一种内标法测定水果蒸馏酒中甲醇和5种高级醇的方法与流程

1.本发明涉及一种内标法测定水果蒸馏酒中甲醇和5种高级醇的方法，属于食品检测技术领域。


背景技术：

2.水果蒸馏酒是使用新鲜水果或者果汁为原料经发酵、蒸馏、贮存而成的饮料酒，其中的酒精成分多种多样，其中甲醇是一元醇，不是发酵的直接产物，是由天然存在于葡萄酒中的果胶分解而得，是一种有香气的无色液体，但有毒性。如果含量过高，会直接影响酒的口感和质量，严重时会上头甚至头晕头痛，过量饮用会因较多的甲醇积累影响健康。此外，其他醇例如正丙醇、异丁醇、正丁醇、异戊醇和正戊醇也是主要的有害成分。目前其检测的方法多为气相色谱法检测甲醇的含量，检测的种类比较单一，而且样品耗时长，酒类中其他风味成分不能很好地分离，不适宜批量样品的分析检测。


技术实现要素：

3.针对现有技术中检测种类比较单一的方法，本技术提供了一种内标法测定水果蒸馏酒中甲醇和5种高级醇的方法，通过样品的前处理以及检测方法的优化，能够精确检测各种醇的浓度。
4.一种内标法测定水果蒸馏酒中甲醇和5种高级醇的方法，包括以下步骤：（1）样品前处理：称取5.0 ml样品，加入1.5 g氯化钠，加入5
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l 2,2-二氟乙醇作为内标物，得到预处理样品；（2）标准溶液的配制：准确称取甲醇、正丙醇、异丁醇、正丁醇、异戊醇和正戊醇各1.0000 g于100 ml容量瓶中，用模拟酒样溶解并定容，配成质量浓度为10 g/l 的混合标准储备液，于4℃保存，备用；将标准储备液逐级稀释为 0.08、0.1、0.25、0.5、1 g/l的系列标准溶液，待用；（3）测定：预处理样品用顶空气相色谱-质谱进行检测分析。
5.进一步地，所述的样品的酒精度数为60%。
6.进一步地，所述的顶空的条件为：平衡时间10 min；平衡温度55 ℃；搅拌速度：250 rpm；进样量 1000
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7.进一步地，所述的气相色谱的条件为：色谱柱: rtx-wax毛细管色谱柱(30 m
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0.25 μm
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0.25 mm)，载气：高纯氦气，进样口温度 200℃，柱温采用程序升温: 35 ℃保持5 min，再以18 ℃ /min升至100℃，最后以25 ℃/min升至150℃，恒流模式，流量：1.0 ml/min。
8.进一步地，所述的质谱的条件为：色谱-质谱接口温度：250℃，离子源温度：200℃，电离模式：电子轰击源（ei），轰击能量：70 ev，选择离子监测待测物质的保留时间、定量离子和定性离子为：
有益效果本发明建立了适用于水果蒸馏酒中甲醇和5种醇的测定方法，方法详细优化了影响提取效率的几个因素，克服了提取效率低的难题，通过顶空气相色谱，结合准确的质谱方法，实现了不同水果蒸馏酒中甲醇以及其他醇的检测。该方法样品前处理简便快速，定性、定量准确，可满足水果酒中醇的快速检测，对于加强水果酒的质量控制提供技术支持。
附图说明
9.图1标准样品测定tic图，图中1-7分别为甲醇、正丙醇、异丁醇、正丁醇、异戊醇、2,2-二氟乙醇、正戊醇。
具体实施方式
10.下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
11.实施例11 实验部分1.1 仪器与试剂岛津gcms-qp2010 ultra及工作站(日本岛津)，aoc-6000顶空进样器，电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)，20 ml 顶空瓶(瑞士ctc analytics ag)，氯化钠(ar)，无水乙醇(ar)，(以上药品均购自国药集团化学试剂有限公司)，超纯水，甲醇（99.9%）、正丙醇（99.5%）、异丁醇（99.5%）、正丁醇（99.7%）、异戊醇（99%）、正戊醇（99.5%）和2，2-二氟乙醇（97%），(均购自阿拉丁试剂有限公司)1.2 顶空及gc-ms测定条件顶空条件：平衡时间10 min；平衡温度55 ℃；搅拌速度：250 rpm；进样量 1000
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l。
12.gc条件：色谱柱: rtx-wax毛细管色谱柱(30 m
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0.25 μm
