一种丙硫菌唑中间体的含量分析方法与流程

1.本发明涉及化工检测分析技术领域，具体涉及一种丙硫菌唑中间体，也就是2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐的含量分析方法。


背景技术：

2.丙硫菌唑是一种新型广谱三唑硫酮类杀菌剂，主要用于防治谷类、麦类豆类等作物的多种病害，丙硫菌唑毒性低、无致畸，对胚胎无毒性，对人和环境安全等特点，使其符合21世纪农药发展的新趋势，也成为近几年农药领域的研究热点。
3.2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐作为丙硫菌唑的关键中间体，经查阅国内外有关文献，目前其定量检测方法仍处于空白状态。对其进行准确定量直接影响下一步反应的进行，所以寻找到一个简便可行且准确度高的分析方法是目前保证反应顺利进行的重要前提。
4.基于此，为满足高质量农药原药丙硫菌唑的生产要求，需要提供一种相应的含量分析检测方法。


技术实现要素：

5.针对2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐的定量检测方法尚处于空白状态的技术问题，本发明提供一种含量分析方法，具体采用反相高效液相色谱分析方法。本方法专属性强，精密度好，回收率高，特别适用于农药原药中间产品的质量控制，从而满足高质量农药原药丙硫菌唑的生产要求。
6.本发明技术方案如下：
7.一种丙硫菌唑中间体的含量分析方法，丙硫菌唑中间体为2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐，含量分析方法具体包括如下步骤：
8.(1)用甲醇作溶剂分别溶解标准物质和待测样品，配制标样和试样；
9.(2)将高效液相色谱的检测波长设定为215nm，以体积比为35～45：65～55的乙腈和0.1％三氟乙酸水溶液混合体系为流动相，
10.分别对标样和试样的2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐峰面积进行平均，得其峰面积平均值；
11.按照下式对2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐的质量分数进行计算：
[0012][0013]
式中：
[0014]
a1——标样中，2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐峰面积的平均值；
[0015]
a2——试样中，2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐峰面积的
平均值；
[0016]
m1——标样的质量；
[0017]
m2——试样的质量；
[0018]
p1——标样中2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐的质量分数；
[0019]
x1——试样中2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐的质量分数。
[0020]
进一步的，色谱柱为durashell c18(l)不锈钢柱。
[0021]
进一步的，色谱柱的柱长为25cm。
[0022]
进一步的，色谱柱以粒径为5μm的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。
[0023]
进一步的，色谱柱温度为38～45℃。
[0024]
进一步的，流动相的流速为0.8～1.3ml/min。
[0025]
进一步的，仪器基线稳定后按标样、试样、试样、标样的顺序依次进样。
[0026]
进一步的，为了达到更好的检测效果和准确度，每次进样的样品体积为5μl。
[0027]
本发明的有益效果在于，本发明提供了一种检测2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐的质量分数的方法，采用上述方法检测2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐的质量分数，色谱峰形好，积分计算结果准确、重复性好，所得的结果可信度高，特别适用于农药原药中间产品的质量控制，对保证最终产品的质量具有重要作用和现实意义，所得结果更加准确及时，为丙硫菌唑的生产提供了有力的数据支持。
附图说明
[0028]
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，对于本领域普通技术人员而言，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0029]
图1是实施例1中标样色谱图。
[0030]
图2是实施例1中试样色谱图。
[0031]
图3是实施例2中标样色谱图。
[0032]
图4是实施例2中试样色谱图。
[0033]
图5是对比例1中标样色谱图。
[0034]
图6是对比例2中标样色谱图。
[0035]
图7是验证例2中线性关系图。
具体实施方式
[0036]
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
[0037]
以下实施例所采用的高效液相色谱仪为岛津公司的lc-20at输液泵和spd-20a紫
外检测器。
[0038]
实施例1
[0039]
小试样品20210105批，得到固体59g，对产品中2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐含量进行分析。
[0040]
标样配制
[0041]
准确称取2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐标样0.0526g，置于100ml容量瓶中，加80ml甲醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到试样备用。
[0042]
试样配制
[0043]
