一种基于FMs和PMA荧光-比色双模生物传感器的构建和应用

技术特征：
1.一种基于fms和pma的荧光-比色双模生物传感器的构建和应用。所述的荧光-比色双模生物传感方法包括fms，pma和aap等，其中fms具有好的光学性能，提供荧光信号，直径为200nm；pma还原后生成的磷钼蓝具有较宽的吸光范围，并通过内滤作用使fms发生荧光猝灭，输出了荧光-比色双模信号，实现在缓冲溶液体系中对alp的高灵敏检测。fms和pma荧光-比色双模生物传感器对alp的比色和荧光检测限分别为0.068u/l和0.11u/l。此外利用智能手机读取比色信号的便捷传感系统实现对生物标志物alp的即时检测，具有良好的准确性，检测限为0.4u/l，对实现日常生活中alp的即时检测和实时监测很有意义。2.根据权利要求1所述fms和pma的比色-荧光双模生物传感器，其特征在于：所述fms和pma的比色-荧光双模生物传感器制备步骤如下：(1)用cutsmart缓冲液配制含aap和alp溶液2ml，混匀后25℃反应15min。(2)25℃下，向步骤(1)反应后的溶液中加入pma和fms。(3)步骤(2)反应溶液反应5min，在紫外吸收扫描范围为500-900nm，检测样品紫外吸收强度。(4)步骤(2)溶液反应180min后，在荧光发射波长λmax＝625nm(激发光波长λex＝365nm)，发射峰范围为600-675nm条件下检测样品荧光强度。3.根据权利要求2所述fms和pma的比色-荧光双模生物传感器，其特征在于：所述步骤(1)中cutsmart缓冲液为50mm ch3cook+30mm tris-ch3cooh+10mm ch3coomg+100μg/ml牛血清白蛋白(ph＝7.9)；aap溶液浓度为5mm；alp的反应浓度溶液为0-150u/l。4.根据权利要求2所述fms和pma的比色-荧光双模生物传感方法，其特征在于：所述步骤(2)中pma的浓度为2mm，fms的浓度为5μg/ml。5.根据权利要求1所述一纸基-智能手机比色生物传感方法，其特征在于：所述的纸基-智能手机比色生物传感系统制备如下：(1)圆形吸收垫放入超纯水配制的pma溶液浸泡5s，拿出后室温放置待其自然晾干，获得便携式纸基。(2)用cutsmart缓冲液配制含aap和alp的溶液2ml，混匀后反应15min，反应后的溶液滴加到步骤(1)制备的纸基上。(3)20min后将经步骤(2)处理的纸基放置于室内白色日光灯下，将智能手机放置于纸基正上方进行拍照，再用可读取rgb数值的智能手机app对照片进行数值读出。6.根据权利要求2所述纸基-智能手机比色生物传感方法，其特征在于：所述步骤(1)中pma溶液浓度为2mm；fms的浓度为5μg/ml。7.根据权利要求2所述纸基-智能手机比色生物传感方法，其特征在于：所述步骤(2)中aap溶液浓度为5mm；alp的反应浓度溶液为0-80u/l；圆形吸收垫直径为2cm；10μl溶液滴加到晾干纸基上。8.权利要求1-7任一项所述的基于荧光微球(fms)和磷钼杂多酸(pma)测定碱性磷酸酶(alp)比色-荧光双模生物传感方法，并提出一种纸基-智能手机比色生物传感方法实现对alp的快速定量检测，其特征在于：pma在室温下即可快速被alp与aap反应生成的aa还原生成磷钼蓝，磷钼蓝在λ＝500-900nm内有紫外吸收，能够吸收fms位于λ＝620nm处的荧光发射，从而通过内滤效应猝灭fms的荧光，实现了对alp的灵敏检测。

技术总结
本发明涉及材料技术领域，具体涉及利用基于FMs和PMA的荧光-比色双模生物传感器的制备和应用，并提出一种纸基-智能手机比色生物传感系统实现对ALP的快速定量检测。本发明利用荧光-比色双模传感器检测血清中ALP含量，包括PMA，FMs，AAP，便携式纸基和样品稀释液。所述荧光-比色双模传感器对ALP具有好的选择性，低的假阳性，提高了检测的准确度。对ALP的比色和荧光检测限分别为0.068U/L和0.11U/L,检测范围分别为0.2-30U/L和0.2-35U/L，能够准确测定血清中ALP的含量。基于纸基-智能手机的传感体系同样具有好的准确性，对ALP的检测限为0.4U/L，检测范围为2-50U/L，能够实现日常生活中ALP的即时检测。即时检测。即时检测。


技术研发人员：孟红敏 李倩楠 赵迪 李朝辉
受保护的技术使用者：郑州大学
技术研发日：2021.12.10
技术公布日：2022/5/25