技术特征：
1.一种神经节糖苷脂的鉴定方法，其特征在于，包括步骤：采用甲醇、水以及甲基叔丁基醚对待测样本中的神经节糖苷脂进行粗提取，得到粗提产物；使用负离子模式下数据依赖的质谱采集方法对粗提产物中的神经节糖苷脂进行质谱数据采集；对所述质谱数据先进行母离子与子离子的峰匹配，再进行特征碎片离子分析，随后进行与神经节糖苷脂结构鉴定相关的特征离子、中性丢失离子对及母核神经酰胺的输出，得到筛选后的神经节糖苷脂；对筛选后的神经节糖苷脂进行去重、加合峰剔除以及同位素峰剔除处理，得到保留的候选神经节糖苷脂；对所述候选神经节糖苷脂进行自动搜库或手动鉴定，完成对样本中神经节糖苷脂的鉴定。2.根据权利要求1所述神经节糖苷脂的鉴定方法，其特征在于，采用甲醇、水以及甲基叔丁基醚对样本中的神经节糖苷脂进行粗提取的步骤包括：将待测样本加入到由甲醇和水组成的第一混合溶液中，进行球磨处理后，得到匀浆液；将所述匀浆液加入到由水和甲基叔丁基醚组成的第二混合溶液中进行震荡处理，随后静置分层后取下层溶液并冻干，得到粗提产物。3.根据权利要求1所述神经节糖苷脂的鉴定方法，其特征在于，使用负离子模式下数据依赖的质谱采集方法对粗提产物中的神经节糖苷脂进行质谱数据采集的步骤包括：将所述粗提产物复溶后使用反相c
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柱进行色谱分离，并用含5mm乙酸铵的2％甲醇和水作为a相，用含5mm乙酸铵的50％甲醇和异丙醇作为b相，所述a相和b相作为流动相，分离梯度为b相在20分钟内由5％线性增加到95％；在负离子采集模式下于600-1800m/z范围内自动获取强度最高的22个离子进行ms/ms谱图采集。4.根据权利要求3所述神经节糖苷脂的鉴定方法，其特征在于，所述在负离子采集模式下于600-1800m/z范围内自动获取强度最高的22个离子进行ms/ms谱图采集的步骤中，设置质谱采集参数为：一级质谱采集分辨率70000，二级质谱采集分辨率17500；一级质谱采集agc靶标设定在3e6，二级质谱采集agc靶标设定在1e5；一级质谱采集和二级质谱采集的最大it分别设定在200ms及50ms；二级质谱采集碰撞能分别设定为10，15，20，25，30，35ev。5.根据权利要求1所述神经节糖苷脂的鉴定方法，其特征在于，对所述质谱数据进行母离子与子离子的峰匹配后，输出含有母离子、子离子、保留时间、电荷信息的所有化合物列表。6.根据权利要求1所述神经节糖苷脂的鉴定方法，其特征在于，所述特征碎片离子分析是指对含有n-乙酰神经氨酸和n-甘氨酰神经氨酸的特征碎片离子进行神经节糖苷脂筛选。7.根据权利要求1所述神经节糖苷脂的鉴定方法，其特征在于，对所述候选神经节糖苷脂进行自动搜库或手动鉴定的步骤中，设定母离子质量偏差小于5ppm，设定特征碎片离子小于20ppm。8.一种神经节糖苷脂的鉴定方法在筛查阿尔茨海默症诊断标志物方法中的应用，其特征在于，包括步骤：
将鉴定到的神经节糖苷脂进行峰面积提取，经过总峰面积归一化后使用非参数检验及最小二乘判别中神经节苷脂的投影和s图中的变量重要性，筛查与阿尔兹海默症患病时间相关的神经节糖苷脂标志物。
技术总结
本发明公开一种神经节糖苷脂的鉴定方法及其应用，其中，鉴定方法包括步骤：对待测样本中的神经节糖苷脂进行粗提取，得到粗提产物；对粗提产物中的神经节糖苷脂进行质谱数据采集；对质谱数据先进行母离子与子离子的峰匹配，再进行特征碎片离子分析，随后进行与神经节糖苷脂结构鉴定相关的特征离子、中性丢失离子对及母核神经酰胺的输出，得到筛选后的神经节糖苷脂；对筛选后的神经节糖苷脂进行去重、加合峰剔除以及同位素峰剔除处理，得到保留的候选神经节糖苷脂；对候选神经节糖苷脂进行自动搜库或手动鉴定，完成对样本中神经节糖苷脂的鉴定。本发明方法可用于快速筛选、定性和准确定量分析复杂生物基质中的低丰度神经节糖苷脂。苷脂。苷脂。
技术研发人员：李华
受保护的技术使用者：南方科技大学
技术研发日：2022.05.26
技术公布日：2022/8/30