用于缺铁性贫血早期诊断的铁蛋白检测试剂条及试剂盒的制作方法

本实用新型涉及医学检测技术领域，具体为一种用于缺铁性贫血早期诊断的铁蛋白检测试剂条及试剂盒。

背景技术：

血清铁蛋白是广泛存在于生物机体内的一种贮存铁的可溶组织蛋白，由一个蛋白质外壳和一个铁核心构成。铁蛋白的铁核心具有强大的结合铁和贮存铁的能力，以维持机体铁的供应和血红蛋白的相对稳定，铁蛋白是铁与蛋白的复合物，在肝脏、脾等许多组织中均可合成，体内绝大多数铁离子与铁蛋白呈结合态，铁蛋白水平与体内铁储存量呈正比关系，因此检测铁蛋白可以反映体内铁的储存状况，对于区分贫血病人是缺铁性贫血或其他慢性疾病引起的贫血以及人体内红细胞生成的评价有一定参考意义。

研究表明，血清铁蛋白的含量与机体储存铁是成一定比例的，lug/l的血清铁蛋白对应于8-l0mg或每公斤体重120ug储存铁，血清铁蛋白作为一个生物标志物在医学检验中最常应用于评价体内储存铁的状况及诊断缺铁性贫血，不同的检测方法确定的正常参考值都有所差别，通常成年男性血清铁蛋白的正常参考值都在30-300ng/ml左右，成年女性血清铁蛋白的正常参考值在10-160ng/ml左右，血清铁蛋白水平在妊娠期及急性贫血时降低，国内外诊断缺铁性贫血的血清铁蛋白标准采用<12μg/l作为小儿缺铁诊断指标，临床上血清铁蛋白的检测能甄别出缺铁的早期阶段，从而能尽早地采取调整膳食结构或补充铁剂等措施，预防缺铁性贫血的发生。

现有技术没有一次取样，取末梢血就能够检测铁蛋白含量的测试试剂条，也不能准确给出蛋白含量的多少，取样量多，尤其针对孩童，医生和患者操作都不方便，生化检测复杂，耗时长，准确度和灵敏度较低，也不能判定贫血严重程度，市场上多是以肉眼观察为主依次来进行诊断，这会造成误差，影响医生判断，不能给出有力的参考依据。

技术实现要素：

本实用新型的目的在于提供一种用于缺铁性贫血早期诊断的铁蛋白检测试剂条及试剂盒，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本实用新型提供如下技术方案：

一种用于缺铁性贫血早期诊断的铁蛋白检测试剂条，所述试剂条包括底板、样品垫、金标垫、nc膜及吸收垫，所述样品垫由rbc抗体和玻璃纤维素膜构成，所述金标垫由未处理的玻璃纤维素膜和铁蛋白胶体金抗体构成，所述nc膜为sf单体克隆抗体1-羊抗鼠抗体硝酸纤维素膜；其中，所述样品垫、金标垫、nc膜和吸收垫依次粘附在底板上。

优选的，所述铁蛋白胶体金抗体具体为铁蛋白单克隆抗体2-胶体金。

优选的，所述nc膜上设有用于检测sf的t线及用于配合t线定量检测sf浓度的c线，所述t线上包被有sf单克隆抗体1，所述c线上包被有羊抗鼠抗体。

优选的，所述吸收垫为用于吸取液体的吸水纸。

优选的，所述样品垫一端与底板对齐，另一端压在金标垫上，所述金标垫粘贴在底板靠近t线的一端nc膜处，覆盖nc膜，所述吸收垫粘贴在靠近c线的一端，所述吸收垫一端与底板对齐，另一端压在nc膜上，覆盖nc膜。

优选的，所述试剂条为各组件组装后宽为3.9mm的切条。

一种试剂盒，包括上述任一项所述的用于缺铁性贫血早期诊断的铁蛋白检测试剂条。

优选的，所述试剂盒包括上卡壳和下卡壳，所述上卡壳上设有加样孔和观测口，所述加样孔与样品垫位置相对应，所述观测口与nc膜位置相对应，其中nc膜上的t线和c线位于观测口中部，t线位于观测口中间，所述下卡壳内设有与测试条相契合的卡槽。

优选的，所述试剂盒与用于定量检测sf含量的配套仪器适配连接。

与现有技术相比，本实用新型的有益效果是：

本实用新型一次取样末梢血就能够检测出铁蛋白含量多少以及缺铁性贫血的程度，取样量少，稳定性好，在检测准确度、耗时、安全性、检测价格及操作等方面具有显著优势，尤其针对孩童，将婴幼儿末梢血样品加样到样品垫上，样品垫上的rbc抗体对样品预处理，提高铁蛋白溶出率，进而提高了检测效率，取少量样品便能准确检测出缺铁性贫血程度，医生和患者操作都比较方便；本实用新型的铁蛋白测试条运用双抗体夹心法免疫层析技术，与配套仪器使用，实现婴幼儿体内铁蛋白的定量检测，为诊断缺铁性贫血提供了有效参考依据。

