一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法与流程

1.本发明属于中医药检测技术领域，更具体地，涉及一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法。


背景技术：

2.人参归脾丸由宋朝《济生方》的归脾丸加减方而来，处方由人参、黄芪、当归、龙眼肉、酸枣仁等十味药组成。具有益气补血、健脾养心的功效。人参味甘、微苦，性温、平。归脾、肺经、心经。补气，固脱，生津，安神，益智；主要化学成分有皂苷类、 黄酮类、挥发油类等。据中国药典中显示，人参和西洋参均含有人参皂苷 rg1、re和 rb1，人参含有特征性成分人参皂苷 rf，而西洋参含有的特征性成分为拟人参皂苷 f
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。为严格控制本品质量，有必要对处方中人参质量进行控制。
3.现有标准中缺乏专门针对人参归脾丸中人参掺伪成分（西洋参）的检测方法，其他制剂的人参掺伪检测方法不够合理，适用性窄，对样品的前处理不够完善，影响最终检测的准确性和稳定性，不便于推广使用。
4.综上所述，如何设计一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法，可以有效提高样品检测的准确性和稳定性，便于推广使用，是目前急需解决的问题。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于为了解决上述技术问题，而提供一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法，其检测方法和参数设计合理，通过完善的样品前处理措施，一方面设计半透膜除去人参归脾丸样品中的蜂蜜，另一方面通过样品过滤器中过滤膜的改性，提高除杂效果，可以有效提高样品检测的准确性和稳定性，便于推广使用，且可同时用于高效液相色谱
‑
蒸发光散射检测器（hplc
‑
elsd）检查法、高效液相色谱
‑
串联质谱（hplc
‑
ms/ms）检查法测定，适用性强。
6.本发明通过以下技术方案来实现上述目的，一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法，包括以下步骤：（1）供试品溶液的制备：a、去除人参归脾丸中的蜂蜜：取人参归脾丸2丸，剪碎，加入50 ml水中，在40
‑
45℃条件下搅拌10
‑
15min，然后过滤，分别收集固体渣和滤液，滤液用半透膜透析除去单糖分子后，得到的产物与固体渣混合，得待测物料；b、取上述待测物料，加水饱和正丁醇100ml，加热回流1小时，滤过，滤液用氨试液洗涤2次，每次50ml，弃去氨洗液，取正丁醇液，再用正丁醇饱和的水50ml洗涤，取正丁醇层蒸干，残渣用甲醇2 ml使溶解，采用样品过滤器进行过滤，取续滤液，作为供试品溶液；（2）对照品溶液的制备：取拟人参皂苷f
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对照品，精密称定，加甲醇制成对照品溶液；（3）阴性对照溶液的制备：
取缺人参药材，按照处方工艺制备阴性对照样品，称取18 g，再同供试品溶液制备方法制成缺人参的阴性对照溶液；（4）测定方法：采用高效液相色谱
‑
蒸发光散射检测器（hplc
‑
elsd）检查法或者高效液相色谱
‑
串联质谱（hplc
‑
ms/ms）检查法测定，设置好检测条件，分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各10
‑
20μl，进样测定；（5）结果判断：供试品色谱中，应不得出现与对照品色谱峰保留时间相同的色谱峰。
7.进一步地，步骤（4）采用高效液相色谱
‑
蒸发光散射检测器（hplc
‑
elsd）检查法进行检测，其色谱条件为：色谱柱：capcell pak c18（4.6 mm
×
250 mm，5 μm），流动相：乙腈
‑
