一种皮革中四乙二醇二甲醚的检测方法与流程

1.本发明涉及化学检测技术领域，特别涉及一种皮革中四乙二醇二甲醚的检测方法。


背景技术：

2.四乙二醇二甲基醚是一种有机非质子性无色溶剂，可作为碱金氢化物的优良溶剂，还可用于烷基化缩合和还原等多种化学反应工艺中。由于该化合物具有路易斯碱性，所以它能选择吸收酸性气体，用于合成气、天然气、乙炔等气体的纯化。四乙二醇二甲醚涂层可用于葡萄糖传感器，使得传感器具有“抗黏”特性，增强生物拟态分子和表面的连接；在促细胞粘附方面，四乙二醇二甲醚有助于蛋白质的选择吸附。此外，四乙二醇二甲基醚可用于耐压棉和纤维织物中固定甲基化羟甲基三聚氰胺树脂的惰性添加剂，在纺织行业中主要用作溶剂，可用作印染的溶剂和稀释剂，作为纺织助剂用来合成染料、涂料稀释剂；在皮革中主要用于皮革着色剂、乳化剂、乳液稳定剂、油墨溶剂，皮革及纤维的匀染剂等。
3.研究表明，四乙二醇二甲基醚具有生殖毒性、可能引起中枢神经障碍以及呼吸器官、肾脏和血管系统的病变，引起贫血症、巨红血球症，出现新生颗粒性白血球，严重影响人的生育能力。2021年1月19日，欧洲化学品管理局(echa)成员国委员会(msc)将四乙二醇二甲基醚正式纳入svhc清单。这意味着欧盟等国家和地区已经开始重视四乙二醇二甲基醚物质的危害，即将出台相关法律法规限制其在皮革制品等需要用到四乙二醇二甲基醚的产品中的应用。我国生产的皮革制品要出口到欧盟，就必须要符合欧盟reach法规的要求。为了应对未来可能出现的技术性贸易壁垒，增强我国皮革产品的出口竞争力，保障人民的健康安全，进一步提升我国生态皮革制品的检测能力，开展皮革中四乙二醇二甲基醚的检测方法研究具有重要的现实意义。
4.目前，国内外文献尚未报道对于皮革中四乙二醇二甲基醚的检测方法及相关标准的研究。由于四乙二醇二甲基醚在皮革制品中的广泛应用，亟需建立一套适合皮革中四乙二醇二甲基醚的测定方法，不仅可以保障消费者的生命财产安全，而且可提升我国在皮革检测方面的能力。


技术实现要素：

5.为此，需要提供一种皮革中四乙二醇二甲醚的检测方法，对皮革样品中的四乙二醇二甲基醚进行萃取、浓缩、净化、富集和气相色谱-质谱检测，简单便捷、选择性强、准确度高、灵敏性强且检测限低，从而弥补现有技术中缺少对皮革中四乙二醇二甲基醚检测方法的缺陷。
6.为实现上述目的，本发明的技术方案提供了一种皮革中四乙二醇二甲醚的检测方法，其包括以下步骤：
7.步骤s1、配制标准溶液：称取四乙二醇二甲醚标准品，用萃取溶剂作为溶剂，配制得到多种浓度的四乙二醇二甲醚标准溶液；
8.步骤s2、取样和超声波萃取：称取待测皮革样品放入萃取瓶中，加入萃取溶剂，调节萃取温度和萃取时间，采用超声水浴提取方法萃取得到样品萃取液；
9.步骤s3、浓缩：将所述样品萃取液置于浓缩瓶中，在真空度150～550mbar，水浴温度30～45℃，转速10～50rpm条件下，用旋转蒸发仪浓缩、氮气吹至干，加入2～10ml溶解溶剂进行溶解，得到样品溶解液；
10.步骤s4、固相萃取柱净化：将所述样品溶解液转移至固相萃取柱中，通过施加负压使得样品溶解液流过固相萃取柱，用氮气吹干固相萃取柱，并用洗脱溶剂洗脱固相萃取柱，得到洗脱溶液；
11.步骤s5、浓缩富集：将所述洗脱溶液通过旋转蒸发仪或氮气吹扫浓缩至2ml，溶液经过滤器过滤，得到待测溶液；
12.步骤s6、气相色谱-质谱检测：将步骤s1得到的四乙二醇二甲醚标准溶液和步骤s5得到的待测溶液分别进样，按照设定好的气相色谱-质谱条件分别进行检测，通过定性和定量分析，得到待测皮革样品中四乙二醇二甲醚的含量。
