一种液相芯片分析仪的质控检测方法及标准盘与流程

本申请涉及芯片技术领域，具体而言，涉及一种液相芯片分析仪的质控检测方法及标准盘。

背景技术：

液相芯片分析仪是集合荧光编码微球、激光检测、流式细胞技术、数据分析于一体的高通量生物芯片检测装置，可同时检测多达100甚至500种不同的蛋白质、多肽、dna或rna等目标分析物。

因液相芯片分析仪在数据上有很好的重现性，现被广泛应用于免疫学和各种疾病研究，如心血管疾病、肿瘤特异性标志物biomarker筛选、药物治疗靶标开发、药物治疗效果评估，疾病相关的血管生成、转移、细胞增殖、凋亡、炎症、信号转导，细胞治疗的细胞因子释放综合症的监测研究等。

使用液相芯片分析仪需要进行定期质控检测，质控检测主要用于检查光学系统、鞘液系统和分析处理系统，以确保液相芯片分析仪的性能在可接受范围内，核实整个系统运行结果的有效性。

现有的质控检测方法普遍是单纯地检测分析仪中各系统是否能顺利运行，在分析仪长期使用下或保存不当容易产生污染，会导致测试结果的荧光值显示位置不当甚至失真，仅检测各系统运行情况难以保证检测结果的精度。

针对上述问题，目前尚未有有效的技术解决方案。

技术实现要素：

本申请的目的在于提供一种液相芯片分析仪的质控检测方法及标准盘，绘制标准曲线并校正荧光值显示位置，确保实验结果的准确性，确保测试结果的有效性，避免实验结果失真。

第一方面，本申请提供了一种液相芯片分析仪的质控检测方法，用于液相芯片分析仪的质控检测，所述方法包括以下步骤：

s1、确认鞘液瓶充满鞘液，将盛有标准试剂的标准盘置入分析仪中；

s2、调整并判断标准盘与分析仪是否对齐；

s3、判断分析仪的鞘液系统和清洗系统是否正常；

s4、测取并分析标准试剂的荧光值，判断激光器是否正常工作；

s5、根据标准试剂的荧光值，绘制标准曲线；

s6、根据标准试剂的荧光值进行分析仪信号位置定位校准。

本申请的一种液相芯片分析仪的质控检测方法，通过测取并分析标准试剂的荧光值，利用荧光值判断激光器运行情况、绘制标准曲线、进行信号位置定位校准，有效确保荧光值信号检测准确，使得分析仪实际使用时能在有效范围、适当位置显示待检测样品的检测结果，确保实验结果的准确性。