附图说明

图1为本实用新型的铁蛋白检测试剂条结构示意图；

图2为本实用新型的铁蛋白检测试剂条主视图；

图3为本实用新型的nc膜主视图；

图4为本实用新型的试剂盒结构爆炸图。

图中：1试剂条、2底板、3样品垫、4金标垫、5nc膜、501t线、502c线、6吸收垫、7上壳体、701加样孔、702观测口、8下卡壳、801卡槽。

具体实施方式

下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。

实施例1

请参阅图1-3，本实用新型提供一种技术方案：一种用于缺铁性贫血早期诊断的铁蛋白检测试剂条，该试剂条1包括底板2、样品垫3、金标垫4、nc膜5及吸收垫6，其中，样品垫3由rbc抗体和玻璃纤维素膜构成，金标垫4由未处理的玻璃纤维素膜和铁蛋白胶体金抗体构成，该铁蛋白胶体金抗体具体为铁蛋白单克隆抗体2-胶体金；nc膜5为sf单体克隆抗体1-羊抗鼠抗体硝酸纤维素膜，nc膜5上设有用于检测sf的t线501及用于配合t线501定量检测sf浓度的c线502，其中t线501为检测线，其上包被有sf单克隆抗体1，c线502为质控线，其上包被有羊抗鼠抗体；吸收垫6为用于吸取液体的吸水纸。

其中，样品垫3、金标垫4、nc膜5和吸收垫6依次粘附在底板2上，具体为：样品垫3一端与底板2对齐，另一端压在金标垫4上，金标垫4粘贴在底板2靠近t线501的一端nc膜5处，覆盖nc膜5，吸收垫6粘贴在靠近c线502的一端，吸收垫6一端与底板2对齐，另一端压在nc膜5上，覆盖nc膜5，试剂条1为各组件组装后宽为3.9mm的切条。

实施例2

请参阅图4，本实用新型提供一种技术方案：一种试剂盒，包括上述用于缺铁性贫血早期诊断的铁蛋白检测试剂条，该试剂盒与用于定量检测sf含量的配套仪器适配连接，试剂盒包括上卡壳7和下卡壳8，其中上卡壳7上设有加样孔701和观测口702，加样孔701与样品垫3位置相对应，观测口702与nc膜5位置相对应，其中nc膜5上的t线501和c线502位于观测口702中部，t线501位于观测口702中间，下卡壳8内设有与测试条相契合的卡槽801。

检测原理：应用双抗体夹心免疫层析法，样本中的sf在毛细效应下向上层析与胶体金标记的sf单克隆抗体2结合，随后结合物被包被在t线的sf单克隆抗体1捕获结合，形成一条红色条带，包被于c线的质控抗体与复合物结合，形成一条红色条带，测试条装入卡壳并组合成试剂盒，与试剂盒配套的分析仪对反应区域显色强度进行测定，定量得出被测物质浓度，实现婴幼儿体内铁蛋白的定量检测，为诊断缺铁性贫血提供参考依据。

检验过程：首先需对试剂条各组件进行预处理，其中，样品垫采用现有技术处理方法处理后进行37℃烘干，烘干后在样品垫靠近金标垫的一端喷涂rbc抗体，制成涂滤血带，烘干密封保存；对金标垫的处理：先进性胶体金标记，胶体金标记物为铁蛋白单克隆抗体2，具体为：在碱性条件下，胶体金颗粒表面带负电荷，与铁蛋白单克隆抗体2所带正电荷基团之间形成非共价键的静电吸引而牢固结合，这种结合对所标铁蛋白单克隆抗体2的生物学活性无明显影响，即对铁蛋白单克隆抗体2本身性能无影响，吸附在胶体金表面的铁蛋白单克隆抗体2能定向将胶体金颗粒载运到组织或细胞内、固相载体上相应抗体或抗原的位置，最后将铁蛋白胶体金抗体与未处理的玻璃纤维素膜结合制得金标垫，其中，在胶体金标记前需要对铁蛋白单克隆抗体2进行彻底除盐的预处理，标记过程中，最适ph值略大于铁蛋白单克隆抗体2的等电点，根据金颗粒的大小确定铁蛋白单克隆抗体2的实际用量，进行胶体金标记时，采用浓度梯度法对ph环境、蛋白/抗体浓度、参数进行优化，具体为采用氯化钠破坏法进行最佳条件的优化确，此外，也可以对胶体金溶液ph浓度梯度标记及蛋白/抗体用量分别进行优化确定；在处理nc膜时，需先将nc膜粘贴在底板上，然后在nc膜上包被铁蛋白单克隆抗体1和羊抗鼠抗体，划线并37℃烘干后得到制备好的划线底板；

其次，制备试剂条并将试剂条组装在试剂盒中，具体为：将样品垫、金标垫、nc膜和吸收垫依次粘附在底板上，样品垫一端与底板对齐，其另一端压在金标垫上，金标垫粘贴在底板靠近t线的一端nc膜处，覆盖nc膜，吸收垫粘贴在靠近c线的一端，吸收垫一端与底板对齐，其另一端压在nc膜上，覆盖nc膜，组装后进行切条，切成宽为3.9mm的测试条，将测试条放入试剂盒内，通过上壳体和下壳体进行固定，具体为测试条放置于相契合的卡槽中，加样孔对应位置样品垫，观测口对应位置nc膜，t、c线位于观测口中部，t线置于观测口中间；

最后，进行检验时，取样末梢血，通过加样孔，将样本加入到样品垫上，再由观测口进行观察nc膜上是否出现红色条带，将试剂盒插入配套仪器中进行测量，定量得出sf浓度。

综上，本实用新型一次取样末梢血就能够检测出铁蛋白含量多少以及缺铁性贫血的程度，取样量少，稳定性好，运用双抗体夹心法免疫层析技术，与配套仪器使用，实现婴幼儿体内铁蛋白的定量检测，为诊断缺铁性贫血提供了有效参考依据。

尽管已经示出和描述了本实用新型的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本实用新型的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本实用新型的范围由所附权利要求及其等同物限定。