13.作为本发明进一步的实施方式，在步骤s2中，所述萃取溶剂选自甲醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮中的一种或多种。
14.作为本发明进一步的实施方式，在步骤s2中，萃取温度为20～50℃，萃取时间为5～120min，萃取次数为1～3次。
15.在上述步骤s2的萃取过程中，将每次萃取得到的样品萃取液合并，用于后续浓缩操作。
16.作为本发明进一步的实施方式，在步骤s3中，所述溶解溶剂选自正己烷、环己烷、四氯化碳、甲苯、二氯甲烷中的一种或多种。
17.作为本发明进一步的实施方式，在步骤s4中，所述固相萃取柱为未键和的硅胶柱、氧化铝柱、佛罗里硅土柱、氰基键合硅胶柱或氨基键合硅胶柱。
18.作为本发明进一步的实施方式，在步骤s4中，所述洗脱步骤所用的洗脱溶剂为甲醇、异丙醇、乙腈、丙酮中的一种或多种的混合溶剂。
19.作为本发明进一步的实施方式，在步骤s6中，所述气相色谱-质谱检测的色谱条件包括：
20.进样口温度：180～320℃；
21.升温程序：初始温度35℃，保持5min，而后以5～35℃/min升温至280℃，保持2min；
22.载气：体积含量99.999％的高纯氦气，流速为0.7～2.0ml/min；
23.进样体积：1～3μl；
24.传输线温度：250～320℃。
25.作为本发明进一步的实施方式，在步骤s6中，气相色谱的进样模式采取分流模式或者不分流模式，所述分流模式中分流比范围为1:1～1:50。
26.作为本发明进一步的实施方式，在步骤s6中，气相色谱柱选用db-5ms、db-624、db-17ms、db-1701、tg-35ms、tg-5ms气相色谱柱中的一种，柱长为30～60m，膜厚为0.25μm，内径为0.25～0.32mm。
27.作为本发明进一步的实施方式，在步骤s6中，所述气相色谱-质谱检测的质谱条件包括：
28.离子源温度：230～280℃；
29.电离方式：电子电离(ei)；
30.电离能力：70ev；
31.溶剂延迟时间：0～5min；
32.采集模式：scan+sim；
33.scan质量扫描范围：35～350m/z；
34.sim质量扫描：45，59，103，220m/z。
35.优选的，在步骤s6中，质谱分析的定量离子为59m/z，定性离子为45、59、103、220m/z。
36.区别于现有技术，上述技术方案具有以下有益效果：
37.针对现有技术中缺少对皮革中四乙二醇二甲基醚检测方法的缺陷，本发明提供了一种皮革中四乙二醇二甲醚的检测方法。该方法通过萃取、浓缩、净化、富集和气相色谱-质谱检测，可以简单、准确、高灵敏地检测皮革中的四乙二醇二甲基醚，具有简单便捷、抗样品杂质干扰、选择性强、准确度高、灵敏性强、重现性好以及检测限低等优点，并且该方法具有良好的回收率和精密度，能够广泛应用于皮革中的四乙二醇二甲醚含量检测。
38.上述发明内容相关记载仅是本技术技术方案的概述，为了让本领域普通技术人员能够更清楚地了解本技术的技术方案，进而可以依据说明书的文字及附图记载的内容予以实施，并且为了让本技术的上述目的及其它目的、特征和优点能够更易于理解，以下结合本技术的具体实施方式及附图进行说明。
附图说明
39.附图仅用于示出本技术具体实施方式以及其他相关内容的原理、实现方式、应用、特点以及效果等，并不能认为是对本技术的限制。
40.图1为实施例1所述四乙二醇二甲醚系列标准溶液的浓度和响应信号之间线性关系图；
41.图2为实施例2所述猪皮革样品待测溶液中四乙二醇二甲醚的全扫描色谱图；
42.图3为实施例2所述猪皮革样品待测溶液全扫描得到的四乙二醇二甲醚的质谱图；