所述的一种液相芯片分析仪的质控检测方法，其中，所述标准试剂包括不同染料标记的微球试剂和同一种染料且不同浓度标记的微球试剂。

所述的一种液相芯片分析仪的质控检测方法，其中，步骤s6中，通过不同染料标记的微球试剂的荧光值进行分析仪显示信号位置的定位以校准检测通道。

所述的一种液相芯片分析仪的质控检测方法，其中，通过4种不同染料标记的微球试剂的荧光值进行四角显示位置定位、分型。

所述的一种液相芯片分析仪的质控检测方法，其中，步骤s5中，通过测取若干同一种染料且不同浓度标记的微球试剂的荧光值以绘制标准曲线。

所述的一种液相芯片分析仪的质控检测方法，其中，同一种染料且不同浓度标记的微球试剂为梯度配置。

所述的一种液相芯片分析仪的质控检测方法，其中，同一种染料且不同浓度标记的微球试剂至少为5个，包含用于检测分析仪微球浓度的上限和下限的标准试剂。

所述的一种液相芯片分析仪的质控检测方法，其中，所述标准盘中置有用于步骤s3中判断分析仪的鞘液系统和清洗系统是否正常的去离子水和/或次氯酸钠溶液。

所述的一种液相芯片分析仪的质控检测方法，其中，步骤s2通过判断标准盘的检测标准孔是否与分析仪的检测通道对齐以调整并判断标准盘与分析仪是否对齐。

第二方面，本申请还提供了一种液相芯片分析仪的标准盘，用于所述的一种液相芯片分析仪的质控检测方法中进行检测，包括盘体；

所述盘体上设有：

校准区，用于调整并判断标准盘与分析仪是否对齐；

通道检测区，用于判断分析仪的鞘液系统和清洗系统是否正常；

激光检测区，用于校准每个激光器检测的信号值；

检测范围区，用于检测荧光值信号的范围；

定位校准区，用于信号位置定位校准；

所述校准区、激光检测区、检测范围区、定位校准区上均设有用于放置标准试剂的标准孔，所述通道检测区设有用于置入去离子水和/或次氯酸钠溶液的标准槽。

本申请提供的一种液相芯片分析仪的标准盘，该标准盘用于液相芯片分析仪质控检测，在对应标准孔置入标准试剂和在标准槽置入去离子水和/或次氯酸钠溶液后置入分析仪中，利用分析仪的激光、分析功能，配合盘体上校准区、通道检测区、激光检测区、检测范围区、定位校准区分别进行校准检测、鞘液系统和清洗系统检测、激光器检测、标准曲线绘制、信号位置定位校准，有效确保荧光值信号检测准确，使得分析仪实际使用时能在有效范围、适当位置显示待检测样品的检测结果，确保实验结果的准确性，可有效核实整个分析仪运行结果的有效性，避免实验结果失真。

由上可知，本申请提供的一种液相芯片分析仪的质控检测方法及标准盘，其中，质控检测方法通过测取并分析标准试剂的荧光值，利用荧光值判断标准盘位置是否插入到位、激光器运行情况、绘制标准曲线、进行信号位置定位校准，有效确保荧光值信号检测准确，使得分析仪实际使用时能在有效范围、适当位置显示待检测样品的检测结果，确保实验结果的准确性，可有效核实整个分析仪运行结果的有效性，避免实验结果失真。

附图说明

图1为本申请实施例提供的一种液相芯片分析仪的质控检测方法的流程图。

图2为本申请实施例提供的一种液相芯片分析仪的标准盘的结构示意图。

附图标记：1、盘体；2、校准区；3、通道检测区；4、激光检测区；5、检测范围区；6、定位校准区。

具体实施方式

下面将结合本申请实施例中附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。通常在此处附图中描述和示出的本申请实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。因此，以下对在附图中提供的本申请的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本申请的范围，而是仅仅表示本申请的选定实施例。基于本申请的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。

应注意到：相似的标号和字母在下面的附图中表示类似项，因此，一旦某一项在一个附图中被定义，则在随后的附图中不需要对其进行进一步定义和解释。同时，在本申请的描述中，术语“第一”、“第二”等仅用于区分描述，而不能理解为指示或暗示相对重要性。

第一方面，请参照图1，图1是本申请一些实施例中的一种液相芯片分析仪的质控检测方法，用于液相芯片分析仪的质控检测，方法包括以下步骤：

s1、确认鞘液瓶充满鞘液，将盛有标准试剂的标准盘置入分析仪中；

具体地，确保鞘液瓶充满鞘液有利于鞘液系统和清洗系统工作的检测；标准盘上的标准试剂按待检测样品进行配制，确保质控检测后的分析仪能准确分析出检测样品的实验数据。

具体地，盛有标准试剂的标准盘可直接推入分析仪的检测口使用。

s2、调整并判断标准盘与分析仪是否对齐；

具体地，通过分析仪的校准部位与标准盘的校准部位判断两者位置是否完全对准，以确保后续检测能顺利进行；当两者不对齐时，调整标准盘位置直至两者对齐后再执行下一步骤。

s3、判断分析仪的鞘液系统和清洗系统是否正常；

具体地，标准盘盛有清洗液，日常检测和系统检测都需要用到，分析仪利用标准盘上清洗液运行鞘液系统和清洗系统，以判断鞘液系统和清洗系是否能顺利进行，并通过分析仪的显示设备反映两个系统的运行情况。

s4、测取并分析标准试剂的荧光值，判断激光器是否正常工作；

具体地，利用分析仪的激光器激发标准试剂产生不同波长的荧光值信号，根据测取的不同通道的激光器所激发的荧光值信号，判断不同检测通道上的激光器是否能产生出荧光值信号以判断激光器是否正常工作，并通过分析仪的显示设备反映激光器的运行情况。

s5、根据标准试剂的荧光值，绘制标准曲线；

具体地，步骤s4中根据不同的激光器测取了多个标准试剂的荧光值，利用这些标准试剂的荧光值，可绘制标准曲线，该标准曲线可报告对应基因不同荧光值信号范围。

s6、根据标准试剂的荧光值进行分析仪信号位置定位校准。

具体地，分析仪根据标准试剂的荧光值波长在显示设备上对应位置进行显示，当显示设备上对应标准试剂的荧光值信号显示位置出现偏差时，根据其正常状态下的显示位置对分析仪显示设备显示信息进行位置定位校准，使标准试剂的荧光值信号显示位置到位，确保正式实验检测时能精确显示待检测样品荧光值信号，特别是对定性验证多重检测时，可以保证实验结果的准确性。