水（体积比30:70）；蒸发光散射检测器：气体流速：1.6 l/min，流速：1ml/min，柱温为30℃；此时步骤（2）中对照品溶液的制备方法为：精密称取拟人参皂苷f
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对照品10.05 mg，置50 ml量瓶中加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。
8.进一步地，步骤（4）采用高效液相色谱
‑
串联质谱（hplc
‑
ms/ms）检查法进行检测，其色谱条件为：色谱柱waters acquity uplc
®ꢀ
beh
‑
c
18
（2.1mm
×
100 mm，1.7 μm）；以乙腈为流动相a，以水为流动相b；流速为0.4 ml/min；柱温40 ℃；进样量3μl；梯度洗脱：0～12 min， 8%～80% a；12～14 min，80%～90% a；14～14.2 min，90%～8% a；14.2～20 min，8% a；乙腈
‑
水的体积比为30:70；质谱条件为：以飞行时间质谱作为检测器，采用电喷雾电离离子源，负离子模式检测，leucine－enkephalin作校准液，扫描范围：m/z 50～1200 ，采样间隔为0.5 s，毛细管电压为2.5 kv，锥孔电压为40v，离子源温度为100℃，脱溶剂温度为450℃，脱溶剂气体流速800 l
•
h
‑1，锥孔气流量 40 l
•
h
‑1，碰撞气体为氩气；碰撞低能量为6v，碰撞高能量20～40v；此时步骤（2）中对照品溶液的制备方法为：取拟人参皂苷f
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对照品，精密称定，加甲醇制成每1 ml含50
µ
g的溶液，摇匀，即得对照品溶液。
9.进一步地，步骤（1）中半透膜的制备方法为：a、将碱性玄武岩纳米粉与0.1
‑
0.3倍量的硅油混合后，置于1000
‑
2000r/min的分散机中分散1
‑
2h，得纳米粉料，将纳米粉料与40
‑
60倍水混合，制成分散液；b、取定量滤纸，用玻璃棒使之浸没在75%冷硫酸中，浸泡70
‑
80s后取出滤纸，在滤纸表面喷涂饱和碳酸溶液，喷入量为6
‑
10%，喷涂完毕后将滤纸放入步骤a的分散液中漂洗1
‑
3次，再放入稀氨水中浸泡3
‑
5min，取出晾干，即得半透膜。
10.进一步地，步骤（1）中样品过滤器的过滤膜为改性再生纤维素过滤膜，所述改性再生纤维素过滤膜的孔径为0.2
‑
0.5μm。
11.进一步地，所述改性再生纤维素过滤膜的制备方法为：s1、制备控释型成孔剂：将成孔剂制粒后备用，在24
‑
26℃条件下将聚n2异丙基丙烯酰胺溶解于去离子水中制成材料液，将得到的材料液在31
‑
33℃、1
‑
1.5mpa条件下喷淋到制粒后的成孔剂表面，然后升温至40
‑
50℃并保温20
‑
30min，即得控释型成孔剂；s2、制膜液的配制：将纤维素溶解于溶剂中，然后加入聚乳酸、控释型成孔剂和添加剂，混合均匀，脱泡过滤，得制膜液；
s3、制膜：在80
‑
84℃温度下，将步骤s2制得的制膜液在玻璃板上流延成平板膜，然后将平板膜在40
‑
50℃、通气环境下静置3
‑
5s，然后停止通气，将平板膜降温至30℃以下，静置30
‑
50min，接着在通气环境下静置5
‑
10s，再将平板膜后进入凝固浴中，固化10～15min成膜，用去离子水洗去该膜中的残留溶剂，然后室温晾干即制得改性再生纤维素过滤膜。
12.进一步地，步骤s1中，材料液与成孔剂的质量比为（0.08
‑
0.12）：1，材料液中聚n2异丙基丙烯酰胺的质量浓度为4
‑
8%；步骤s2中，纤维素、聚乳酸、控释型成孔剂和添加剂的质量比为1：（0.3
‑
0.6）：（0.15
‑
0.3）：（0.02
‑
0.05）。
13.进一步地，步骤s1中，所述成孔剂包括成孔剂a和成孔剂b，其质量比为1：（0.3
‑
0.6），所述成孔剂a和成孔剂b分开制粒，所述成孔剂a为聚乙二醇，所述成孔剂b为氯化钠和海藻酸钠，其质量比为1：（1.5
‑
3）。
14.进一步地，步骤s2中的溶剂为配比为（2
‑