43.图4为实施例4所述羊皮革样品待测溶液连续进样9次的四乙二醇二甲醚信号对比图；
44.图5为实施例5所述羊皮样品超声提取溶液在未净化和经过固相萃取柱净化处理后检测得到的四乙二醇二甲醚的总离子流图；
45.图6为实施例5所述羊皮样品超声提取溶液在未净化和经过固相萃取柱净化处理后检测得到的四乙二醇二甲醚的选择离子流图。
具体实施方式
46.为详细说明技术方案的技术内容、构造特征、所实现目的及效果，以下结合具体实施例并配合附图详予说明。本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
47.本发明具体实施例提供了一种皮革中四乙二醇二甲醚的检测方法，其包括以下步
骤：
48.步骤s1、配制标准溶液：称取四乙二醇二甲醚标准品，用萃取溶剂作为溶剂，配制得到多种浓度的四乙二醇二甲醚标准溶液；
49.步骤s2、取样和超声波萃取：称取待测皮革样品放入萃取瓶中，加入萃取溶剂，调节萃取温度和萃取时间，采用超声水浴提取方法萃取得到样品萃取液；
50.步骤s3、浓缩：将所述样品萃取液置于浓缩瓶中，在真空度150～550mbar，水浴温度30～45℃，转速10～50rpm条件下，用旋转蒸发仪浓缩、氮气吹至干，加入2～10ml溶解溶剂进行溶解，得到样品溶解液；
51.步骤s4、固相萃取柱净化：将所述样品溶解液转移至固相萃取柱中，通过施加负压使得样品溶解液流过固相萃取柱，用氮气吹干固相萃取柱，并用洗脱溶剂洗脱固相萃取柱，得到洗脱溶液；
52.步骤s5、浓缩富集：将所述洗脱溶液通过旋转蒸发仪或氮气吹扫浓缩至2ml，溶液经过滤器过滤，得到待测溶液；
53.步骤s6、气相色谱-质谱检测：将步骤s1得到的四乙二醇二甲醚标准溶液和步骤s5得到的待测溶液分别进样，按照设定好的气相色谱-质谱条件分别进行检测，通过定性和定量分析，得到待测皮革样品中四乙二醇二甲醚的含量。
54.其中，本发明所述的皮革包括牛皮革、羊皮革、猪皮革等不同类型的皮革。
55.本发明技术方案提供的一种皮革中四乙二醇二甲醚的检测方法，其检测原理如下：
56.通过对四乙二醇二甲醚标准品在气相色谱-质谱检测中得到的质谱图进行分析，可获得四乙二醇二甲醚定性和定量特征碎片离子，并建立四乙二醇二甲醚的标准质谱图。通过对待测样品总离子流图的色谱峰进行谱库检索匹配，以确定待测样品中是否存在四乙二醇二甲醚，对于匹配度高的色谱峰再结合保留时间以确定是否有四乙二醇二甲醚的存在；通过定量特征离子来对待测样品中的四乙二醇二甲醚进行定量分析。通过外标法(标准曲线方程)来进行定量分析，以四乙二醇二甲醚标准溶液的浓度为横坐标，相应定量离子积分峰面积为纵坐标，绘制得到标准曲线。通过将待测样品中四乙二醇二甲醚的峰面积与标准曲线比较，通过标准曲线方程换算，即可得到待测皮革样品中四乙二醇二甲醚的含量。
57.作为优选的实施方式，在步骤s2中，所述萃取溶剂选自甲醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮中的一种或多种。
58.作为优选的实施方式，在步骤s2中，萃取温度为20～50℃，萃取时间为5～120min，萃取次数为1～3次。
59.作为优选的实施方式，在步骤s3中，所述溶解溶剂选自正己烷、环己烷、四氯化碳、甲苯、二氯甲烷中的一种或多种。
60.作为优选的实施方式，在步骤s4中，所述固相萃取柱为未键和的硅胶柱、氧化铝柱、佛罗里硅土柱、氰基键合硅胶柱或氨基键合硅胶柱。
61.作为优选的实施方式，在步骤s4中，所述洗脱步骤所用的洗脱溶剂为甲醇、异丙醇、乙腈、丙酮中的一种或多种的混合溶剂。