本申请实施例的一种液相芯片分析仪的质控检测方法，通过测取并分析标准试剂的荧光值，利用荧光值判断激光器运行情况、绘制标准曲线、进行信号位置定位校准，有效确保荧光值信号检测准确，使得分析仪实际使用时能在有效范围、适当位置显示待检测样品的检测结果，确保实验结果的准确性。

在一些优选的实施方式中，检测开始前需将鞘液注入鞘液瓶以使鞘液瓶充满鞘液，还需配置需求的标准试剂，并按照预设预定位置放置于标准盘上，其后启动并预热分析仪，再开始执行步骤s1。

在一些优选的实施方式中，标准试剂包括不同染料标记的微球试剂和同一种染料且不同浓度标记的微球试剂。

具体地，标注试剂是在分析化学中使用的具有已知含量(有的是指纯度)或特性值的一类化学试剂，可作为分析测定度量的标准。具体地，荧光编码指染料标记，即同一荧光编码的微球试剂即为含有同一种染料标记的微球试剂，可根据激光器类型选择合适的染料标记。

其中，不同染料标记的微球试剂包括若干用于步骤s2中判断标准盘和分析仪是否对齐的第一微球试剂和若干用于步骤s6中进行分析仪信号位置定位的第五微球试剂。

其中，同一种染料且不同浓度标记的微球试剂包括用于步骤s4中判断激光器是否正常工作的第三微球试剂和用于步骤s5中绘制标准曲线的第四微球试剂。

其中，不同染料标记的微球试剂可选类型一般为20种。

在一些优选的实施方式中，步骤s6中，通过不同染料标记的微球试剂的荧光值进行分析仪显示信号位置的定位以校准检测通道。

具体地，步骤s6中通过第五微球试剂的荧光值信号显示进行显示定位校准。

在一些优选的实施方式中，通过3种以上不同染料标记的微球试剂的荧光值进行三角以上显示位置定位、分型。

在一些优选的实施方式中，通过4种不同染料标记的微球试剂的荧光值进行四角显示位置定位、分型。

具体地，设置4种第五微球试剂，使得在激光器作用下分析器获得4种不同染料标记的微球试剂的荧光值，该4种第五微球试剂的荧光值恰好对应分析仪显示位置的四个角点，因此，可用于校验检测通道；当分析仪上关于四个角点显示位置出现偏移时即表明光学系统产生偏移，因此利用该角点进行定位、分型校正，可确保检测结果在显示范围内，提高检测结果的可信度，确保液相芯片分析仪的性能在可接受范围内。

在一些优选的实施方式中，步骤s5中，通过测取若干同一种染料且不同浓度标记的微球试剂的荧光值以绘制标准曲线。

具体地，设置多个第四微球试剂，以第四微球试剂的荧光值数据进行标准曲线绘制。

具体地，绘制的标准曲线可作为后续测试待检测样品时的参考曲线，以校验计算测试结果；另外，标准曲线在质控检测过程中，可根据比对标准曲线的已知变化趋势判断荧光值的获取精度。

在一些优选的实施方式中，同一种染料且不同浓度标记的微球试剂为梯度配置。

具体地，第四微球试剂采用梯度配置，使得邻近的荧光值数据对应试剂之间浓度差为定值，利于标准曲线的绘制，也能更准确、清晰地反映标准曲线的变化趋势。

在一些优选的实施方式中，同一种染料且不同浓度标记的微球试剂至少为5个，包含用于检测分析仪微球浓度的上限和下限的标准试剂。

具体地，梯度配置的第四微球试剂中，包含了分析仪检测上限和下限对应浓度的试剂，使得绘制而成的标准曲线检测范围的上下限端点，即限定了检测报告基因不同荧光值信号的范围，利于后续进行实际测试时对数据进行分析、校验。

