一种化妆品中硼酸和硼酸盐总量的离子色谱检测方法与流程

本发明涉及硼酸和硼酸盐检测
技术领域：
，尤其涉及一种化妆品中硼酸和硼酸盐总量的离子色谱检测方法。
背景技术：
：硼酸及硼酸盐因其具有防腐抑菌作用而被用于化妆品生产中，常作为收敛剂加入口腔用品及爽身粉等制品中。然而过量硼酸类化合物的摄入往往会对人体产生危害，硼酸和硼酸盐在人体内排泄缓慢，长期摄入可导致慢性中毒。硼酸可抑制消化酶的活性，引起食欲减退、消化不良，妨碍营养物质的吸收，其吸收后会对男性生殖系统、内分泌系统、肝、肾等产生毒害作用。硼酸盐如果被人体吸入(尤其是儿童)或经过皮肤创伤吸收后，可诱发急性中毒，出现恶心。腹泻等症状，继之出现昏厥、肾衰竭甚至死亡。因此准确分析化妆品中硼酸和硼酸盐含量能为化妆品安全性提供重要的保障。基于硼酸和硼酸盐的安全性，《欧盟化妆品法规ec1223/2009》和我国《化妆品安全技术规范》(2015年版)对不同种类的化妆品中硼酸及硼酸盐的含量进行了严格限定：硼酸、硼酸盐及四硼酸盐在爽身粉中的含量限值为5％(以硼酸计)，其他产品(沐浴和烫发产品除外)中其含量限值为3％(以硼酸计)。化妆品中硼酸及硼酸盐主要包括：硼酸、四硼酸钠、过硼酸钠、硼酸钾、硼酸钠、硼酸锌，其中硼酸盐中包含不溶性硼酸盐，难以使用常规方法进行提取测定。目前相关检验标准仅为《化妆品安全技术规范》2015年版条款3.7硼酸及硼酸盐，该标准中的检测方法为甲亚胺-h比色法，存在以下问题：1)该方法测定对象为硼，并非仅测定硼酸和硼酸盐，易造成假阳性的问题。2)化妆品基质复杂，对比色法易形成显色干扰，进而引起测定结果的偏差。3)对于粉类基质，仅能测定其中游离硼酸含量，无法测定硼酸盐总含量。因此，急需一种可快速、准确检测化妆品中硼酸和硼酸盐总量的方法。技术实现要素：本发明的目的是针对现有方法易造成假阳性、测定结果偏差、无法提取分离和测定化妆品中硼酸和硼酸盐总含量的问题，提供一种化妆品中硼酸和硼酸盐总量的离子色谱检测方法。为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：提供一种化妆品中硼酸和硼酸盐总量的离子色谱检测方法，包括如下步骤：步骤一，化妆品中硼酸和硼酸盐的提取分离：精密称取化妆品样品1.0-3.0g，经处理得其灰分，向所述灰分中加入100-300ml盐酸溶液，溶解后得待净化溶液；将所述待净化溶液依次通过串联cleanertic-ag小柱和cleanertic-h小柱进行净化，即得样品工作液；步骤二，溶液配制：精密称取硼酸标准品，用超纯水溶解配制浓度为1mg/ml的硼酸标准储备溶液；稀释所述硼酸标准储备溶液，配制6个浓度的硼酸标准系列工作液；步骤三，离子色谱检测：将所述硼酸标准系列工作液和样品工作液分别注入到离子色谱仪中，进行色谱分析。进一步地，所述检测方法包括如下步骤：步骤一，化妆品中硼酸和硼酸盐的提取分离：精密称取化妆品样品1.0-3.0g于30ml瓷蒸发皿中，加入碳酸钠溶液5-15ml，在水浴上蒸干，再将所述瓷蒸发皿在电炉上碳化，然后移入高温炉，在500℃下灰化5-10小时，冷却后向灰分中加入盐酸溶液100-300ml溶解，即得待净化溶液；将所述待净化溶液依次通过串联cleanertic-ag小柱和cleanertic-h小柱进行净化，弃前3-9ml样液后开始接取，即得样品工作液；步骤二，溶液配制：精密称取硼酸标准品，用超纯水溶解配制浓度为1mg/ml的硼酸标准储备溶液；稀释所述硼酸标准储备溶液，配制1.0μg/ml、5.0μg/ml、20.0μg/ml、50.0μg/ml、100.0μg/ml、200.0μg/ml浓度的硼酸标准系列工作液；步骤三，离子色谱检测：将所述硼酸标准系列工作液和样品工作液分别注入到离子色谱仪中，进行色谱分析，以所述硼酸标准系列工作液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，建立标准曲线，得到回归方程；通过对比保留时间和标准曲线，计算所述化妆品样品中硼酸和硼酸盐总量。进一步地，步骤一中，所述碳酸钠溶液的质量浓度为1％。进一步地，步骤一中，所述盐酸溶液的质量浓度为10％。进一步地，步骤一中，所述cleanertic-ag小柱和cleanertic-h小柱在使用前需要进行活化处理。进一步优选地，所述活化处理具体为：用10ml超纯水淋洗，然后平放20min平衡。