一种龙虱的鉴定方法

1.本发明属于中药材鉴定技术领域，具体涉及一种龙虱的鉴定方法。


背景技术：

2.龙虱，又名泽劳、黑壳虫、水龟子、水鳖虫、射尿龟。成虫体长13～45mm，卵型或长卵型，前端略窄，黑色或深棕色；头部略扁，头部缩入前胸内；体背腹面拱起，复眼突出,触角丝状，11节，下颚须短；足3对，前足小，后足侧扁，有长毛。后足为游泳足，后基节与后胸腹板占据腹面的一大半，胸部腹面无针刺。龙虱体中主要含蛋白质、粗脂肪、总糖等。龙虱体内具有多种脂肪酸，以不饱和脂肪酸为主。龙虱体内含人体必需的cu、co、mn、se、s、ti、k、na、mg等多种微量元素。
3.龙虱性味与归经：味甘，微咸，性平，归肾经，膀胱经；功能与主治：补肾，缩尿，活血。主治小儿遗尿，老人年频，面部褐斑。
4.目前龙虱主要做食材用途，尚未收载到中药法定标准中，未建立龙虱的法定鉴定方法。


技术实现要素：

5.基于此，本发明的目的在于提供一种龙虱的鉴定方法，所述方法包括性状鉴别、显微鉴别和薄层色谱鉴别，具有准确性高，耐用性较好等优点，可作为龙虱的药用鉴定标准。
6.为达到上述目的，本发明采用如下技术方案。
7.一种龙虱的鉴定方法，所述鉴定方法包括以下步骤：
8.s1、性状鉴定：干燥的虫体，呈长卵形，全体有光泽；背面黑色；鞘翅边缘有棕黄色狭边；除去鞘翅，可见浅色的膜质翅1对；腹面红褐色至黑褐色；腹部有横纹；质松脆，气腥，味微咸；
9.s2、显微鉴定：本品粉末灰棕色或棕色；体壁碎片深棕色或黄色，表面有不规则纹理，偶见密布细小颗粒、圆形毛窝和瘤状突起，其上着生短粗或细长刚毛；刚毛棕黄色或黄色，多碎断，先端锐尖或钝圆，有的具纵直纹理，髓腔细窄；横纹肌纤维无色或淡黄色，常碎断，有细密的纵纹，平直或呈微波状，明带较暗带宽；
10.s3、薄层色谱鉴定：(1)取本品粉末，加乙醇超声处理，离心，取上清液作为供试品溶液；(2)取亮氨酸、赖氨酸和缬氨酸对照品，分别加乙醇制成亮氨酸、赖氨酸和缬氨酸对照品溶液；(3)吸取所述供试品溶液和对照品溶液，分别点于同一硅胶g薄层板上，以体积比为3:1:1的正丁醇-冰醋酸-水混合液作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色淸晰。
11.在其中一些实施例中，步骤(1)所述本品粉末与乙醇的料液比为1:10g/ml。
12.在其中一些实施例中，步骤(1)所述超声处理时间为15min。
13.在其中一些实施例中，步骤(2)所述亮氨酸、赖氨酸和缬氨酸对照品溶液的浓度分别为1mg/ml、1mg/ml和0.5mg/ml。
14.在其中一些实施例中，步骤(1)所述乙醇的体积分数为75％。
15.在其中一些实施例中，步骤(2)所述乙醇的体积分数为75％。
16.在其中一些实施例中，步骤(3)中供试品溶液和对照品溶液的点样体积分别为5～8μl和1μl。
17.本发明提供了一种龙虱的鉴定方法，所述鉴定方法从形状、规格、大小、表面或切面颜色、特征、质地、折断现象、气味和成分等全方位对龙虱进行鉴别，提高了鉴定方法的专属性和准确性。所述方法中薄层色谱鉴定以亮氨酸、赖氨酸和缬氨酸作为对照品，特异性较好，并进一步优化了相应的薄层色谱鉴定条件：以体积比为3:1:1的正丁醇-冰醋酸-水混合液作为展开剂，使得3种氨基酸标准品均能获得合适的rf值，薄层色谱图上斑点清晰可辨。本发明鉴定方法准确性高、耐用性较好，结果不受检测温度或湿度的影响，可作为龙虱的药用鉴定标准。
附图说明
18.图1为19009批号龙虱的性状图。
19.图2为19010批号龙虱的性状图。
20.图3为19013批号龙虱的性状图。
21.图4为19014批号龙虱的性状图。
22.图5为19015批号龙虱的性状图。
23.图6为龙虱粉末显微特征图；其中，1为体壁碎片，2为刚毛，3为横纹肌纤维。
24.图7为薄层色谱鉴定结果图。
25.图8为重金属含量检测结果图。
具体实施方式
26.本发明下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。实施例中所用到的各种常用化学试剂，均为市售产品。
27.除非另有定义，本发明所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不用于限制本发明。
28.本发明的术语“包括”和“具有”以及它们任何变形，意图在于覆盖不排他的包含。例如包含了一系列步骤的过程、方法、装置、产品或设备没有限定于已列出的步骤或模块，而是可选地还包括没有列出的步骤，或可选地还包括对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤。