在一些优选的实施方式中，标准盘中置有用于步骤s3中判断分析仪的鞘液系统和清洗系统是否正常的去离子水和/或次氯酸钠溶液。

具体地，质控检测过程中分析仪利用标准盘中去离子水和/或次氯酸钠溶液进行鞘液系统和清洗系统的测试，先利用清洗液配合鞘液系统判断鞘液能否将对象稳定在中心位置，然后再利用清洗液配合清洗系统判断是否能完成测试区域的清洗。

其中，次氯酸钠溶液的质量分数为0.5-10%。

在一些优选的实施方式中，步骤s2通过判断标准盘的检测标准孔是否与分析仪的检测通道对齐以调整并判断标准盘与分析仪是否对齐。

具体地，标准孔中置有第一微球试剂，第一微球试剂在激光器作用下会显示荧光值信号，分析仪会根据输入的第一微球试剂中荧光值信号自动对其位置和检测通道进行比对，判断标准孔位置是否正对检测通道。

在一些优选的实施方式中，当分析仪在短时间内再次使用且未进行搬动的情况下，仅通过步骤s1-s3即可完成质控检测，标准曲线可重复利用。

本申请实施例的一种液相芯片分析仪的质控检测方法，通过测取并分析标准试剂的荧光值，利用荧光值判断标准盘位置是否插入到位、激光器运行情况、绘制标准曲线、进行信号位置定位校准，有效确保荧光值信号检测准确，使得分析仪实际使用时能在有效范围、适当位置显示待检测样品的检测结果，确保实验结果的准确性，可有效核实整个分析仪运行结果的有效性，避免实验结果失真。

第二方面，请参照图2，图2是本申请一些实施例中提供的一种液相芯片分析仪的标准盘，用于前述的一种液相芯片分析仪的质控检测方法中进行检测，包括盘体1；

盘体1上设有：

校准区2，用于调整并判断标准盘与分析仪是否对齐；

通道检测区3，用于判断分析仪的鞘液系统和清洗系统是否正常；

激光检测区4，用于校准每个激光器检测的信号值，具体为校准不同染料编码微球的信号值；

检测范围区5，用于检测荧光值信号的范围，具体为检测同一种染料不同浓度标记的微球荧光值信号的范围；

定位校准区6，用于信号位置定位校准；

校准区2、激光检测区4、检测范围区5、定位校准区6上均设有用于放置标准试剂的标准孔，通道检测区3设有用于置入去离子水和/或次氯酸钠溶液的标准槽。

本申请实施例提供的一种液相芯片分析仪的标准盘，该标准盘用于液相芯片分析仪质控检测，在对应标准孔置入标准试剂和在标准槽置入去离子水和/或次氯酸钠溶液后置入分析仪中，利用分析仪的激光、分析功能，配合盘体1上校准区2、通道检测区3、激光检测区4、检测范围区5、定位校准区6分别进行校准检测、鞘液系统和清洗系统检测、激光器检测、标准曲线绘制、信号位置定位校准，有效确保荧光值信号检测准确，使得分析仪实际使用时能在有效范围、适当位置显示待检测样品的检测结果，确保实验结果的准确性，可有效核实整个分析仪运行结果的有效性，避免实验结果失真。