62.作为优选的实施方式，在步骤s6中，所述气相色谱-质谱检测的色谱条件包括：
63.进样口温度：180～320℃；
64.升温程序：初始温度35℃，保持5min，而后以5～35℃/min升温至280℃，保持2min；
65.载气：体积含量99.999％的高纯氦气，流速为0.7～2.0ml/min；
66.进样体积：1～3μl；
67.传输线温度：250～320℃。
68.作为优选的实施方式，所述气相色谱的进样模式采取分流模式或者不分流模式，所述分流模式中分流比范围为1:1～1:50。
69.作为优选的实施方式，在步骤s6中，气相色谱柱选用db-5ms、db-624、db-17ms、db-1701、tg-35ms、tg-5ms气相色谱柱中的一种，柱长为30～60m，膜厚为0.25μm，内径为0.25～0.32mm。
70.作为优选的实施方式，在步骤s6中，所述气相色谱-质谱检测的质谱条件包括：
71.离子源温度：230～280℃；
72.电离方式：电子电离(ei)；
73.电离能力：70ev；
74.溶剂延迟时间：0～5min；
75.采集模式：scan+sim；
76.scan质量扫描范围：35～350m/z；
77.sim质量扫描：45，59，103，220m/z。
78.优选的，在步骤s6中，质谱分析的定量离子为59m/z，定性离子为45、59、103、220m/z。
79.以上是本发明的核心技术方案，下面将结合具体实施例，对各步骤进行详细说明。
80.下述实施例中所用的试验材料和试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
81.在下述实施例中，使用的仪器设备有：超声萃取仪，旋转蒸发仪，气相色谱-质谱仪；使用的测试材料有：猪皮革样品、羊皮革样品、牛皮革样品。
82.实施例1牛皮革样品中四乙二醇二甲醚的测定
83.(1)配制标准溶液：用移液枪移取四乙二醇二甲醚标准品0.01013g，用甲醇作为溶剂，定容至100ml，获得101.3mg/l的四乙二醇二甲醚标准储备液，将四乙二醇二甲醚标准储备液稀释成多种浓度的四乙二醇二甲醚标准溶液，浓度分别为0.5、1.0、2.5、5.0、7.5、10.0mg/l。
84.(2)取样和超声波萃取：将不含四乙二醇二甲醚的牛皮革样品用剪刀或碎布机裁切成2mm
×
2mm以下的小块样品，准确称取1.00g(+0.01g)样品置于带螺旋盖子玻璃瓶(容积为40ml)中，加入10ml萃取溶剂丙酮和0.2ml 1.0mg/l的四乙二醇二甲醚标准溶液，加盖旋紧，涡旋混匀后放入30℃的超声水浴中超声处理30min。收集上清液并用10ml丙酮润洗残渣再次提取5min，合并样品萃取液于浓缩瓶中，用于后续浓缩操作。
85.(3)浓缩：将浓缩瓶置于旋转蒸发仪上，在真空度550mbar，水浴温度40℃，转速20rpm条件下，蒸发浓缩至近干，用氮气吹干，加入3.0ml正己烷进行溶解，得到样品溶解液；
86.(4)固相萃取柱净化：将样品溶解液转移至正己烷活化过的未键和的硅胶柱中，通过施加负压使得样品溶解液流过硅胶柱，氮气吹至干，用5ml洗脱溶剂丙酮洗脱，得到洗脱溶液。
87.(5)浓缩富集：将洗脱溶液通过旋转蒸发仪或氮气吹扫浓缩至2ml，浓缩液用0.45μm孔径的有机相滤膜过滤，得到待测溶液。
88.(6)气相色谱-质谱检测：将不同浓度的四乙二醇二甲醚标准溶液和空白牛皮革样品加标溶液分别进样，按照设定好的气相色谱-质谱条件分别进行检测。
89.所确定的色谱条件如下：
90.色谱柱：db-5ms，规格为60m*0.25mm*0.25μm；
91.进样口温度：280℃；
