本发明涉及生物制品
技术领域：
，尤其是涉及一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法及基质血清。
背景技术：
：质量控制的目的就是检测分析过程中的误差，控制与分析有关的各个环节，确保实验室结果准确可靠。全面的质量控制包括分析前、分析中、分析后的三个主要过程的质控，只有正确认识和检测及控制这三个过程的各个环节误差，才能保证最后检验结果质量。而质量保证的关键在于如何正确理解认识及较好选用质控血清，所以质控血清的质量好坏直接影响到检验结果的可靠性和准确性。多年以来，基质效应的存在是困扰实验室检测的一个重大难题，这是因为几乎所有的样品都存在着基质效应，无论检测其中的哪一个分析物，都会收到基质效应不同程度的影响。而造成基质效应的原因则与待测样品的组成成分和质控材料的组成和处理的技术有关。因而基质效应对临床检测的影响不能够忽视。目前也有很多相关的研究减弱基质效应的方法，例如，中国专利cn105675772b公开了一种液质联用检测技术中减弱基质效应的方法，以液相色谱-串联质谱联用检测方法检测果蔬中农药残留时，采用小体积进样：当样品为弱基质效应样品时，进样体积小于5μl；当样品为中等强度基质效应样品时，进样体积小于等于2μl；当样品为强基质效应样品时，先通过一定程度的基质稀释，再采用小体积进样。该方法可以减弱基质效应，但是操作起来较为繁琐，并且该方法没有直接对质控血清本身或分离方法作出改进，因此，还有改善的空间。技术实现要素：本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法，该方法可以有效地去除血浆、血清中绝大部分的蛋白和脂类物质，排除基质效应对临床检测结果的影响，提高了基质血清的稳定性，且制得的基质血清与临床样本的基体相一致。本发明的第一目的是提供了一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法，该方法包括以下步骤：s1.称取硫酸铵加入至阴性血浆或阴性血清中混合，离心取上清液i；s2.称取活性炭和硅藻土或右旋糖酐，加入生理盐水混匀，离心弃上清，留混合沉淀a；s3.向步骤s2中的混合沉淀a中加入步骤s1的上清液i，混匀离心，取上清液ii；s4.称取活性炭和硅藻土或右旋糖酐，加入生理盐水混匀，离心弃上清，留混合沉淀b；s5.向步骤s4中的混合沉淀b中加入步骤s3的上清液ii，混匀离心，取上清液iii，过滤得基质血清。本发明发明人经过大量研究及试验发现，采用上述的方法可以有效去除血浆、血清中的绝大部分的蛋白质和脂类物质，排除了基质效应对临床检测结果的影响，使得制备的基质血清稳定性更强，进而通过基质血清稀释得到质控物稳定性也较强，能满足实际测量需要。通过加入硫酸铵至阴性血浆或阴性血清中，硫酸铵在血清或血浆溶液中可与蛋白质竞争水分子，从而破坏蛋白质表面的水化膜，降低其溶解度，使之从溶液中沉淀出来；通过在阴性血浆中加入活性炭和硅藻土，活性炭的多孔结构提供了大量的表面积，从而使其非常容易达到吸附杂质的作用。硅藻土具有微细多孔结构，具有强大的吸附能力；再次加入活性炭和硅藻土，使得吸附效果比一次性加入活性炭和硅藻土好，活性炭吸附杂质到一定程度后吸附与脱吸附处于平衡状态时，吸附效力会有所减弱。通过在阴性血清中加入活性炭和右旋糖酐，右旋糖酐起到分子筛的作用；再次加入活性炭和右旋糖酐，使得吸附效果比一次性加入活性炭和硅藻土好，活性炭吸附杂质到一定程度后吸附与脱吸附处于平衡状态时，吸附效力会有所减弱。其中脂类包括总胆固醇、甘油三酯和磷脂等。蛋白质包括总蛋白、白蛋白和球蛋白等。作为本发明所述方法的优选实施方式，所述步骤s2和步骤s4中，所述硫酸铵在阴性血浆中的质量浓度为50％～100％，所述活性炭和硅藻土的质量比为(5-8):(1-2)。在本发明的技术方案中，硫酸铵在阴性血浆中的质量浓度为50％～100％；活性炭和硅藻土通过设置特定的比例，使得阴性血浆中分离蛋白质和脂类的效果较佳，排除了基质效应对临床检测结果的影响，使得制备的基质血清稳定性更强。作为本发明所述方法的优选实施方式，所述步骤s2和步骤s4中，所述硫酸铵在阴性血清中的质量浓度为50％～100％，所述活性炭和右旋糖酐的质量比为(5-8):(1-2)。活性炭和右旋糖酐通过设置特定的比例，使得阴性血清分离蛋白质和脂类的效果较佳，排除了基质效应对临床检测结果的影响，使得制备的基质血清稳定性更强，提高临床检测结果的可靠性和准确性。作为本发明所述方法的优选实施方式，所述步骤s2和步骤s4中，所述生理盐水中氯化钠的浓度为0.9％。在本发明的技术方案中，在形成混合沉淀a和混合沉淀b过程中，均需加入浓度为0.9％的生理盐水用于浸泡活性炭/硅藻土/右旋糖苷，使其达到充分湿润的效果。作为本发明所述方法的优选实施方式，所述步骤s2和步骤s4中，离心速度为4000-5000rpm，离心时间为20-30min。