4）：1的二甲基亚砜/四乙基氯化铵，添加剂为脂肪酸甘油酯或聚山梨酯；步骤s3中通气环境为：氮气或者氩气，通气量为0.05
‑
0.1m3/h。
15.本发明还公开了上述检测方法在控制人参归脾丸中人参质量上的应用。
16.本发明的有益效果在于：（1）本发明通过合理的检测方法和参数设计，以及完善的样品前处理措施，可以有效提高样品检测的准确性和稳定性，便于推广使用，且可同时用于高效液相色谱
‑
蒸发光散射检测器（hplc
‑
elsd）检查法、高效液相色谱
‑
串联质谱（hplc
‑
ms/ms）检查法测定，适用性强；（2）由于本发明的目标样品人参归脾丸中含有大量蜂蜜，因此本发明在样品前处理时，首先将人参归脾丸中的蜂蜜采用半透膜除去，可以减小蜂蜜在后续检测中造成的不利影响；（3）本发明制备的半透膜，其表面含有碱性玄武岩纳米粉和硅油混合制成的纳米粉料，可以提高半透膜表面的光滑性，使得在透析除去单糖分子过程中，减少样品吸附和损失，从而提高准确性；（4）本发明在制备半透膜时，选择将碱性玄武岩纳米粉导入半透膜表面，碱性玄武岩中的碱质含量较高，在浓硫酸中反应后的滤纸表面还残留较多浓硫酸，此时在滤纸表面导入碱性玄武岩纳米粉，可以加强纳米粉与滤纸表面的紧密结合，另外碱性玄武岩纳米粉流动性和润滑性好，可以增强半透膜表面的光滑性；（5）本发明在制备半透膜时，将硅油与碱性玄武岩纳米粉高速分散制成纳米粉料，一方面硅油填充碱性玄武岩纳米粉的孔隙后，可以形成超滑表面，另一方面硅油为非极性物质，将其导入半透膜表面后，还可以进一步减少样品吸附和损失；（6）本发明在制备半透膜的步骤b中，在滤纸表面水解后，往其表面喷涂饱和碳酸溶液，是为了在后续分散液中漂洗时，碳酸钠分解释放二氧化碳的过程，促进滤纸表面的物质交换，促进分散液中的纳米粉料与滤纸表面的结合；（7）由于样品的杂质含量对检测过程影响很大，因此本发明的样品过滤器的过滤膜采用改性再生纤维素过滤膜，主要制备材料为纤维素和聚乳酸，为环保可降解材料，适用于实验室中样品过滤器的一次性使用；（8）本发明制备的改性再生纤维素过滤膜，通过控释型成孔剂的配制和加入，不仅
可以控制成孔的时间，还使得成孔剂分布更均匀，可有效提高膜的孔隙率，膜孔大小均匀，过滤效率高，可以有效除杂质；（9）本发明在制备改性再生纤维素过滤膜时，采用的成孔剂由成孔剂a和成孔剂b组成，成孔剂a为聚乙二醇，可以增强膜通量，成孔剂b为氯化钠和海藻酸钠，当外层包膜材料聚n2异丙基丙烯酰胺凝胶在30℃以下融化后，凝胶内水分以及氯化钠、海藻酸钠均得以释放，使得海藻酸钠在氯化钠水溶液中发挥致孔剂作用，并在膜中形成大量的孔，成孔剂a和成孔剂b配合一起，可以显著改善改性再生纤维素过滤膜的膜性能。
附图说明
17.图1为拟人参皂苷f
11
对照品色谱图；图2 为阴性对照样品色谱图；图3为供试品（a企业样品，批号：17013851）色谱图；图4为供试品（b企业样品，批号：20170205）色谱图；图5 为拟人参皂苷f
11
全扫描基峰图；图6为拟人参皂苷f
11
一级质谱图；图7为拟人参皂苷f
11
二级质谱图；图8为阴性对照样品全扫描基峰图；图9为供试品（b企业样品，批号：20170205）全扫描基峰图；图10为供试品（b企业样品，批号：20170205）一级质谱图；图11为供试品（b企业样品，批号：20170205）二级质谱图。
具体实施方式
18.下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
19.仪器与试剂试药1、 仪器agilent 1260 高效液相色谱仪；agilent technologies elsd检测器；acquity uplc
®
/xevo
®ꢀ
g2 qtof液质联用仪，masslynx
®ꢀ
v4.1质谱工作站（美国waters公司）；sartorius bt 25s电子天平。
20.2、试剂试药人参归脾丸：a、b企业各10批样品（大蜜丸）。
21.阴性对照样品： 取缺人参药材的原辅料，照本品制备工艺制成阴性样品。
22.拟人参皂苷f
11
：来源：中国食品药品检定研究院 批号：110841
‑
201607。
23.乙腈为色谱纯，实验用水为去离子水。