92.升温程序：初始温度35℃，保持5min，而后以20℃/min升温至280℃，保持2min；
93.载气：体积含量99.999％的高纯氦气，流速为1.0ml/min；
94.进样体积：1.0μl；
95.进样模式：不分流进样；
96.传输线温度：280℃。
97.所确定的质谱条件如下：
98.离子源温度：280℃；
99.电离方式：电子电离(ei)；
100.电离能力：70ev；
101.溶剂延迟时间：4min；
102.采集模式：scan+sim；
103.scan质量扫描范围：40～250m/z；
104.sim质量扫描：45，59，103，220m/z；
105.定量离子为59m/z，定性离子为45、59、103、220m/z。
106.本实施例中采用气相色谱-质谱法测定四乙二醇二甲醚一系列不同浓度的标准溶液。四乙二醇二甲醚系列标准溶液的浓度和响应信号之间的线性关系如图1所示，从图上可以看出，四乙二醇二甲醚在0.1～10mg/l的浓度范围内的特征离子峰面积与浓度成良好的线性关系，并且线性范围包含了两个数量级。在空白牛皮革样品中加入0.2mg/kg的四种乙二醇二甲醚化合物，发现待测样液中目标组分四乙二醇二甲醚的信噪比为75，可确保样品在该定量限下不被漏检。通过三倍信噪比公式计算可得到四乙二醇二甲醚的最低检测限为0.05mg/kg，四乙二醇二甲醚化合物的线性方程、检出限和定量限等信息如表1所示。这些数据表明，本发明提供的方法具有良好的线性关系、宽的线性范围、低的检测限以及高的检测灵敏度。
107.表1四乙二醇二甲醚化合物的线性方程、检出限和定量限
[0108][0109]
实施例2猪皮革中四乙二醇二甲醚的测定
[0110]
(1)取样和超声波萃取：将猪皮革样品用剪刀或碎布机裁切成2mm
×
2mm以下的小块样品，准确称取1.00g样品置于带螺旋盖子玻璃瓶(容积为40ml)中，加入10ml萃取溶剂丙酮，加盖旋紧，涡旋混匀后放入30℃的超声水浴中超声处理30min。收集上清液并用10ml丙
酮润洗残渣再次提取5min，合并样品萃取液于浓缩瓶中，用于后续浓缩操作。
[0111]
(3)浓缩：将浓缩瓶置于旋转蒸发仪上，在真空度550mbar，水浴温度40℃，转速20rpm条件下，蒸发浓缩至近干，用氮气吹干，加入3.0ml正己烷进行溶解，得到样品溶解液；
[0112]
(4)固相萃取柱净化：将样品溶解液转移至正己烷活化过的氧化铝柱中，通过施加负压使得样品溶解液流过氧化铝柱，氮气吹至干，用5ml洗脱溶剂甲醇洗脱，得到洗脱溶液。
[0113]
(5)浓缩富集：将洗脱溶液通过旋转蒸发仪或氮气吹扫浓缩至2ml，浓缩液用0.45μm孔径的聚四氟乙烯滤膜过滤，得到待测溶液。
[0114]
(6)气相色谱-质谱检测：将猪皮革样品待测溶液进样，按照设定好的气相色谱-质谱条件进行检测。
[0115]
所确定的色谱条件如下：
[0116]
色谱柱：db-5ms，规格为60m*0.25mm*0.25μm；
[0117]
进样口温度：280℃；
[0118]
升温程序：初始温度35℃，保持5min，而后以20℃/min升温至280℃，保持2min；
[0119]
载气：体积含量99.999％的高纯氦气，流速为1.0ml/min；
[0120]
进样体积：1.0μl；
[0121]
进样模式：分流进样，分流比为1:10；
[0122]
传输线温度：280℃。
[0123]
所确定的质谱条件如下：
[0124]
离子源温度：280℃；
[0125]
电离方式：电子电离(ei)；
[0126]
电离能力：70ev；
[0127]
溶剂延迟时间：4min；