本发明第二目的是提供了一种基质血清，其基质血清采用上述的分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法得到。本发明的基质血清用于稀释hcv阳性血清样本的检测结果较好，与理论值浓度相差最小；本发明稀释的hcv阳性血清样本，放置25℃环境能稳定保存5天，而对比例1～3均出现核酸降解的情况，甚至是检测不出。因此本发明的基质血清用于稀释hcv血清样本，具有稀释效果好，稳定性好的优点。本发明第三目的是提供了上述基质血清在制备hcvrna质控物中的应用。本发明第四目的是提供了上述基质血清在制备hbsag质控物中的应用。本发明第五目的是提供了上述基质血清在制备糖抗原125质控物中的应用。本发明第六目的是提供了上述基质血清在稀释临床样本中的应用。与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：1)本发明提供了一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法，该方法可以有效地去除血浆、血清中绝大部分的蛋白和脂类物质，排除基质效应对临床检测结果的影响，提高了基质血清的稳定性；2)本发明提供了一种基质血清，该基质血清与临床样本的基体相一致，主要用于制备质控物和稀释临床样本，其原理是采用去除不含待测物或干扰物的基质血清作为稀释液，达到降低检测样本基质效应的效果，提高临床检测结果的可靠性和准确性。具体实施方式为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。实施例1、一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法，包括以下步骤：s1.称取76.8g硫酸铵粉末，加入至100ml阴性血浆中，边搅拌边缓慢向溶液中加入，静置30min，4000rpm离心，20～30分钟，留取上清液i；s2.称取0.9g氯化钠，溶解在40ml灭菌纯水中，最后定容到100ml，形成浓度为0.9％的生理盐水。s3.称取0.5g活性炭和0.1g硅藻土，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，4000rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀a；s4.向步骤s3中的混合沉淀a中加入步骤s1的上清液i，混匀离心，取上清液ii；s5.称取0.5g活性炭和0.1g硅藻土，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，4000rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀b；s6.向步骤s5中的混合沉淀b中加入步骤s3的上清液ii，震荡混匀，室温摇床3个小时，4000rpm离心，30分钟，留取上清液iii，使用0.45μm滤膜过滤上清液iii得基质血清。实施例2、一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法，包括以下步骤：s1.称取100g硫酸铵粉末，加入至100ml阴性血浆中，边搅拌边缓慢向溶液中加入，静置30min，5000rpm离心，20～30分钟，留取上清液i；s2.称取0.9g氯化钠，溶解在40ml灭菌纯水中，最后定容到100ml，形成浓度为0.9％的生理盐水。s3.称取0.5g活性炭和0.2g硅藻土，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，4500rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀a；s4.向步骤s3中的混合沉淀a中加入步骤s1的上清液i，混匀离心，取上清液ii；s5.称取0.5g活性炭和0.2g硅藻土，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，4500rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀b；s6.向步骤s5中的混合沉淀b中加入步骤s3的上清液ii，震荡混匀，室温摇床3个小时，4000rpm离心，30分钟，留取上清液iii，使用0.45μm滤膜过滤上清液iii得基质血清。实施例3、一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法，包括以下步骤：s1.称取50g硫酸铵粉末，加入至100ml阴性血浆中，边搅拌边缓慢向溶液中加入，静置30min，4500rpm离心，20～30分钟，留取上清液i；s2.