24.实施例1本实施例提供了一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法，包括以下步骤：（1）供试品溶液的制备：
a、去除人参归脾丸中的蜂蜜：取人参归脾丸2丸，剪碎，加入50 ml水中，在40℃条件下搅拌10min，然后过滤，分别收集固体渣和滤液，滤液用半透膜透析除去单糖分子后，得到的产物与固体渣混合，得待测物料；b、取上述待测物料，加水饱和正丁醇100ml，加热回流1小时，滤过，滤液用氨试液洗涤2次，每次50ml，弃去氨洗液，取正丁醇液，再用正丁醇饱和的水50ml洗涤，取正丁醇层蒸干，残渣用甲醇2 ml使溶解，采用样品过滤器进行过滤，取续滤液，作为供试品溶液；（2）对照品溶液的制备：精密称取拟人参皂苷f
11
对照品10.05 mg，置50 ml量瓶中加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液；（3）阴性对照溶液的制备：取缺人参药材，按照处方工艺制备阴性对照样品，称取18 g，再同供试品溶液制备方法制成缺人参的阴性对照溶液；（4）测定方法：采用高效液相色谱
‑
蒸发光散射检测器（hplc
‑
elsd）检查法测定，设置好检测条件，分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各10μl，进样测定；（5）结果判断：供试品色谱中，应不得出现与对照品色谱峰保留时间相同的色谱峰。
25.步骤（4）中，色谱条件为：色谱柱：capcell pak c18（4.6 mm
×
250 mm，5 μm），流动相：乙腈
‑
水（体积比30:70）；蒸发光散射检测器：气体流速：1.6 l/min，流速：1ml/min，柱温为30℃。
26.实施例2本实施例提供了一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法，包括以下步骤：（1）供试品溶液的制备：a、去除人参归脾丸中的蜂蜜：取人参归脾丸2丸，剪碎，加入50 ml水中，在45℃条件下搅拌15min，然后过滤，分别收集固体渣和滤液，滤液用半透膜透析除去单糖分子后，得到的产物与固体渣混合，得待测物料；b、取上述待测物料，加水饱和正丁醇100ml，加热回流1小时，滤过，滤液用氨试液洗涤2次，每次50ml，弃去氨洗液，取正丁醇液，再用正丁醇饱和的水50ml洗涤，取正丁醇层蒸干，残渣用甲醇2 ml使溶解，采用样品过滤器进行过滤，取续滤液，作为供试品溶液；（2）对照品溶液的制备：取拟人参皂苷f
11
对照品，精密称定，加甲醇制成每1 ml含50
µ
g的溶液，摇匀，即得对照品溶液；（3）阴性对照溶液的制备：取缺人参药材，按照处方工艺制备阴性对照样品，称取18 g，再同供试品溶液制备方法制成缺人参的阴性对照溶液；（4）测定方法：采用高效液相色谱
‑
串联质谱（hplc
‑
ms/ms）检查法测定，设置好检测条件，分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各20μl，进样测定；（5）结果判断：
供试品色谱中，应不得出现与对照品色谱峰保留时间相同的色谱峰。
27.步骤（4）中，色谱条件为：色谱柱waters acquity uplc
®ꢀ
beh
‑
c
18
（2.1mm
×
100 mm，1.7 μm）；以乙腈为流动相a，以水为流动相b；流速为0.4 ml/min；柱温40 ℃；进样量3μl；梯度洗脱：0～12 min， 8%～80% a；12～14 min，80%～90% a；14～14.2 min，90%～8% a；14.2～20 min，8% a；乙腈
‑
水的体积比为30:70；质谱条件为：以飞行时间质谱作为检测器，采用电喷雾电离离子源，负离子模式检测，leucine－enkephalin作校准液，扫描范围：m/z 50～1200 ，采样间隔为0.5 s，毛细管电压为2.5 kv，锥孔电压为40v，离子源温度为100℃，脱溶剂温度为450℃，脱溶剂气体流速800 l
•
h
‑1，锥孔气流量 40 l
•
h
‑1，碰撞气体为氩气；碰撞低能量为6v，碰撞高能量20～40v。