进一步地，步骤三中，所述离子色谱检测的离子色谱条件为：色谱柱：ionpaciceborate(9mm×250mm)离子排斥分析柱或等效色谱柱；柱温：30℃；淋洗液：3mmol/l甲烷磺酸(msa)+60mmol/l甘露醇；流速：1.00ml/min；进样量：25μl；检测器：抑制型电导检测；抑制器：排斥型阴离子微膜抑制器(acrs-ice5009mm)；抑制液：25mmol/l四甲基氢氧化铵+15mmol/l甘露醇，1ml/min。本发明采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：本发明的化妆品中硼酸和硼酸盐总量的离子色谱检测方法，采用的提取方法可高效地提取化妆品中硼酸和硼酸盐；采用离子色谱法检测，并选择对硼酸具有独特选择性的排斥色谱柱进行分析，专属性强，准确性高；离子色谱法重复性和重现性更优，操作简便自动化程度高、可以实现批量处理，从而提高检测工作效率，同时也提高了分析测试工作的质量。附图说明图1为硼酸标准品典型色谱图；图2为阳性样品色谱图。具体实施方式本发明提供了一种化妆品中硼酸和硼酸盐总量的离子色谱检测方法，包括如下步骤：步骤一，化妆品中硼酸和硼酸盐的提取分离：精密称取化妆品样品1.0-3.0g于30ml瓷蒸发皿中，加入碳酸钠溶液5-15ml，在水浴上蒸干，再将上述瓷蒸发皿在电炉上碳化，然后移入高温炉，在500℃下灰化5-10小时，冷却后向灰分中加入盐酸溶液100-300ml溶解，即得待净化溶液；将上述待净化溶液依次通过串联cleanertic-ag小柱和cleanertic-h小柱进行净化，弃前3-9ml样液后开始接取，即得样品工作液；步骤二，溶液配制：精密称取硼酸标准品，用超纯水溶解配制浓度为1mg/ml的硼酸标准储备溶液；稀释上述硼酸标准储备溶液，配制1.0μg/ml、5.0μg/ml、20.0μg/ml、50.0μg/ml、100.0μg/ml、200.0μg/ml浓度的硼酸标准系列工作液；步骤三，离子色谱检测：将上述硼酸标准系列工作液和样品工作液分别注入到离子色谱仪中，进行色谱分析，以上述硼酸标准系列工作液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，建立标准曲线，得到回归方程；通过对比保留时间和标准曲线，计算上述化妆品样品中硼酸和硼酸盐总量；其中离子色谱条件为：色谱柱：ionpaciceborate(9mm×250mm)离子排斥分析柱或等效色谱柱；柱温：30℃；淋洗液：3mmol/l甲烷磺酸(msa)+60mmol/l甘露醇；流速：1.00ml/min；进样量：25μl；检测器：抑制型电导检测；抑制器：排斥型阴离子微膜抑制器(acrs-ice5009mm)；抑制液：25mmol/l四甲基氢氧化铵+15mmol/l甘露醇，1ml/min。在优选例中，步骤一中，上述碳酸钠溶液的质量浓度为1％。在优选例中，步骤一中，上述盐酸溶液的质量浓度为10％。在优选例中，步骤一中，上述cleanertic-ag小柱和cleanertic-h小柱在使用前需要进行活化处理，即用10ml超纯水淋洗，然后平放20min平衡。下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，但不作为本发明的限定。需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。仪器：thermoscientificics2100系统离子色谱仪(配电导检测器)；分析天平(德国sartorius公司)；ms3digital涡旋混合器(德国ika公司)；5810r离心机(德国eppendorf公司)；milli-qadvantagea-10型超纯水纯化系统(美国millipore公司)。色谱柱：ionpaciceborate(9mm×250mm)离子排斥分析柱，或等效色谱柱；cleanertic-rp离子色谱前处理小柱(平均粒度40μm，交换容量300mg/1cc，天津博纳艾杰尔公司)；cleanertic-ag离子色谱前处理小柱(平均粒度40μm，交换容量2.0-2.2meq/1cc，天津博纳艾杰尔公司)；cleanertic-h离子色谱前处理小柱(平均粒度40μm，交换容量2.0-2.2meq/1cc，天津博纳艾杰尔公司)。