29.在本发明中提及的“多个”是指两个或两个以上。“和/或”，描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，a和/或b，可以表示：单独存在a，同时存在a和b，单独存在b这三种情况。字符“/”一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。
30.下面结合具体实施例进行说明。
31.本发明所述本品为龙虱科昆虫龙虱的全虫，全年均可捕捉。捕得后，用沸水烫死，晒干。
32.本发明涉及的龙虱样品信息如表1所示：
33.表1 样品信息表
[0034][0035]
性状按样品实际情况进行描述，上述5批样品的性状图见图1～5。
[0036]
实施例1
[0037]
本实施例对表1中的样品进行鉴定。
[0038]
1、性状鉴定
[0039]
表1中的样品均为干燥的虫体，呈长卵形，全体有光泽；背面黑色；鞘翅边缘有棕黄色狭边；除去鞘翅，可见浅色的膜质翅1对；腹面红褐色至黑褐色；腹部有横纹；质松脆，气腥，味微咸。符合龙虱的性状鉴定标准。
[0040]
2、显微鉴定
[0041]
本品粉末灰棕色或棕色。体壁碎片深棕色或黄色，表面有不规则纹理，偶见密布细小颗粒、圆形毛窝和瘤状突起，其上着生短粗或细长刚毛；刚毛棕黄色或黄色，多碎断，先端锐尖或钝圆，有的具纵直纹理，髓腔细窄。横纹肌纤维无色或淡黄色，常碎断，有细密的纵纹，平直或呈微波状，明带较暗带宽。粉末显微特征图如图6所示。
[0042]
3、薄层色谱鉴定
[0043]
(1)取本品粉末lg，加75％乙醇10ml，超声处理15分钟，离心，取上清液作为供试品溶液；
[0044]
(2)另取亮氨酸对照品、赖氨酸对照品、缬氨酸对照品，分别加75％乙醇制成每lml含1mg、1mg、0.5mg的溶液，作为对照品溶液；
[0045]
(3)照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述供试品溶液5～8μl，对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(体积比为3:1:1)作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色淸晰。
[0046]
结果如图7所示，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点，且每个样品的斑点清晰可辨。本实施例使用亮氨酸、赖氨酸和缬氨酸作为对照品，特异性好。
[0047]
实施例2
[0048]
本实施例对表1中各批次龙虱样品的水分、总灰分、重金属含量和醇溶性浸出物进行检测。
[0049]
1、水分
[0050]
照水分测定法(中国药典2020年版通则0832第二法)测定。实测样品5批，结果为4.9％～12.6％，平均值9.4％(见表2)。
[0051]
表2 龙虱水分测定结果
[0052][0053]
2、总灰分
[0054]
照灰分测定法(中国药典2015年版通则2302)测定。实测样品5批，结果为2.4％～3.9％，平均值3.1％(见表3)。
[0055]
表3 龙虱总灰分测定结果
[0056][0057][0058]
3、重金属
[0059]
照重金属检查法(通则0821第二法)测定。实测样品5批，结果见图8。经比较样品比色管颜色都比重金属含量为30mg/kg的标准比色管颜色浅，1批(批号19010)的比色管颜色比重金属含量为20mg/kg的标准比色管颜色深。
[0060]
4、醇溶性浸出物
[0061]
以乙醇为溶剂，照醇溶性浸出物项下的热浸法(中国药典2015年版通则2201)测定，实测样品5批，结果为21.1～32.7％，平均值为24.8％(见表4)。
[0062]
表4龙虱浸出物测定结果
[0063][0064]
上述结果表明，上述5批样品质量较高，说明使用本发明方法可以鉴定并筛选出质量较好的龙虱。
[0065]
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对以上实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
[0066]
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。