28.实施例3在实施例1的基础上，本实施例还提供了一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法，步骤（1）中半透膜的制备方法为：a、将碱性玄武岩纳米粉与0.1倍量的硅油混合后，置于1000r/min的分散机中分散1h，得纳米粉料，将纳米粉料与40倍水混合，制成分散液；b、取定量滤纸，用玻璃棒使之浸没在75%冷硫酸中，浸泡70s后取出滤纸，在滤纸表面喷涂饱和碳酸溶液，喷入量为6%，喷涂完毕后将滤纸放入步骤a的分散液中漂洗1次，再放入稀氨水中浸泡3min，取出晾干，即得半透膜。
29.其余与实施例1相同。
30.实施例4在实施例2的基础上，本实施例还提供了一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法，步骤（1）中半透膜的制备方法为：a、将碱性玄武岩纳米粉与0.3倍量的硅油混合后，置于2000r/min的分散机中分散2h，得纳米粉料，将纳米粉料与60倍水混合，制成分散液；b、取定量滤纸，用玻璃棒使之浸没在75%冷硫酸中，浸泡80s后取出滤纸，在滤纸表面喷涂饱和碳酸溶液，喷入量为10%，喷涂完毕后将滤纸放入步骤a的分散液中漂洗3次，再放入稀氨水中浸泡5min，取出晾干，即得半透膜。
31.其余与实施例2相同。
32.实施例5在实施例1的基础上，本实施例还提供了一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法，步骤（1）中样品过滤器的过滤膜为改性再生纤维素过滤膜，所述改性再生纤维素过滤膜的孔径为0.2μm。
33.所述改性再生纤维素过滤膜的制备方法为：s1、制备控释型成孔剂：将成孔剂制粒后备用，在24℃条件下将聚n2异丙基丙烯酰胺溶解于去离子水中制成材料液，将得到的材料液在31℃、1mpa条件下喷淋到制粒后的成孔剂表面，然后升温至40℃并保温20min，即得控释型成孔剂；s2、制膜液的配制：将纤维素溶解于溶剂中，然后加入聚乳酸、控释型成孔剂和添加剂，混合均匀，脱泡过滤，得制膜液；s3、制膜：在80℃温度下，将步骤s2制得的制膜液在玻璃板上流延成平板膜，然后
将平板膜在40℃、通气环境下静置3s，然后停止通气，将平板膜降温至30℃以下，静置30min，接着在通气环境下静置5s，再将平板膜后进入凝固浴中，固化10min成膜，用去离子水洗去该膜中的残留溶剂，然后室温晾干即制得改性再生纤维素过滤膜。
34.步骤s1中，材料液与成孔剂的质量比为0.08：1，材料液中聚n2异丙基丙烯酰胺的质量浓度为4%；步骤s2中，纤维素、聚乳酸、控释型成孔剂和添加剂的质量比为1：0.3：0.15：0.02。
35.步骤s1中，所述成孔剂包括成孔剂a和成孔剂b，其质量比为1：0.3，所述成孔剂a和成孔剂b分开制粒，所述成孔剂a为聚乙二醇，所述成孔剂b为氯化钠和海藻酸钠，其质量比为1：1.5。
36.步骤s2中的溶剂为配比为2：1的二甲基亚砜/四乙基氯化铵，添加剂为脂肪酸甘油酯；步骤s3中通气环境为：氮气，通气量为0. 05m3/h。
37.其余与实施例1相同。
38.实施例6在实施例2的基础上，本实施例还提供了一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法，步骤（1）中样品过滤器的过滤膜为改性再生纤维素过滤膜，所述改性再生纤维素过滤膜的孔径为0.5μm。
39.所述改性再生纤维素过滤膜的制备方法为：s1、制备控释型成孔剂：将成孔剂制粒后备用，在26℃条件下将聚n2异丙基丙烯酰胺溶解于去离子水中制成材料液，将得到的材料液在33℃、1.5mpa条件下喷淋到制粒后的成孔剂表面，然后升温至50℃并保温30min，即得控释型成孔剂；s2、制膜液的配制：将纤维素溶解于溶剂中，然后加入聚乳酸、控释型成孔剂和添加剂，混合均匀，脱泡过滤，得制膜液；s3、制膜：在84℃温度下，将步骤s2制得的制膜液在玻璃板上流延成平板膜，然后将平板膜在50℃、通气环境下静置5s，然后停止通气，将平板膜降温至30℃以下，静置50min，接着在通气环境下静置10s，再将平板膜后进入凝固浴中，固化15min成膜，用去离子水洗去该膜中的残留溶剂，然后室温晾干即制得改性再生纤维素过滤膜。