称取0.9g氯化钠，溶解在40ml灭菌纯水中，最后定容到100ml，形成浓度为0.9％的生理盐水。s3.称取0.8g活性炭和0.1g硅藻土，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，4000rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀a；s4.向步骤s3中的混合沉淀a中加入步骤s1的上清液i，混匀离心，取上清液ii；s5.称取0.8g活性炭和0.1g硅藻土，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，4000rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀b；s6.向步骤s5中的混合沉淀b中加入步骤s3的上清液ii，震荡混匀，室温摇床3个小时，4000rpm离心，30分钟，留取上清液iii，使用0.45μm滤膜过滤上清液iii得基质血清。实施例4、一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法，包括以下步骤：s1.称取100g硫酸铵粉末，加入至100ml阴性血浆中，边搅拌边缓慢向溶液中加入，静置30min，4500rpm离心，20～30分钟，留取上清液i；s2.称取0.9g氯化钠，溶解在40ml灭菌纯水中，最后定容到100ml，形成浓度为0.9％的生理盐水。s3.称取0.8g活性炭和0.2g硅藻土，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，5000rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀a；s4.向步骤s3中的混合沉淀a中加入步骤s1的上清液i，混匀离心，取上清液ii；s5.称取0.8g活性炭和0.2g硅藻土，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，5000rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀b；s6.向步骤s5中的混合沉淀b中加入步骤s3的上清液ii，震荡混匀，室温摇床3个小时，4500rpm离心，30分钟，留取上清液iii，使用0.45μm滤膜过滤上清液iii得基质血清。实施例5、一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法，包括以下步骤：s1.称取38.4g硫酸铵粉末，加入至100ml阴性血清中，边搅拌边缓慢向溶液中加入，静置30min，4000rpm离心，20～30分钟，留取上清液i；s2.称取0.9g氯化钠，溶解在40ml灭菌纯水中，最后定容到100ml，形成浓度为0.9％的生理盐水。s3.称取0.5g活性炭和0.1g右旋糖酐，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，4000rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀a；s4.向步骤s3中的混合沉淀a中加入步骤s1的上清液i，混匀离心，取上清液ii；s5.称取0.5g活性炭和0.1g右旋糖酐，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，4000rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀b；s6.向步骤s5中的混合沉淀b中加入步骤s3的上清液ii，震荡混匀，室温摇床3个小时，4000rpm离心，30分钟，留取上清液iii，使用0.45μm滤膜过滤上清液iii得基质血清。实施例6、一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法，包括以下步骤：s1.称取50g硫酸铵粉末，加入至100ml阴性血清中，边搅拌边缓慢向溶液中加入，静置30min，4000rpm离心，20～30分钟，留取上清液i；s2.称取0.9g氯化钠，溶解在40ml灭菌纯水中，最后定容到100ml，形成浓度为0.9％的生理盐水。s3.称取0.5g活性炭和0.2g右旋糖酐，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，4000rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀a；s4.向步骤s3中的混合沉淀a中加入步骤s1的上清液i，混匀离心，取上清液ii；s5.