[0128]
采集模式：scan+sim；
[0129]
scan质量扫描范围：40～250m/z；
[0130]
sim质量扫描：45，59，103，220m/z；
[0131]
定量离子为59m/z，定性离子为45、59、103、220m/z。
[0132]
图2为本实施例中猪皮革样品待测溶液中四乙二醇二甲醚的全扫描色谱图。由图2可知，猪皮革样品中四乙二醇二甲醚的保留时间是16.39min，得到的色谱峰尖锐，柱效高，准确度好。
[0133]
图3为本实施例中猪皮革样品待测溶液全扫描得到的四乙二醇二甲醚的质谱图，其特征离子峰m/z分别为45、59、103、220。通过对待测样品总离子流图的色谱峰进行谱库检索匹配，匹配度达82.66％，可以确定猪皮革待测样品中确实含有四乙二醇二甲醚。通过查看色谱峰特征离子的纯度，发现特征离子m/z 59信号最强，灵敏度高，因此确定采用选择离子检测(sim)法定性，提取m/z 59特征离子峰面积定量，得到猪皮革样品中四乙二醇二甲醚的含量为45.12mg/kg。
[0134]
实施例3牛皮革样品中四乙二醇二甲醚的测定
[0135]
(1)取样和超声波萃取：将牛皮革样品用剪刀或碎布机裁切成2mm
×
2mm以下的小块样品，准确称取18份1.00g样品分别置于带螺旋盖子玻璃瓶(容积为40ml)中，分别加入10ml萃取溶剂丙酮，在其中6个玻璃瓶中加入0.1ml 10mg/l的四乙二醇二甲醚标准溶液并
加盖旋紧，在其中另外6个玻璃瓶中加入0.2ml 10mg/l的四乙二醇二甲醚标准溶液并加盖旋紧，在剩余6个玻璃瓶中加入0.1ml 100mg/l的四乙二醇二甲醚标准溶液并加盖旋紧。分别涡旋混匀后，30℃的超声水浴中超声处理30min。分别收集上清液并用10ml丙酮润洗残渣再次提取5min，分别合并样品萃取液于18个浓缩瓶中，用于后续浓缩操作。
[0136]
(3)浓缩：分别将浓缩瓶置于旋转蒸发仪上，在真空度550mbar，水浴温度40℃，转速35rpm条件下，蒸发浓缩至近干，用氮气吹干，加入3.0ml正己烷进行溶解，得到样品溶解液；
[0137]
(4)固相萃取柱净化：将18个样品溶解液分别转移至18个正己烷活化过的未键和的硅胶柱中，通过施加负压使得样品溶解液流过硅胶柱，用氮气吹干硅胶柱，用5ml洗脱溶剂丙酮洗脱，得到18个样品的洗脱溶液。
[0138]
(5)浓缩富集：将18个样品洗脱溶液通过旋转蒸发仪或氮气吹扫浓缩至2ml，浓缩液用0.22μm孔径的聚四氟乙烯滤膜过滤，得到18个待测溶液。
[0139]
(6)气相色谱-质谱检测：将18个待测溶液分别进样，按照设定好的气相色谱-质谱条件对18个待测样品进行测定。
[0140]
所确定的色谱条件如下：
[0141]
色谱柱：db-5ms，规格为60m*0.25mm*0.25μm；
[0142]
进样口温度：280℃；
[0143]
升温程序：初始温度35℃，保持5min，而后以20℃/min升温至280℃，保持2min；
[0144]
载气：体积含量99.999％的高纯氦气，流速为1.0ml/min；
[0145]
进样体积：1.0μl；
[0146]
进样模式：不分流进样；
[0147]
传输线温度：280℃。
[0148]
所确定的质谱条件如下：
[0149]
离子源温度：280℃；
[0150]
电离方式：电子电离(ei)；
[0151]
电离能力：70ev；
[0152]
溶剂延迟时间：4min；
[0153]
采集模式：scan+sim；
[0154]
scan质量扫描范围：40～250m/z；
[0155]
