技术特征：
1.分离左亚叶酸钙中间体及相关物质的方法，其特征在于，所述方法采用的色谱柱是以辛烷基键合硅胶为填料，采用流动相a和流动相b进行梯度洗脱，将所述左亚叶酸钙中间体及相关物质进行分离；所述流动相a为乙酸铵缓冲溶液；所述流动相b为有机溶液；所述相关物质为杂质a、杂质c、杂质g、对甲苯磺酸、杂质z1b、杂质z1d-1、杂质z1d-2、杂质sm1f、杂质sm1g、杂质sm1i、杂质sm1j中的一种或多种；杂质z1d-1、杂质z1d-2为一对异构体，所述左亚叶酸钙中间体及相关物质结构式如下：亚叶酸钙中间体及相关物质结构式如下：
2.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，所述乙酸铵缓冲溶液浓度为0.015～0.025mol/l。3.根据权利要求2中所述的方法，其特征在于，所述乙酸铵缓冲溶液ph为3.3～4.0，使用醋酸进行ph调节。4.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，所述有机溶液为甲醇、乙醇、乙腈中的一种或多种。5.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序为：时间/分钟流动相a/％流动相b/％093～973～7593～973～72080～9010～203070～8020～303550～6040～503693～973～74593～973～7。6.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，所述方法流动相流速为0.8～1.2ml/min；色谱柱柱温为35～45℃。7.鉴定左亚叶酸钙中间体及相关物质的方法，其特征在于，利用权利要求1中所述方法将检测物中所述左亚叶酸钙中间体及相关物质进行分离，通入检测器进行检测，将检测得到的色谱图与已知对照品色谱图进行对比，判定检测物中是否含有所述左亚叶酸钙中间体及相关物质；所述检测器波长设定为280
±
10nm。8.测定左亚叶酸钙中间体及相关物质含量的方法，其特征在于，所述方法具体包含以下步骤：1)配制检测品溶液、对照品溶液；取供检测品溶于稀释剂中，得检测品溶液；取所述相关物质标准品，用稀释剂溶解制成对照品溶液；2)分离；利用权利要求1中所述的方法，将所述左亚叶酸钙中间体及相关物质进行分离；3)鉴定；利用权利要求7中所述的方法，鉴定所述左亚叶酸钙中间体及相关物质；4)含量计算；根据鉴定过程中得到的色谱图，按峰面积归一化法计算检测品溶液中所述左亚叶酸钙中间体及相关物质的含量。9.根据权利要求8中所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中稀释剂为0.025mol/l磷酸钠和10g/l抗坏血酸的混合溶液。10.评价左亚叶酸钙中间体质量的方法，其特征在于，利用权利要求8所述方法测定所述左亚叶酸钙中所述相关物质的质量百分比或所述左亚叶酸钙中间体的质量百分比，与规定的合格标准进行对比，判定所述左亚叶酸钙中间体的质量。
技术总结
本发明属于分析化学领域，具体涉及一种高效液相色谱法分离检测左亚叶酸钙中间体及相关物质的方法，该方法采用的色谱柱是以辛烷基键合硅胶为填料，采用乙酸铵缓冲溶液和有机溶液进行梯度洗脱，将左亚叶酸钙中间体及相关物质进行分离，通入检测器进行检测；相关物质为杂质A、杂质C、杂质G、对甲苯磺酸、杂质Z1b、杂质Z1d-1、杂质Z1d-2、杂质SM1f、杂质SM1g、杂质SM1i、杂质SM1j；流动相流速为0.8～1.2ml/min；色谱柱柱温为35～45℃；检测器波长为280
技术研发人员：陈雯 余智奎 周书荣 兰昌云 刘阔
受保护的技术使用者：重庆华邦制药有限公司
技术研发日：2020.09.27
技术公布日：2022/4/12