1.一种通过测量溶液中蛋白质聚集的量或分数鉴定用于药物制剂中的蛋白质浓度的方法,所述测量溶液中蛋白质聚集的量或分数基于所述溶液的蛋白质浓度,其中所述测量的步骤通过制剂制备系统的从内存执行指令的处理单元来实施,包括:
提供包含增加浓度的蛋白质的若干第一溶液,所述蛋白质具有天然状态和变性状态,其中所述若干第一溶液包含至少五种不同的蛋白质浓度;
测量所述若干第一溶液中每个溶液的可观察的特征;
基于所述可观察的特征,确定所述若干第一溶液中每种浓度下蛋白质的构象稳定性的δg;创建δg与每种浓度的所述蛋白质之间的相关性;
使用所述相关性在24小时内确定从天然状态或变性状态聚集的所述蛋白质的量和/或分数;和
进一步使用所述相关性来鉴定最大化δg并且最小化δg的蛋白质浓度依赖性的蛋白质浓度,以使来自变性状态的聚集在药物制剂中最小化。
2.根据权利要求1所述的方法,所述若干溶液中的每种溶液无条件不同或不超过三种条件不同,所述条件选自由缓冲液组成、缓冲液强度、ph、离子强度、赋形剂组成、赋形剂浓度、化学变性剂组成和化学变性剂浓度构成的组。
3.根据权利要求1所述的方法,进一步包括:
提供包括增加浓度的所述蛋白质的若干至少第二溶液,其中所述若干至少第二溶液包含至少五种不同的蛋白质浓度;
测量所述若干至少第二溶液中的每种溶液的可观察的特征;
基于所述可观察的特征,确定所述若干至少第二溶液中每种浓度的蛋白质的构象稳定性的δg;
创建所述若干至少第二溶液的δg与所述蛋白质的每种浓度之间的相关性;和
使用所述相关性在24小时内确定所述若干至少第二溶液中从天然状态或变性状态聚集的蛋白质的量或分数;
所述若干至少第二溶液与所述若干第一溶液的区别在于一个或多个条件,所述条件选自由缓冲液组成、缓冲液强度、ph、离子强度、赋形剂组成、赋形剂浓度、化学变性剂组成和化学变性剂浓度构成的组。
4.根据权利要求3所述的方法,所述若干至少第二溶液中的每种溶液无条件不同或不超过三种条件不同,所述条件选自由缓冲液组成、缓冲液强度、ph、离子强度、赋形剂组成、赋形剂浓度、化学变性剂组成和化学变性剂浓度构成的组。
5.根据权利要求3所述的方法,所述若干至少第二溶液包含与所述若干第一溶液相同浓度的所述蛋白质的溶液。
6.根据权利要求3所述的方法,对于若干第一溶液的每个溶液和若干至少第二溶液的每个溶液,进一步包括创建δg与条件之间的相关性,所述条件选自由缓冲液组成、缓冲液强度、ph、离子强度、赋形剂组成、赋形剂浓度、化学变性剂组成和化学变性剂浓度构成的组。
7.根据权利要求3所述的方法,进一步包括创建聚集的所述蛋白质的量或分数与条件之间的相关性,所述条件选自由缓冲液组成、缓冲液强度、ph、离子强度、赋形剂组成、赋形剂浓度、化学变性剂组成和化学变性剂浓度构成的组。
8.根据权利要求3所述的方法,进一步包括比较所述若干第一溶液中聚集的蛋白质的量或分数与所述若干至少第二溶液中聚集的蛋白质的量或分数。
9.根据权利要求1所述的方法,其中,所述方法能够检测或确定1ng/ml或更少的变性的蛋白质或1ng/ml或更少的聚集的蛋白质。
10.根据权利要求1所述的方法,其中,所述若干第一溶液中的每个溶液包含0.1μg/ml至0.2μg/ml的所述蛋白质。
11.根据权利要求3所述的方法,其中,所述若干至少第二溶液中的每个溶液包含0.1μg/ml至0.2μg/ml的所述蛋白质。
12.根据权利要求1所述的方法,其中,所述可观察的特征是荧光性。
13.根据权利要求3所述的方法,其中,所述若干至少第二溶液与所述若干第一溶液的区别至少在于化学变性剂浓度。
14.根据权利要求1所述的方法,进一步包括鉴定使δg最大化并使δg的蛋白质浓度依赖性最小化的蛋白质浓度的步骤。
15.根据权利要求1所述的方法,进一步包括使用所述相关性来确定在所述若干第一溶液中所述变性的蛋白质的量或分数的步骤。
16.根据权利要求3所述的方法,进一步包括确定所述若干至少第二溶液中变性的所述蛋白质的量或分数和聚集的所述变性的蛋白质的分数的步骤;和
比较所述若干第一溶液中聚集的所述蛋白质的量或分数或变性的所述蛋白质的量或分数与所述若干至少第二溶液中聚集的所述蛋白质的量或分数或变性的所述蛋白质的量或分数的步骤。
17.一种制备最小蛋白质聚集的药学上可接受的蛋白质制剂的方法,所述方法包括:
提供包含增加浓度的蛋白质的若干第一溶液,所述蛋白质具有天然状态和变性状态;测量所述若干第一溶液中的每个溶液的可观察的特征;基于所述可观察的特征,确定所述若干第一溶液中每个浓度下构象稳定性的δg;创建δg与所述若干第一溶液中所述蛋白质的每个浓度之间的相关性;和使用所述相关性在24小时内确定所述若干第一溶液中从天然状态或变性状态聚集的蛋白质的量或分数,其中所述测量的步骤通过制剂制备系统的从内存执行指令的处理单元来实施;
提供包括增加浓度的蛋白质的若干至少第二溶液;测量所述若干至少第二溶液中的每个溶液的可观察的特征;基于所述可观察的特征,确定所述若干至少第二溶液中每个浓度下构象稳定性的δg;创建δg与所述若干至少第二溶液中所述蛋白质的每个浓度之间的相关性;和使用所述相关性在24小时内确定从天然状态或变性状态聚集的所述蛋白质的量或分数,其中所述测量的步骤通过制剂制备系统的从内存执行指令的处理单元来实施;
其中,所述若干第一溶液包含至少五种不同的蛋白质浓度,所述若干至少第二溶液包含至少五种不同的蛋白质浓度;
其中,所述若干至少第二溶液区别于所述若干第一溶液在于一种或多种条件,所述条件选自由缓冲液组成、缓冲液强度、ph、离子强度、赋形剂组成、赋形剂浓度、化学变性剂组成和化学变性剂浓度构成的组;
使用δg与所述蛋白质浓度之间的相关性来确定具有最大化的δg和最小化的δg的蛋白质浓度依赖性的所述蛋白质浓度;和
制备包含具有最大化的δg和最小化的δg的蛋白质浓度依赖性和最小化蛋白质从变性状态聚集的所述蛋白质的所述浓度的药学上可接受的蛋白质制剂。
18.根据权利要求17所述的方法,进一步包括选择进一步最大化δg和最小化δg的蛋白质浓度依赖性的一种或多种条件的步骤,所述条件选自由缓冲液组成,缓冲液强度、ph、离子强度、赋形剂组成、赋形剂浓度、化学变性剂组成和化学变性剂浓度构成的组。
19.根据权利要求17所述的方法,其中,所述若干至少第二溶液区别于所述若干第一溶液至少在于化学变性剂浓度。
20.具有所述一种或多种条件和所述蛋白质的所述浓度的药学上可接受的蛋白质制剂根据权利要求18中的所述的方法来确定。
21.确定所述若干蛋白质的变体中稳定的蛋白质变体的方法,所述蛋白质变体具有天然状态和变性状态,其包括以下步骤:
提供包括增加浓度的第一蛋白质变体的若干第一溶液;诱导第一蛋白质变体物理或化学变性;测量所述若干第一溶液中的每个溶液的可观察的特征;基于所述可观察的特征,确定所述若干第一溶液中每个浓度下第一蛋白质变体的构象稳定性的δg;创建δg与所述第一蛋白质变体的每个浓度之间的相关性;和使用所述相关性来确定从天然状态或变性状态聚集的所述第一蛋白质变体的量或分数,其中所述测量的步骤通过制剂制备系统的从内存执行指令的处理单元来实施;和
提供包括增加浓度的至少第二蛋白质变体的若干至少第二溶液;诱导物理或化学变性;测量所述若干至少第二溶液中的每个溶液的可观察的特征;基于所述可观察的特征,确定若干至少第二溶液中每个浓度下至少第二蛋白质变体的构象稳定性的δg;创建δg与所述至少第二蛋白质变体的每个浓度之间的相关性;和使用所述相关性来确定聚集的蛋白质的量或分数,其中所述测量的步骤通过制剂制备系统的从内存执行指令的处理单元来实施;
其中,所述若干第一溶液包含至少五种不同的蛋白质浓度,所述若干至少第二溶液包含至少五种不同的蛋白质浓度;
其中,所述若干第一溶液中的每个溶液区别在于一种或多种条件,所述条件选自由缓冲液组成,缓冲液强度、ph、离子强度、赋形剂组成、赋形剂浓度、化学变性剂组成和化学变性剂浓度构成的组,和所述若干至少第二溶液中的每个溶液的区别在于一种或多种条件;
其中,所述稳定的蛋白质变体在24小时内被确定为具有较少量或分数的从变性状态聚集的蛋白质变体。
22.根据权利要求21所述的方法,其中,所述蛋白质变体是从不同杂交瘤克隆获得的单克隆抗体。
23.根据权利要求21所述的方法,其中,所述蛋白质变体包括一个或多个糖基化氨基酸不同的蛋白质或包括一个或多个小分子修饰而不同的蛋白质。
24.根据权利要求21所述的方法,其中,所述若干第一溶液中的每种溶液的区别至少在于化学变性剂浓度,并且若干至少第二溶液中的每种溶液的区别至少在于化学变性剂浓度。