40.步骤s1中，材料液与成孔剂的质量比为0.12：1，材料液中聚n2异丙基丙烯酰胺的质量浓度为8%；步骤s2中，纤维素、聚乳酸、控释型成孔剂和添加剂的质量比为1：0.6：0.3： 0.05。
41.步骤s1中，所述成孔剂包括成孔剂a和成孔剂b，其质量比为1：0.6，所述成孔剂a和成孔剂b分开制粒，所述成孔剂a为聚乙二醇，所述成孔剂b为氯化钠和海藻酸钠，其质量比为1：3。
42.步骤s2中的溶剂为配比为4：1的二甲基亚砜/四乙基氯化铵，添加剂为聚山梨酯；步骤s3中通气环境为：氩气，通气量为0.1m3/h。
43.其余与实施例2相同。
44.实施例7本实施例提供了一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法，包括以下步骤：（1）供试品溶液的制备：a、去除人参归脾丸中的蜂蜜：取人参归脾丸2丸，剪碎，加入50 ml水中，在42℃条
件下搅拌12min，然后过滤，分别收集固体渣和滤液，滤液用半透膜透析除去单糖分子后，得到的产物与固体渣混合，得待测物料；b、取上述待测物料，加水饱和正丁醇100ml，加热回流1小时，滤过，滤液用氨试液洗涤2次，每次50ml，弃去氨洗液，取正丁醇液，再用正丁醇饱和的水50ml洗涤，取正丁醇层蒸干，残渣用甲醇2 ml使溶解，采用样品过滤器进行过滤，取续滤液，作为供试品溶液；（2）对照品溶液的制备：精密称取拟人参皂苷f
11
对照品10.05 mg，置50 ml量瓶中加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液；（3）阴性对照溶液的制备：取缺人参药材，按照处方工艺制备阴性对照样品，称取18 g，再同供试品溶液制备方法制成缺人参的阴性对照溶液；（4）测定方法：采用高效液相色谱
‑
蒸发光散射检测器（hplc
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elsd）检查法测定，设置好检测条件，分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各15μl，进样测定；（5）结果判断：供试品色谱中，应不得出现与对照品色谱峰保留时间相同的色谱峰。
45.步骤（4）中，色谱条件与实施例1相同。
46.步骤（1）中半透膜的制备方法为：a、将碱性玄武岩纳米粉与0.2倍量的硅油混合后，置于1500r/min的分散机中分散1.5h，得纳米粉料，将纳米粉料与50倍水混合，制成分散液；b、取定量滤纸，用玻璃棒使之浸没在75%冷硫酸中，浸泡75s后取出滤纸，在滤纸表面喷涂饱和碳酸溶液，喷入量为8%，喷涂完毕后将滤纸放入步骤a的分散液中漂洗2次，再放入稀氨水中浸泡4min，取出晾干，即得半透膜。
47.步骤（1）中样品过滤器的过滤膜为改性再生纤维素过滤膜，所述改性再生纤维素过滤膜的孔径为0.35μm。
48.所述改性再生纤维素过滤膜的制备方法为：s1、制备控释型成孔剂：将成孔剂制粒后备用，在25℃条件下将聚n2异丙基丙烯酰胺溶解于去离子水中制成材料液，将得到的材料液在32℃、1.25mpa条件下喷淋到制粒后的成孔剂表面，然后升温至45℃并保温25min，即得控释型成孔剂；s2、制膜液的配制：将纤维素溶解于溶剂中，然后加入聚乳酸、控释型成孔剂和添加剂，混合均匀，脱泡过滤，得制膜液；s3、制膜：在82℃温度下，将步骤s2制得的制膜液在玻璃板上流延成平板膜，然后将平板膜在45℃、通气环境下静置4s，然后停止通气，将平板膜降温至30℃以下，静置40min，接着在通气环境下静置8s，再将平板膜后进入凝固浴中，固化12min成膜，用去离子水洗去该膜中的残留溶剂，然后室温晾干即制得改性再生纤维素过滤膜。
49.步骤s1中，材料液与成孔剂的质量比为0.1：1，材料液中聚n2异丙基丙烯酰胺的质量浓度为6%；步骤s2中，纤维素、聚乳酸、控释型成孔剂和添加剂的质量比为1：0.45：0.22：0.03。
50.步骤s1中，所述成孔剂包括成孔剂a和成孔剂b，其质量比为1：0.45，所述成孔剂a