称取0.5g活性炭和0.2g右旋糖酐，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，4000rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀b；s6.向步骤s5中的混合沉淀b中加入步骤s3的上清液ii，震荡混匀，室温摇床3个小时，4000rpm离心，30分钟，留取上清液iii，使用0.45μm滤膜过滤上清液iii得基质血清。实施例7、一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法，包括以下步骤：s1.称取100g硫酸铵粉末，加入至100ml阴性血清中，边搅拌边缓慢向溶液中加入，静置30min，5000rpm离心，20～30分钟，留取上清液i；s2.称取0.9g氯化钠，溶解在40ml灭菌纯水中，最后定容到100ml，形成浓度为0.9％的生理盐水。s3.称取0.8g活性炭和0.1g右旋糖酐，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，4500rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀a；s4.向步骤s3中的混合沉淀a中加入步骤s1的上清液i，混匀离心，取上清液ii；s5.称取0.8g活性炭和0.1g右旋糖酐，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，4500rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀b；s6.向步骤s5中的混合沉淀b中加入步骤s3的上清液ii，震荡混匀，室温摇床3个小时，4500rpm离心，30分钟，留取上清液iii，使用0.45μm滤膜过滤上清液iii得基质血清。实施例8、一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法，包括以下步骤：s1.称取50g硫酸铵粉末，加入至100ml阴性血清中，边搅拌边缓慢向溶液中加入，静置30min，4500rpm离心，20～30分钟，留取上清液i；s2.称取0.9g氯化钠，溶解在40ml灭菌纯水中，最后定容到100ml，形成浓度为0.9％的生理盐水。s3.称取0.8g活性炭和0.2g右旋糖酐，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，5000rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀a；s4.向步骤s3中的混合沉淀a中加入步骤s1的上清液i，混匀离心，取上清液ii；s5.称取0.8g活性炭和0.2g右旋糖酐，加入20ml步骤s2中制备的生理盐水震荡混匀，室温摇床30分钟，5000rpm离心，20～30分钟，弃上清，留下管底的混合沉淀b；s6.向步骤s5中的混合沉淀b中加入步骤s3的上清液ii，震荡混匀，室温摇床3个小时，4500rpm离心，30分钟，留取上清液iii，使用0.45μm滤膜过滤上清液iii得基质血清。试验例一、对人阴性血浆和人阴性血清处理前后蛋白和脂类的测定采用实施例1和实施例5的方法对人阴性血浆和人阴性血清进行处理，使用spss19.0卡方检验对检测结果进行统计学分析，结果见表1和表2。表1处理前后血浆/血清的蛋白测定值(n＝5)表2处理前后血浆/血清的脂类测定值(n＝5)结果显示：采用本发明的方法可以有效地去除血浆、血清中绝大部分的蛋白和脂类物质，排除基质效应对临床检测结果的影响，提高了基质血清的稳定性。试验例二、采用本发明基质血清制备hcvrna质控物的基质效应与互换性评估实验1、实验材料(1)25份不同类型新鲜临床病人样本：选浓度值涵盖制备样品的高、中、低浓度范围、无已知稳定剂与防腐剂干扰物的样本；(2)待测制备物：实施例5处理后的阴性血清、处理后的小牛血清和实施例1处理后的阴性血浆制备的hcvrna质控物s1、s2、s3；(3)比对试剂盒：rochecobasampliprep/cobastaqmanhcvtest,version2.0；(4)评估试剂盒：中山大学达安基因股份有限公司丙型肝炎病毒核酸检测试剂盒(pcr-荧光探针法)2、实验方法将待测制备物和25份新鲜临床病人样本按相应的试剂盒说明书进行操作，同时用roche、达安三种检测系统测量25份临床样本和待测制备物，重复测定3次，进行标准pcr扩增检测。3、实验结果(均值对数值，log)表3结果：评估试剂盒检测待测制备物s1、s2和s3的均值均在临床新鲜血清样本95％的可信区间内，说明待测制备物s1、s2和s3对评估试剂盒无基质效应，表明该物质在比对试剂盒和评估试剂盒间具有互换性。