准确称取含2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐试样0.0512g，置于100ml容量瓶中，加80ml甲醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到试样备用。
[0044]
测试与数据处理
[0045]
开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，连续注入数针标样，计算各针相对响应值，达到相邻两针相对响应值变化小于1.5％之后，按标样、试样、试样、标样的顺序依次进样，以体积比为40：60的乙腈：0.1％三氟乙酸水溶液为流动相，流速为1ml/min，检测波长为215nm，进样体积为5μl。
[0046]
色谱柱条件：采用粒径为5μm的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱durashell c18(l)，柱长25cm，理论塔板数5000，柱温为40℃。
[0047]
标样和试样的色谱图如图1和图2所示，获得数据如下：
[0048]
表1实施例1检测结果
[0049][0050][0051]
带入公式x1＝(a2×
m1×
p1)/(a1×
m2)，计算可得试样的质量分数为98.2％。
[0052]
实施例2
[0053]
小试样品20211002批，得到固体89g，对产品中2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐含量进行分析。
[0054]
标样配制
[0055]
准确称取2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐标样0.0542g，置于100ml容量瓶中，加80ml甲醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到试样备用。
[0056]
试样配制
[0057]
准确称取含2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐试样0.0534g，置于100ml容量瓶中，加80ml甲醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到
试样备用。
[0058]
测试与数据处理
[0059]
开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，连续注入数针标样，计算各针相对响应值，达到相邻两针相对响应值变化小于1.5％之后，按标样、试样、试样、标样的顺序依次进样，以体积比为40：60的乙腈：0.1％三氟乙酸水溶液为流动相，流速为1ml/min，检测波长为215nm，进样体积为5μl。
[0060]
色谱柱条件：采用粒径为5μm的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱durashell c18(l)，柱长25cm，理论塔板数5000，柱温为40℃。
[0061]
标样和试样的色谱图如图3和图4所示，获得数据如下：
[0062]
表2实施例2检测结果
[0063][0064]
带入公式x1＝(a2×
m1×
p1)/(a1×
m2)，计算可得样品的质量分数为97.6％。
[0065]
为验证本发明方法的可行性和准确性，进行如下对比试验：
[0066]
对比例1
[0067]
称取0.0520g 2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐标准物质置于100ml容量瓶中，加80ml甲醇，超声波振荡溶解，冷却至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到标样溶液。
[0068]
开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，连续注入数针标样，以体积比40：60的乙腈：0.8％冰乙酸水溶液为流动相，流速为1ml/min，检测波长为215nm，进样体积为5μl。
[0069]
色谱柱条件：采用粒径为5μm的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱durashell c18(l)，柱长25cm，理论塔板数3000，柱温为40℃。
[0070]
色谱图如图5所示，获得数据如下：
[0071]
表3对比例1检测结果
[0072] 1234峰面积3195730302313129606272763128
[0073]
采用上述检测条件，样品吸附在色谱柱上峰面积变化较大，影响检测样品含量，故此方法不可行。
[0074]
对比例2
[0075]
称取0.0513g 2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐标准物质置于100ml容量瓶中，加80ml甲醇，超声波振荡溶解，冷却至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到标样溶液。
[0076]
开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，连续注入数针标
样，计算各针相对响应值，达到相邻两针相对响应值变化小于1.2％时，按照标样、试样、试样、标样的顺序依次进样分析，以体积比40：60的乙腈：0.1％三氟乙酸水溶液为流动相，流速为1ml/min，检测波长为215nm，进样体积为5μl。
[0077]
色谱柱条件：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱vp-ods，柱长150mm，理论塔板数3000，柱温为40℃。
[0078]
色谱图如图6所示，采用上述检测条件，样品色谱图峰宽大且拖尾严重，需要更换有封端的色谱柱。
[0079]
为验证本发明方法的可行性和准确性，进行如下验证试验：
[0080]
验证例1重复性验证
[0081]
标样配制
[0082]