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0.25 mm)，载气：高纯氦气，进样口温度 200℃，柱温采用程序升温:35 ℃保持5 min，再以18 ℃ /min升至100℃，最后以25 ℃/min升至150℃，恒流模式，流量：1.0 ml/minms条件：色谱-质谱接口温度：250℃，离子源温度：200℃，电离模式：电子轰击源(ei)，轰击能量：70 ev，选择离子监测待测物质的保留时间、定量离子和定性离子见表1。
13.表1. 选择离子监测甲醇、5种高级醇和内标物的保留时间、定量离子和定性离子
1.3标准储备液和模拟酒样的配制标准储备液：准确称取甲醇、正丙醇、异丁醇、正丁醇、异戊醇和正戊醇各1.0000 g于100 ml容量瓶中，用模拟酒样溶解并定容，配成质量浓度为10 g/l 的混合标准储备液，于4℃保存，备用。
14.模拟酒样：用无水乙醇和超纯水配制体积分数为60 %的乙醇溶液，作为模拟酒样。
15.1.4 混合标准工作溶液的配制用1.3配制的模拟酒样将标准储备液逐级稀释为 0.08、0.1、0.25、0.5、1 g/l的系列标准溶液，待用。
16.1.5 顶空气相色谱-质谱法试验过程取5.0 ml水果蒸馏酒样（提前添加无水乙醇或稀释成酒精度数为60%）或加标模拟酒样于20.0 ml顶空瓶中，加入1.5 g氯化钠，加入5
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l 2,2-二氟乙醇作为内标物，用带硅橡胶胶垫的具有磁力的瓶盖封闭，放入自动进样器样品盘，顶空进样器设定转速为250 rpm，在55 ℃下搅拌10 min，进样1000
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17.2 结果与分析2.1 顶空条件优化2.1.1 平衡温度的优化本研究考察了40、45、50、55和58℃的平衡温度下，目标物峰面积的大小和相对标准偏差，从而选择最优平衡温度为55 ℃。
18.2.1.2 平衡时间的选择在顶空过程中，平衡时间是影响试验结果的重要因素。本研究考察了10、15、20、25和30 min的平衡时间对目标物峰面积的大小和相对标准偏差的影响，从而选出最优平衡时间为10 min。
19.2.1.3 盐浓度的优化在顶空过程中适当增加溶液离子强度，可降低待分析物在溶液中的溶解度，提高分配系数，增强待分析物的响应值。本文通过选0.5、1.0、1.5和2.0 g nacl的添加量，来讨论盐效应对目标分析物峰面积的大小和相对标准偏差的影响，最终确定最优值为1.5 g。2.1.4 搅拌速度的优化考察当搅拌速度100、250、400、550和600 rpm时，搅拌速度对目标分析物峰面积的大小和相对标准偏差的影响，最终确定最优值为250 rpm。2.2标准工作曲线的制定、方法检出限和定量分析配制一系列待分析物浓度均为0.08
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10 g
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的模拟酒样，添加5
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l 2,2-二氟
乙醇作为内标物，按照1.5的试验方法进行测定，质谱扫描方式为sim模式，定性离子和定量离子的选择由表1所示，用内标标准曲线法绘制标准曲线，线性方程如表2所示。甲醇和5种高级醇在0.08
−
10 g
·
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浓度范围内呈现良好的线性关系，线性相关系数(r)在0.9992-0.9995之间。以3倍信噪比(s/n)计算得到甲醇和5种高级醇的检出限在0.0092-0.1069 mg
·
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之间。
20.表2 甲醇和5种高级醇的线性方程、线性范围、线性相关系数和检出限2.3 方法准确度与精密度取3瓶不同水果蒸馏酒，在3个不同添加水平下（0.1、0.5、1 g
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），每个水平重复5次。结果表明：3种水果中（1#、2#、3#）甲醇的添加回收率在80.1%-110.2%之间，相对标准偏差(rsd)(n=5)小于10 %，5种高级醇的添加回收率在80.4%-113.6%之间，相对标准偏差(rsd)(n=5)小于10 %，该方法有较高的准确度和良好的稳定性，可用于水果蒸馏酒中甲醇和5种高级醇的检测。
21.对比例1采用专利cn 103134863 a的方法，检测酒精中甲醇及其它3种醇含量，检出限未给出对比例2与实施例1不同的是：内标物采用2,2-二氟乙醇，得到的结果：检出限低，甲醇及其它5种醇的检出限在0.0092-0.1069 mg/l之间。