试验例三、采用本发明基质血清制备hcvrna质控物(液态)稳定性实验1、仪器、试剂和样品主要仪器：abi7500pcr检测仪；主要试剂：中山大学达安基因股份有限公司的丙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒(pcr-荧光定量法)；样品：处理后的基质血清制备的hcvrna质控物(液态)s1、s2、s3；2、检验方法在特定贮存条件下标准物质的稳定性状况。抽取合适量的标准物质样品，做好标记，分别放入指定环境中，按指定周期进行检验，每次抽取5管标准物质，计算均值。实验计划具体见表4。采用spss19.0统计软件对检测结果进行分析。表4实验计划表3、实验结果，见表5-16。表5hcv质控物s1稳定性实验结果【-80℃，对照组，iu/ml】表6hcv质控物s1稳定性实验结果【(-20±5)℃，iu/ml】表7hcv质控物s1稳定性实验结果【(2～8)℃，iu/ml】表8hcv质控物s1稳定性实验结果【(20～25)℃，iu/ml】表9hcv质控物s2稳定性实验结果【-80℃，对照组，iu/ml】表10hcv质控物s2稳定性实验结果【(-20±5)℃，iu/ml】表11hcv质控物s2稳定性实验结果【(2～8)℃，iu/ml】表12hcv质控物s2稳定性实验结果【(20～25)℃，iu/ml】表13hcv质控物s3稳定性实验结果【-80℃，对照组，iu/ml】表14hcv质控物s3稳定性实验结果【(-20±5)℃，iu/ml】表15hcv质控物s3稳定性实验结果【(2～8)℃，iu/ml】表16hcv质控物s3稳定性实验结果【(20～25)℃，iu/ml】4、实验结论血浆中的hcvrna易被rnase降解，还有血浆中的蛋白、脂类成分都会影响rna的稳定性；由实验结果表明，本发明基质血清稀释的hcv质控物在(-20±5)℃、(2～8)℃和(20～25)℃环境存放，与-80℃环境存放的hcv质控物进行t检验统计分析，其中p值均大于0.05，因此可认为基质血清稀释的hcv质控物在(-20±5)℃环境中可稳定14个月，在(2～8)℃环境中可稳定2个月，在(20～25)℃环境中可稳定6天，稳定性符合要求，能满足实际测量需要。其余实施例制备的基质血清稀释的hcv质控物的稳定性与实施例1及实施例5制备的基质血清效果相近。实施例四、不同基质血清稀释液对elisa法检测hbsag的结果准确性实验酶联免疫吸附试验(elisa)作为最常用的感染性疾病血清学标志物免疫测定方法之一，目前被普遍应用于我国采供血机构对无偿献血者的血液筛查。临床样本中的脂质、胆红素、血红蛋白及血液黏度等因素，均能对elisa测定结果有干扰作用。如血脂样本的黏度大，与亲脂成分结合，产生“屏蔽”作用，又因脂质可以置换细胞内的水，对标本有一定的稀释作用，对检测结果影响较大。还有血红蛋白内具有类辣根过氧化物酶物质，与显色剂能呈色反应。而hbsag的检测线性范围较窄，患者血清hbsag含量常超出试剂盒的检测范围，需稀释后再测定，以获得准确可靠的结果。因此，稀释液的选用直接影响结果的准确性和可靠性。选取perkinelmer公司半自动victor31420荧光检测仪以及浓度为1000iu/mlhbsag阳性血清(其中hbsab、抗-hiv、抗-hcv、抗-tp均为阴性)，采用上海科华生物工程股份有限公司的乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒，分别对阴性血清和实施例5制备的基质血清稀释的hbsag阳性血清进行检测，按2000倍，3000倍、4000倍、5000倍、6000倍、7000倍梯度稀释，每个样本检测10次。对不同稀释液相同浓度的hbsag阳性样本±的s/co值，进行t检验分析。表17两组s/co值的检测结果由表17结果可知，在浓度相同的情况下，本发明的基质血清稀释的hbsag阳性血清的s/co值均比阴性血清稀释的s/co值要高，两者差异有统计学意义(p<0.05)。而且阴性血清稀释的hbsag阳性血清的检测结果标准差均大于基质血清稀释的检测结果，提示阴性血清除了对hbsag阳性血清有稀释作用外，其成分可能对elisa反应环境有影响。其余实施例制备的基质血清稀释的hbsag阳性血清的s/co值与实施例5制备的基质血清效果相近。实施例五、采用本发明基质血清制备hbsag质控物(液态)的稳定性实验1、仪器、试剂和样品主要仪器：perkinelmer公司半自动victor31420荧光检测仪；主要试剂：珠海丽珠试剂股份有限公司的乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒(酶联免疫法)；样品：处理后的实施例5基质血清制备的hbsag质控物(液态)；2、检验方法在特定贮存条件下质控物的稳定性状况。抽取合适量的质控物样品，做好标记，分别放入指定环境中，按指定周期进行检验，每次抽取5管质控物，计算均值。实验计划具体见表18。采用spss19.0统计软件对检测结果进行分析。