sim质量扫描：45，59，103，220m/z；
[0156]
定量离子为59m/z，定性离子为45、59、103、220m/z。
[0157]
本实施例选取了皮革制品中常用的牛皮革作为样品，分别添加1.0、2.0、10.0mg/kg三个浓度水平的乙二醇二甲醚标准物质进行试验。牛皮革样品的加标回收率数据如表2所示。四乙二醇二甲醚物质的回收率在82.3％～103.6％之间，相对标准偏差在4.78％～7.35％范围，表明本发明提供的方法具有较好的精密度和准确度。
[0158]
表2牛皮革样品的加标回收率
[0159][0160]
实施例4羊皮革样品中四乙二醇二甲醚的测定
[0161]
(1)取样和超声波萃取：将羊皮革样品用剪刀或碎布机裁切成2mm
×
2mm以下的小块样品，准确称取1.00g样品置于带螺旋盖子玻璃瓶(容积为40ml)中，加入10ml萃取溶剂丙酮，加盖旋紧，涡旋混匀后放入30℃的超声水浴中超声处理30min。收集上清液并用10ml丙酮润洗残渣再次提取5min，合并样品萃取液于浓缩瓶中，用于后续浓缩操作。
[0162]
(3)浓缩：将浓缩瓶置于旋转蒸发仪上，在真空度550mbar，水浴温度40℃，转速20rpm条件下，蒸发浓缩至近干，用氮气吹干，加入3.0ml正己烷进行溶解，得到样品溶解液；
[0163]
(4)固相萃取柱净化：将样品溶解液转移至正己烷活化过的氧化铝柱中，通过施加负压使得样品溶解液流过氧化铝柱，吹氮气至干，用5ml洗脱溶剂丙酮洗脱，得到洗脱溶液。
[0164]
(5)浓缩富集：将洗脱溶液通过旋转蒸发仪或氮气吹扫浓缩至2ml，浓缩液用0.22μm孔径的聚四氟乙烯滤膜过滤，得到待测溶液。
[0165]
(6)气相色谱-质谱检测：将待测溶液进样，按照设定好的气相色谱-质谱条件对待测溶液进行连续9次的重复测定试验。
[0166]
所确定的色谱条件如下：
[0167]
色谱柱：db-5ms，规格为60m*0.25mm*0.25μm；
[0168]
进样口温度：280℃；
[0169]
升温程序：初始温度35℃，保持5min，而后以20℃/min升温至280℃，保持2min；
[0170]
载气：体积含量99.999％的高纯氦气，流速为1.0ml/min；
[0171]
进样体积：1.0μl；
[0172]
进样模式：不分流进样；
[0173]
传输线温度：280℃。
[0174]
所确定的质谱条件如下：
[0175]
离子源温度：280℃；
[0176]
电离方式：电子电离(ei)；
[0177]
电离能力：70ev；
[0178]
溶剂延迟时间：4min；
[0179]
采集模式：scan+sim；
[0180]
scan质量扫描范围：40～250m/z；
[0181]
sim质量扫描：45，59，103，220m/z；
[0182]
定量离子为59m/z，定性离子为45、59、103、220m/z。
[0183]
图4为本实施例中得到的待测溶液连续进样9次的四乙二醇二甲醚信号对比图，相对标准偏差为2.27％，由此表明了本发明提供的方法具有良好的稳定性。
[0184]
实施例5羊皮革样品未经净化和经净化处理后四乙二醇二甲醚的测定
[0185]
(1)取样和超声波萃取：将羊皮革样品用剪刀或碎布机裁切成2mm
×
2mm以下的小块样品，准确称取两份1.00g样品置于带螺旋盖子玻璃瓶a和玻璃瓶b中，分别加入10ml萃取
溶剂甲醇，加盖旋紧，分别涡旋混匀后放入30℃的超声水浴中超声处理30min。分别收集玻璃瓶a和玻璃瓶b中上清液，并分别用10ml甲醇润洗残渣再次提取5min，分别合并样品萃取液于浓缩瓶c和浓缩瓶d中，用于后续浓缩操作。