和成孔剂b分开制粒，所述成孔剂a为聚乙二醇，所述成孔剂b为氯化钠和海藻酸钠，其质量比为1：2.2。
51.步骤s2中的溶剂为配比为3：1的二甲基亚砜/四乙基氯化铵，添加剂为聚山梨酯；步骤s3中通气环境为：氮气，通气量为0.08m3/h。
52.实施例8本实施例提供了一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法，包括以下步骤：（1）供试品溶液的制备：a、去除人参归脾丸中的蜂蜜：取人参归脾丸2丸，剪碎，加入50 ml水中，在42℃条件下搅拌12min，然后过滤，分别收集固体渣和滤液，滤液用半透膜透析除去单糖分子后，得到的产物与固体渣混合，得待测物料；b、取上述待测物料，加水饱和正丁醇100ml，加热回流1小时，滤过，滤液用氨试液洗涤2次，每次50ml，弃去氨洗液，取正丁醇液，再用正丁醇饱和的水50ml洗涤，取正丁醇层蒸干，残渣用甲醇2 ml使溶解，采用样品过滤器进行过滤，取续滤液，作为供试品溶液；（2）对照品溶液的制备：取拟人参皂苷f
11
对照品，精密称定，加甲醇制成每1 ml含50
µ
g的溶液，摇匀，即得对照品溶液；（3）阴性对照溶液的制备：取缺人参药材，按照处方工艺制备阴性对照样品，称取18 g，再同供试品溶液制备方法制成缺人参的阴性对照溶液；（4）测定方法：采用高效液相色谱
‑
串联质谱（hplc
‑
ms/ms）检查法测定，设置好检测条件，分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各15μl，进样测定；（5）结果判断：供试品色谱中，应不得出现与对照品色谱峰保留时间相同的色谱峰。
53.步骤（4）中，色谱条件、质谱条件与实施例2相同。
54.步骤（1）中半透膜的制备方法与实施例7相同。
55.步骤（1）中样品过滤器的过滤膜为改性再生纤维素过滤膜，所述改性再生纤维素过滤膜的孔径为0.35μm，其制备方法与实施例7相同。
56.本发明的检测方法在控制人参归脾丸中人参质量上的应用选取2家（a企业、b企业）生产企业去重批号后的人参归脾丸（大蜜丸）样品各10批，分别按照实施例7和8的检测方法进行测定，判断是否检出拟人参皂苷f
11
，结果如下表所示：表 1
由表1结果可知，a企业的10批人参归脾丸样品中，全部未检出拟人参皂苷f
11
，产品合格；b企业的10批人参归脾丸样品中，全部检出拟人参皂苷f
11
，疑似用西洋参边角料代替人参进行投料。
57.为了更详细和直观地判断检测结果，本发明还提供了相关图谱，参见附图1
‑
11。
58.如图1所示，拟人参皂苷f
11
对照品的色谱图中表现出其特征色谱峰；如图2所示，阴性对照样品的色谱图中，显示未检出拟人参皂苷f
11
。
59.如图5所示，拟人参皂苷f
11
对照品的全扫描基峰图中表现出其特征基峰；如图8所示，阴性对照样品的全扫描基峰图中，显示未检出拟人参皂苷f11。
60.本发明采用实施例7（hplc
‑
elsd检查法），对a企业批号17013851样品进行检测，其色谱图见图3，图3中未出现与图1对照品色谱峰保留时间一致的色谱峰，证实a企业批号17013851样品未检出拟人参皂苷f
11
。
61.本发明采用实施例8（hplc
‑
ms/ms检查法），对b企业批号20170205样品进行检测，其色谱图见图4，图4中出现与图1对照品色谱峰保留时间一致的色谱峰，证实b企业批号20170205样品检出拟人参皂苷f
11
；接着再用质谱确证，详见图9
‑
11，证实检出拟人参皂苷f
11
。
62.本发明的有益效果在于：本发明提供了一种人参归脾丸中西洋参成分的检测方法，通过合理的检测方法和参数设计，以及完善的样品前处理措施，可以有效提高样品检测的准确性和稳定性，便于推广使用，且可同时用于高效液相色谱
‑
蒸发光散射检测器（hplc
‑
elsd）检查法、高效液相色谱
‑
串联质谱（hplc
‑
ms/ms）检查法测定，适用性强。
63.最后应说明的是，以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。