在一些优选的实施方式中，校准区2中设置有2个以上的标准孔，优选为6个，该标准孔中置有第一微球试剂。

在一些优选的实施方式中，通道检测区3设置有2个以上的标准槽，优选为3个，该标准槽中置有如离子水或次氯酸钠溶液的清洗液。

在一些优选的实施方式中，激光检测区4设置有2个以上的标准孔，优选为6个，该标准孔中置有第三微球试剂。

在一些优选的实施方式中，检测范围区5设置有5个以上的标准孔，优选为6个，该标准孔中置有第四微球试剂。

在一些优选的实施方式中，定位校准区6设置有4个以上的标准孔，优选为6个，该标准孔中置有第五微球试剂。

在一些优选的实施方式中，标准孔为镂空孔，可置入含有微球试剂的pcr管，使得本申请实施例的标准盘适用范围更广，且配置低成本的pcr管也有利于推广。

在一些优选的实施方式中，盘体1一角端具有对位角，该对为角可为平角、圆角、异形角等形状，在本实施例中，优选为平角；设置对为角可防止实验误操作反放标准盘。

在一些优选的实施方式中，盘体1大小与96孔板一致，因此适用于市面上大部分的液相芯片分析仪，具有适用范围广的特点。

实施例1

配置质控检测用的以pcr管作为容器的标准试剂，每种标准试剂至少为100μl，并置入盘体1上标准孔中。

其中，校准区2的2个标准孔上分别置入两种不同染料标记的第一微球试剂，分别编号为110和120；

激光检测区4的2个标准孔分别置入与校准区2内一致的两种不同染料标记的第三微球试剂，同样分别编号为110和120；

检测范围区5的5个标准孔分别置入5个梯度浓度配置的相同染料第四微球试剂，分别编号为111、112、113、114、115。

定位校准区6的4个标准孔分别置入4种不同染料标记的第五微球试剂，分别编号为201、202、203、204、205。

通道检测区3的2个标准槽分别置入去离子水和次氯酸钠溶液，每种清洗液为2ml以上。

确认鞘流液瓶的鞘流液已经充满，启动分析仪，打开分析仪中检测软件后，按指示操作进行预热；将盛有清洗液和标准试剂的标准盘放入指定位置并推入分析仪中进行分析。

检测结果分析：

分析仪会显示校准区2第一微球试剂的荧光信号的数值和显示编码微球在软件界面上位置，液相芯片分析仪会根据输入的编号自动对其进行比对，判断标准盘与分析仪是否对齐。

分析仪利用通道检测区3上溶液对鞘液系统和清洗系统运行调试，当测试正常完成即表明鞘液系统和清洗系统正常。

分析仪利用不同通道上的激光器激发激光检测区4上的对应位置的第三微球试剂产生并报告不同的荧光信号的数值，分析仪可根据该数值判断激光器是否正常工作。

分析仪根据检测范围区5输入的标准试剂编号选择相应的激光器进行激发，并显示每个第四微球试剂的荧光值，并以荧光值和对应第四微球试剂的浓度绘制标准曲线。

分析仪根据定位校准区6输入的标准试剂编号进行校准，定位校准区6中的4个第五微球试剂的荧光值对应在分析仪上显示为四个角点，当分析仪上四个角点显示位置出现偏移时即表明光学系统产生偏移，基于四个角点的显示进行分析仪显示仪器调节使4个角点调节到预设位置，使输入编号的微球与液相芯片分析仪内置参数保持一致，出现在既定位置，校准后可确保检测精度，特别是对定性验证多重检测时，该校准过程可以保证实验结果的准确性。

综上，本申请实施例提供的一种液相芯片分析仪的质控检测方法及标准盘，其中，质控检测方法通过测取并分析标准试剂的荧光值，利用荧光值判断标准盘位置是否插入到位、激光器运行情况、绘制标准曲线、进行信号位置定位校准，有效确保荧光值信号检测准确，使得分析仪实际使用时能在有效范围、适当位置显示待检测样品的检测结果，确保实验结果的准确性，可有效核实整个分析仪运行结果的有效性，避免实验结果失真。

在本申请所提供的实施例中，应该理解到，所揭露装置和方法，可以通过其它的方式实现。以上所描述的装置实施例仅仅是示意性的，例如，所述单元的划分，仅仅为一种逻辑功能划分，实际实现时可以有另外的划分方式，又例如，多个单元或组件可以结合或者可以集成到另一个系统，或一些特征可以忽略，或不执行。另一点，所显示或讨论的相互之间的耦合或直接耦合或通信连接可以是通过一些通信接口，装置或单元的间接耦合或通信连接，可以是电性，机械或其它的形式。

另外，作为分离部件说明的单元可以是或者也可以不是物理上分开的，作为单元显示的部件可以是或者也可以不是物理单元，即可以位于一个地方，或者也可以分布到多个网络单元上。可以根据实际的需要选择其中的部分或者全部单元来实现本实施例方案的目的。

再者，在本申请各个实施例中的各功能模块可以集成在一起形成一个独立的部分，也可以是各个模块单独存在，也可以两个或两个以上模块集成形成一个独立的部分。

在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。

以上所述仅为本申请的实施例而已，并不用于限制本申请的保护范围，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。