药品：硼酸标准物质(纯度：99.5％，来源：accustandard)；四硼酸钠标准物质(纯度：99.9％，来源：上海麦克林生化科技有限公司)；过硼酸钠标准物质(纯度：98％，来源：北京偶合科技有限公司)；硼酸钾标准物质(纯度：99.3％，来源：武汉荣灿生物科技有限公司)；硼酸钠标准物质(纯度：97％，来源：北京韵邦生物科技有限公司)；甲烷磺酸(分析纯，上海麦克林生化科技有限公司)；甘露醇(分析纯，百灵威科技有限公司)；四甲基氢氧化铵(分析纯，上海麦克林生化科技有限公司)；实验用超纯水由milli-q超纯水机制备。实施例1本实施例提供了化妆品中硼酸和硼酸盐总量的离子色谱检测方法：精密称取样品1.0g于30ml瓷蒸发皿中，加入质量浓度为1％的碳酸钠溶液5ml，在水浴上蒸干，将瓷蒸发皿在电炉上碳化，然后移入高温炉，在500℃下灰化5小时，冷却后向灰分加入质量浓度为10％的盐酸溶液10ml溶解，转移至100ml容量瓶中，用水定容至刻度，混匀后作为待净化溶液，进行下一净化步骤。串联使用cleanertic-ag小柱和cleanertic-h小柱进行净化，上述小柱使用前需进行活化处理(用10ml超纯水淋洗，然后平放20min进行平衡)，活化后将待净化溶液倾倒入净化小柱(先通过cleanertic-ag小柱，后通过cleanertic-h小柱)，通过小柱的样品溶液弃前3ml样液后开始接取，作为样品工作液。精密称取硼酸标准品，用超纯水溶解稀释并转移至1l聚乙烯容量瓶中定容，配制成浓度为1mg/ml的硼酸标准储备溶液；采用超纯水稀释上述硼酸标准储备溶液，配制成浓度分别为1.0μg/ml、5.0μg/ml、20.0μg/ml、50.0μg/ml、100.0μg/ml、200.0μg/ml的硼酸标准系列工作液。将上述硼酸标准系列工作液和样品工作液分别注入到离子色谱仪中，进行色谱分析，1)以上述硼酸标准系列工作液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，建立标准曲线，得到回归方程，如表1所示：表1待测物质线性范围，μg/ml线性方程相关系数，r硼酸1.0-200.0y＝43.988x-0.7180.9992)通过对比保留时间和标准曲线，计算所述化妆品样品中硼酸和硼酸盐总量，采用如下公式进行计算：式中：ω(硼酸和硼酸盐总量)——化妆品中硼酸和硼酸盐总量的含量，％；m——样品取样量，g；ρ——代入标准曲线计算得到的样品中硼酸和硼酸盐总量的质量浓度，μg/ml；v——定容体积，ml。其中的离子色谱条件为：色谱柱：ionpaciceborate(9mm×250mm)离子排斥分析柱，或等效色谱柱；柱温：30℃；淋洗液：3mmol/l甲烷磺酸(msa)+60mmol/l甘露醇；流速：1.00ml/min；进样量：25μl；检测器：抑制型电导检测；抑制器：排斥型阴离子微膜抑制器(acrs-ice5009mm)；抑制液：25mmol/l四甲基氢氧化铵+15mmol/l甘露醇，1ml/min。以下是对本发明检测方法的回收率和rsd进行测定：以市售的粉类、液态水基类、膏霜乳液类、凝胶类四种化妆品基质作为测试对象，分别加入硼酸、四硼酸钠、过硼酸钠、硼酸钾、硼酸钠标准物质，制备高、低浓度的加标样品各6份；以市售的四种化妆品基质作为测试对象，分别加入硼酸锌标准物质，制备高浓度的加标样品各6份。将上述加标样品分别采用本发明步骤1～步骤三的方法进行检测，测定回收率和rsd，结果如表2所示：表2表2结果显示在高、低加标浓度条件下硼酸及硼酸盐的回收率范围在87.5％～109.5％范围内，相对偏差rsd(n＝6)在0.2％～2.3％，表明本发明的方法回收率结果良好。应用例采用实施例1提供的化妆品中硼酸和硼酸盐总量的离子色谱检测方法，对某a厂生产的添加了硼酸盐的粉类样品中的硼酸和硼酸盐的总含量进行提取与检测，其检测结果如图2和表3所示：表3样品待测物质含量粉类样品硼酸盐总量2.39％检出化合物与配方标示一致，说明方法准确可靠，可用于阳性样品验证和实际样品检测。上所述仅为本发明较佳的实施例，并非因此限制本发明的实施方式及保护范围，对于本领域技术人员而言，应当能够意识到凡运用本发明说明书内容所作出的等同替换和显而易见的变化所得到的方案，均应当包含在本发明的保护范围内。当前第1页12