[0186]
(3)浓缩：将浓缩瓶c和d分别置于旋转蒸发仪上，在真空度200mbar，水浴温度40℃，转速35rpm条件下，蒸发浓缩至近干，用氮气吹干，加入2.0ml二氯甲烷进行溶解，得到样品溶解液e和样品溶解液f。其中样品溶解液f经0.22μm孔径的聚四氟乙烯滤膜过滤，得到待测溶液g；
[0187]
(4)固相萃取净化：将样品溶解液e转移至正己烷活化过的未键和的硅胶柱中，通过施加负压使得样品溶解液流过硅胶柱，用氮气吹干硅胶柱，用5ml洗脱溶剂丙酮洗脱，得到洗脱溶液h。
[0188]
(5)浓缩富集：将洗脱溶液h通过旋转蒸发仪或氮气吹扫浓缩至2ml，浓缩液用0.22μm孔径的聚四氟乙烯滤膜过滤，得到待测溶液i。
[0189]
(6)气相色谱-质谱检测：将待测溶液g和待测溶液i分别进样，按照设定好的气相色谱-质谱条件分别进行检测。
[0190]
所确定的色谱条件如下：
[0191]
色谱柱：db-5ms，规格为60m*0.25mm*0.25μm；
[0192]
进样口温度：280℃；
[0193]
升温程序：初始温度35℃，保持5min，而后以20℃/min升温至280℃，保持2min；
[0194]
载气：体积含量99.999％的高纯氦气，流速为1.0ml/min；
[0195]
进样体积：1.0μl；
[0196]
进样模式：不分流进样；
[0197]
传输线温度：280℃。
[0198]
所确定的质谱条件如下：
[0199]
离子源温度：280℃；
[0200]
电离方式：电子电离(ei)；
[0201]
电离能力：70ev；
[0202]
溶剂延迟时间：4min；
[0203]
采集模式：scan+sim；
[0204]
scan质量扫描范围：40～250m/z；
[0205]
sim质量扫描：45，59，103，220m/z；
[0206]
定量离子为59m/z，定性离子为45、59、103、220m/z。
[0207]
图5为本实施例中得到的羊皮样品超声提取溶液在未净化和经过固相萃取柱净化处理后检测得到的四乙二醇二甲醚的总离子流图；图6为本实施例中得到的羊皮样品超声提取溶液在未净化和经过固相萃取柱净化处理后检测得到的四乙二醇二甲醚的选择离子流图。
[0208]
由图5和图6可知，经过固相萃取柱净化处理后，采用气相色谱-质谱检测，样品杂质干扰少、选择性强，且检测准确性更高。
[0209]
针对现有技术中缺少对皮革中四乙二醇二甲基醚检测方法的缺陷，本发明提供了一种皮革中四乙二醇二甲醚的检测方法。该方法通过萃取、浓缩、净化、富集和气相色谱-质
谱检测，可以简单、准确、高灵敏地检测皮革中的四乙二醇二甲基醚，具有简单便捷、抗样品杂质干扰、选择性强、准确度高、灵敏性强、重现性好以及检测限低等优点，并且该方法具有良好的回收率和精密度，能够广泛应用于皮革中的四乙二醇二甲醚含量检测。
[0210]
应当理解的是，对上述实施例所用原料或试剂的用量进行等比例扩大或者缩小后的技术方案，与上述实施例的实质相同，均属于本发明的保护范围。
[0211]
此外，还需要说明的是，尽管在本文中已经对上述各实施例进行了描述，但并非因此限制本发明的专利保护范围。其中未尽详细描述的技术参数在本发明列举的参数范围内变化时，仍能够得到与上述实施例相同或相近的技术效果，仍属与本发明的保护范围。因此，基于本发明的创新理念，对本文所述实施例进行的变更和修改，或利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，直接或间接地将以上技术方案运用在其他相关的技术领域，均包括在本发明的专利保护范围之内。