠近侧腔的侧面设有定位杆14，定位杆14一端销轴连接在试剂台侧面，定位杆另一端设有弯头。

优选的，所述试剂台横截面为刀柄型。

优选的，所述反应管孔5、试剂孔10内设有软垫层，反应管槽4内设有软垫层。

优选的，所述试剂瓶组包括一瓶冻干人血清15、一瓶致敏绵羊红细胞16、一瓶gvb缓冲液17、一瓶ggvb²⁺缓冲液18、一瓶生理盐水19。

优选的，所述试剂瓶组中各试剂的体积分别为：冻干人血清0.5ml、gvb缓冲液5ml、ggvb²⁺缓冲液5ml、生理盐水20ml；致敏绵羊红细胞为悬液2.5ml。

优选的，所述gvb缓冲液为含0.04mol/ledta的明胶巴比妥缓冲液。

优选的，所述ggvb²⁺缓冲液为含mg²⁺和ca²⁺的葡萄糖明胶巴比妥缓冲液。

本实用新型的有益效果是：

1、本实用新型在盒体与上盖间设有易撕线，使用者通过易撕线的设置很容易就能将包装打开；

2、本实用新型在第一侧腔和第二侧腔内分别设有可绕销轴旋转的第一试剂台和第二试剂台，使用时只需将试剂台旋转出侧腔并用定位杆固定，而无需移动试剂瓶组，旋进时节约了试剂盒的包装运输空间，旋出打开时方便使用；

3、本实用新型在侧腔底面设有多个定位孔，以方便使用者根据需求设置试剂台的位置进而确定试剂瓶组的摆放位置；

4、本实用新型设置有反应管槽和反应管孔，在包装运输及未使用时，反应管水平放置在反应管槽中，当打开包装需要使用时，将反应管从反应管槽中取出并竖直插入反应管孔，且本实用新型将试剂台横截面为刀柄型，刀柄处上方空间为反应管孔位置，因而不会因为反应管孔及反应管的插入而影响试剂台的旋进旋出；

5、本实用新型在反应管孔、试剂孔以及反应管槽内设有软垫层，该设置有效防止运输中试剂瓶及反应管的损伤，以及在使用时避免试剂瓶与固定座之间发生碰撞损坏，软固定，安全可靠；

附图说明

为了更清楚地说明本实用新型实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本实用新型的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是一种c3转化酶功能检测试剂盒的外型示意图；

图2是盒体打开上盖后的示意图；

图3是反应管装好前盒体使用时的剖面示意图；

图4是反应管装好后盒体使用时的剖面示意图；

图中，盒体-1，上盖-2，易撕线-3，反应管槽-4，反应管孔-5，第一侧腔-6，第二侧腔-7，第一试剂台-8，第二试剂台-9，试剂孔-10，反应管-11，试剂瓶组-12，定位孔-13，定位杆-14，冻干人血清-15，致敏绵羊红细胞-16，gvb缓冲液-17，瓶ggvb²⁺缓冲液-18，生理盐水-19。

具体实施方式

下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。

参考图1～4，一种c3转化酶功能检测试剂盒，包括盒体1、上盖2，盒体1与上盖2间设有易撕线3，盒体1上表面设有多个反应管槽4，反应管槽4内设置有反应管孔5；盒体1两相对侧壁分别凹陷设有第一侧腔6和第二侧腔7，第一侧腔6和第二侧腔7内分别设有第一试剂台8和第二试剂台9，试剂台一端与对应侧腔连接，连接方式为销轴连接；试剂台上表面设有多个试剂孔10；反应管槽4内水平放置有反应管11，试剂孔10内放置有试剂瓶组12。

进一步的，所述反应管孔5孔径大小与反应管11直径相匹配，反应管孔5为盲孔。

进一步的，所述侧腔底面设有多个定位孔13，试剂台靠近侧腔的侧面设有定位杆14，定位杆14一端销轴连接在试剂台侧面，定位杆另一端设有弯头。

进一步的，所述试剂台横截面为刀柄型。

进一步的，所述反应管孔5、试剂孔10内设有软垫层，反应管槽4内设有软垫层。

进一步的，所述试剂瓶组包括一瓶冻干人血清15、一瓶致敏绵羊红细胞16、一瓶gvb缓冲液17、一瓶ggvb²⁺缓冲液18、一瓶生理盐水19。

进一步的，所述试剂瓶组中各试剂的体积分别为：冻干人血清0.5ml、gvb缓冲液5ml、ggvb²⁺缓冲液5ml、生理盐水20ml；致敏绵羊红细胞为悬液2.5ml。

进一步的，所述gvb缓冲液为含0.04mol/ledta的明胶巴比妥缓冲液。

进一步的，所述ggvb²⁺缓冲液为含mg²⁺和ca²⁺的葡萄糖明胶巴比妥缓冲液。

工作原理：血清和致敏绵羊红细胞经混合孵育，补体经典途径成分c1、c4和c2能在致敏绵羊红细胞膜上顺序组装经典途径c3转化酶，然后，通过离心去除未与致敏绵羊红细胞结合的补体成分以及其它血清成分，加入edta缓冲液稀释的正常参考血清与致敏绵羊红细胞混匀，由于edta缓冲液稀释的正常参考血清已不具有生成经典途径c3转化酶的能力，因此，检测体系中发生的溶血反应皆由待检血清在致敏绵羊红细胞膜上形成的经典途径c3转化酶引发，溶血的程度与形成的c3转化酶的数量和功能有正相关性，因此，可通过检测和计算确定经典途径c3转化酶的活性或功能。

具体使用：

先将本实用新型易撕线撕开后移去上盖，露出盒体，将反应管自反应管槽中取出并插入反应管孔中，然后从侧腔内旋出试剂台并根据需求打开定位杆并将定位杆上的弯头插入定位孔中，定位杆、试剂台及侧腔底面形成一个稳固的三角形结构，使试剂台与盒体连接成一个稳定的结构体，即可开始检测。检测步骤如下：

取0.5ml冷生理盐水复溶冻干人血清，备用。

将待测血清(标本)用ggvb²⁺缓冲液按1:20比例进行稀释，备用。

取待测稀释血清100μl加入反应管中，加入100μl致敏绵羊红细胞，轻轻混合均匀后，37℃孵育5min；实验同步设置正常参考血清对照组。

取1ml生理盐水加入上述试管中，轻轻混悬红细胞，2000r/min离心10min，吸去上清。

加入100μl以含0.04mol/ledta的gvb缓冲液1:5稀释的正常人血清，轻轻混悬红细胞，然后37℃水浴孵育30min。

加入0.9ml冷生理盐水终止反应，以2000r/min离心10min。

取上清液于412nm处测吸光度。

待检血清c3转化酶活性(％)＝(待检血清od值/正常参考血清od值)×100％综上所述，本实用新型一种c3转化酶功能检测试剂盒，易撕开可有效防止试剂污染外部空间，颜色区分减少失误概率，使用时节约使用空间，有效克服了现有技术中的种种缺点而具有良好的应用前景。

以上所述仅为本实用新型的较佳实施例而已，并非用于限定本实用新型的保护范围。凡在本实用新型的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本实用新型的保护范围内。