称取0.0511g 2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐标准物质置于100ml容量瓶中，加80ml甲醇，超声波振荡溶解，冷却至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到标样。
[0083]
试样配制
[0084]
称取含2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐试样6份，分别置于100ml容量瓶中，加80ml甲醇，超声波振荡溶解，冷却至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到6组平行试样。
[0085]
测试与数据处理
[0086]
开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，在215nm波长下进行测定，色谱条件同实施例1。
[0087]
按照公式x1＝(a2×
m1×
p1)/(a1×
m2)，计算6组待测样品中2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐含量，结果如下表4所示，说明本发明方法重复性良好。
[0088]
表4验证例1检测结果
[0089][0090]
验证例2线性关系验证
[0091]
称取2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐标准物质置于100ml容量瓶中，加80ml甲醇，超声波振荡溶解，冷却至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到一组浓度为0.272mg/ml、391mg/ml、457mg/ml、528mg/ml、691mg/ml的2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐试样。
[0092]
开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，在215nm波长下进
行测定，色谱条件同实施例1。
[0093]
结果如下表5所示。
[0094]
表5验证例2检测结果
[0095]
序号称样量g浓度mg/ml峰面积1峰面积2平均峰面积10.02720.27216874521683408168543020.03910.39124178632412825241534430.04570.45728249682831050282800940.05280.52832642373272549326839350.06910.691428041242790734279742.5
[0096]
以峰面积对样品浓度作线性回归，如图7所示，得到的回归方程为y＝6196113.4350x-3158.1651，r2＝1.0000，可见对2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐在200～700μg/ml范围内线性关系良好。
[0097]
验证例3精密度验证
[0098]
不同人员准确称取2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐0.05g(精确至0.0002g)试样6份，分别置于100ml容量瓶中，加80ml甲醇，超声波振荡溶解，冷却至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到一组中间精密度试验用试样。
[0099]
开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，在215nm波长下进行测定，色谱条件同实施例1。
[0100]
按照公式x1＝(a2×
m1×
p1)/(a1×
m2)，计算6组待测样品中2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐含量，结果如下表6所示，说明本发明方法精密度良好。
[0101]
表6验证例3检测结果
[0102][0103]
验证例4稳定性验证
[0104]
称取2-(1-氯环丙基)-1-(2-氯苯基)-3-肼基-2-丙醇盐酸盐0.0527g(精确至0.0002g)置于100ml容量瓶中，加80ml甲醇，超声波振荡溶解，冷却至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到一组时间稳定性试验用试样。
[0105]
开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，分别在0、1、2、4、8、24h进样，在215nm波长下进行测定，色谱条件同实施例1。
[0106]
检测结果如下表7所示，说明本发明方法时间稳定性良好。
[0107]
表7验证例4检测结果
[0108]
时间0h1h2h4h8h24hrsd％峰面积3256676325445032575063253312325518932533640.07
[0109]
验证例5加标回收率性验证
[0110]
取实施例1小试样品20210105批，称取标样0.0526g，分别称取五个不同质量的待测样品，并加入不同质量的标样。
[0111]
开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，在215nm波长下进行测定，色谱条件同实施例1；
[0112]
检测结果如下表8所示，计算加入标样的回收率，回收率均在98％-102％之间，平均回收率为99.13％，表明该实验回收率符合要求，说明本发明方法加标回收率良好。
[0113]
表8验证例5检测结果
[0114][0115][0116]
尽管通过参考附图并结合优选实施例的方式对本发明进行了详细描述，但本发明并不限于此。在不脱离本发明的精神和实质的前提下，本领域普通技术人员可以对本发明的实施例进行各种等效的修改或替换，而这些修改或替换都应在本发明的涵盖范围内/任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以权利要求所述的保护范围为准。