表18实验计划表3、实验结果，见表19-22。表19hbsag质控物稳定性实验结果【-80℃，对照组，iu/ml】表20hbsag质控物稳定性实验结果【-20±5℃，iu/ml】表21hbsag质控物稳定性实验结果【2～8℃，iu/ml】表22hbsag质控物稳定性实验结果【20～25℃，iu/ml】4、实验结论实验结果表明，由基质血清稀释的hbsag质控物在(-20±5)℃、(2～8)℃和(20～25)℃环境存放，与-80℃环境存放的hbsag质控物进行t检验统计分析，其中p值均大于0.05，因此可认为基质血清稀释的hbsag质控物在(-20±5)℃环境中可稳定14个月，在(2～8)℃环境中可稳定4个月，在(20～25)℃环境中可稳定15天，稳定性符合要求，能满足实际测量需要。其余实施例制备的基质血清稀释的hbsag质控物的稳定性与实施例5制备的基质血清效果相似。实施例六、本发明基质血清稀释β-hcg的测定实验β-hcg值常常浓度较高，超出检测范围，需要对样本进行多次稀释。2016年，杨昌伟等报道，使用生理盐水和去离子水稀释病人样本，存在基质效应而导致β-hcg的检测结果与理论值差异较大。选取新鲜高值血清(8255miu/ml)，分别采用实施例5的基质血清，阴性血清(未经处理)、生理盐水、去离子水对样本进行20倍、50倍稀释，稀释后样本重复检测3次，采用电化学发光法进行检测，使用统计软件spss19.0对结果进行分析。表23高值新鲜样本经不同稀释液稀释后的检测结果(miu/ml)表24卡方检验a.0单元格(0.0％)的期望计数少于5.。最小期望计数为54.90。由表23可知，分别将稀释20倍和50倍检测结果与理论值进行比较，基质血清稀释后的检测结果偏倚均为最小。由表24可知，有0个格子的期望频数小于5，最小期望频数为54.90，n＝2439>40，x2＝588.842，自由度df＝4，p<0.001，差异有统计学意义，故可认为四种不同的稀释液稀释的效果不全相等。其余实施例制备的基质血清稀释β-hcg的检测结果与实施例5制备的基质血清效果相似。实施例七、本发明基质血清制备ca125质控物(冻干粉)的稳定性实验1、仪器、试剂和样品主要仪器：西门子centaur；主要试剂：西门子配套试剂；样品：处理后的实施例5的基质血清制备的ca125质控物(冻干粉)；2、检验方法在特定贮存条件下质控物的稳定性状况。抽取合适量的质控物样品，做好标记，分别放入指定环境中，按指定周期进行检验，每次抽取5管质控物，计算均值。实验计划具体见表25。采用spss19.0统计软件对检测结果进行分析。表25实验计划表3.实验结果，见表26-29所示。表26ca125质控物稳定性实验结果【-80℃，对照组，u/ml】表27ca125质控物稳定性实验结果【-20±5℃，u/ml】表28ca125质控物稳定性实验结果【2～8℃，u/ml】表29ca125质控物稳定性实验结果【20～25℃，u/ml】4、实验结论实验结果表明，由基质血清配制的ca125质控物在(-20±5)℃、(2～8)℃和(20～25)℃环境存放，与-80℃环境存放的ca125质控物进行t检验统计分析，其中p值均大于0.05，因此可认为基质血清稀释的ca125质控物在(-20±5)℃环境中可稳定14个月，在(2～8)℃环境中可稳定4个月，在(20～25)℃环境中可稳定15天，稳定性符合要求，能满足实际测量需要。其余实施例制备的基质血清配制的ca125质控物的稳定性与实施例5制备的基质血清效果相似。实施例八、对比试验对比例1：未采用本发明方法处理的阴性血浆；对比例2：未采用本发明方法处理的的阴性血清；对比例3：市购的小牛血清；将本发明的基质血清与以上对比例1～3分别对hcv血清阳性样本(浓度值为2.5×105iu/ml)进行倍比稀释，并将稀释10倍的样本分别放置-80℃(对照)和25℃，每天检测1次。检测结果如下：表30倍比稀释的检测结果稀释倍数理论浓度对比例1对比例2对比例3实施例5原倍2.5×1052.84×1052.26×1052.41×1052.47×105102.5×1048.69×1031.02×1042.68×1042.36×1041002.5×1032.35×1022.64×1033.77×1032.61×10310002.5×102阴性1.93×1023.03×1022.33×102表31稀释10倍样本的稳定性实验结果由表30可知，本发明的基质血清用于稀释hcv阳性血清样本的检测结果较好，与理论值浓度相差最小；由表31可知，本发明稀释的hcv样本，放置25℃环境能稳定保存5天，而对比例1～3均出现核酸降解的情况，甚至是检测不出。因此本发明用于稀释hcv血清样本，具有稀释效果好，稳定性好的优点。最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。当前第1页12