细胞分类及计数方法、系统及样本分析仪与流程

1.本发明涉及血细胞检测领域，尤其涉及一种细胞分类及计数方法、系统及样本分析仪。


背景技术：

2.网织红细胞(reticulocyte，ret)是红细胞的未成熟阶段，是反映骨髓红系造血功能以及判断贫血和相关疾病疗效的重要指标。相关技术中的血细胞分析仪，大多采用阻抗法、鞘流阻抗法、及荧光散射法进行红细胞、血小板的分类及计数；其中，阻抗法利用库尔图原理进行检测，即细胞通过微孔时导致电压发生变化，电压幅度与细胞体积有关，通过体积大小区分血小板及红细胞，但不能区分成熟红细胞及网织红细胞等参数。现有的ret通道结合荧光染色和激光流式细胞技术，大多存在粒子团在前向散射离散程度高，分布宽度宽等问题，临床表现上导致参数网织红细胞血红蛋白含量ret-he准确性不高，血小板计数值偏低等问题。
3.因此，有必要提出一种提高细胞分类及计数结果的准确性的解决方案。


技术实现要素：

4.本发明的主要目的在于提供一种细胞分类及计数方法、系统及样本分析仪，旨在提高细胞分类及计数结果的准确性。
5.为实现上述目的，本发明提供一种细胞分类及计数方法，所述细胞分类及计数方法应用于样本分析仪，所述细胞分类及计数方法包括以下步骤：
6.获取全血样本；
7.将所述全血样本进行稀释，获得稀释后的第一样本液和第二样本液；
8.将所述第一样本液输送至rbc检测模块进行检测以得到第一检测结果；和/或
9.将所述第二样本液输送至ret检测模块，控制所述第二样本液在检测组件内形成在第一预设范围内的稳定流，同时控制鞘液的压力在第二预设范围内以使得第二样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面，以得到第二检测结果；
10.其中，所述第二样本液的稀释比例大于或等于500:1且小于或等于5000:1。
11.可选地，所述将所述第二样本液输送至ret检测模块，控制所述第二样本液在检测组件内形成在第一预设范围内的稳定流，同时控制鞘液的压力在第二预设范围内以使得第二样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面的步骤包括：
12.将所述第二样本液输送至ret检测模块；
13.控制所述第二样本液在检测组件内形成宽度在10μm～25μm范围内的稳定流；
14.控制鞘液的压力在70kpa～110kpa范围内以使得第二样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面。
15.可选地，所述将所述全血样本进行稀释，获得稀释后的第一样本液和第二样本液的步骤包括：
16.吸取所述全血样本，将第一预设量的全血样本分配至第一反应池中，将第二预设量的全血样本分配至第二反应池中；
17.向所述第一反应池分配稀释试剂，并将所述稀释试剂与所述全血样本混合均匀，得到所述第一样本液；
18.向所述第二反应池分配所述稀释试剂及处理试剂，并将所述稀释试剂、所述处理试剂及所述全血样本混合均匀，得到所述第二样本液。
19.可选地，所述将所述全血样本进行稀释，获得稀释后的第一样本液和第二样本液的步骤包括：
20.采用稀释试剂对所述全血样本进行一次稀释，得到预稀释样本液；
21.将所述预稀释样本液注入第一反应池中，采用所述稀释试剂对所述预稀释样本液进行二次稀释，得到所述第一样本液；
22.将所述预稀释样本液注入第二反应池中，加入处理试剂与所述预稀释样本液混合均匀，得到所述第二样本液。
23.可选地，所述采用稀释试剂对所述全血样本进行一次稀释，得到预稀释样本液的步骤包括：
24.吸取所述全血样本，将第三预设量的全血样本分配至预稀释池中；
25.向所述预稀释池分配所述稀释试剂，以对所述全血样本进行一次稀释，得到所述预稀释样本液。
26.可选地，所述将所述全血样本进行稀释，获得稀释后的第一样本液和第二样本液的步骤包括：
27.采用稀释试剂对所述全血样本进行一次稀释，得到预稀释样本液；
28.将所述预稀释样本液注入第一反应池中，采用所述稀释试剂对所述预稀释样本液进行二次稀释，得到所述第一样本液；
29.采用处理试剂对所述第一样本液进行混合，得到所述第二样本液。
30.可选地，所述采用处理试剂对所述第一样本液进行混合，得到所述第二样本液的步骤包括：
31.将所述第一样本液注入ret反应池中；
32.向所述ret反应池中注入所述处理试剂，其中，所述处理试剂包括包括溶血剂及染料；
33.将得到处理试剂与所述第一样本液混合均匀，得到所述第二样本液。
34.此外，为实现上述目的，本发明还提供一种细胞分类及计数系统，所述细胞分类及计数系统包括：
35.稀释单元，用于获取全血样本，并将所述全血样本进行稀释，获得稀释后的第一样本液和第二样本液；
36.控制单元，用于将所述第一样本液输送至rbc检测模块进行检测以得到第一检测结果；将所述第二样本液输送至ret检测模块，控制所述第二样本液在检测组件内形成在第一预设范围内的稳定流，同时控制鞘液的压力在第二预设范围内以使得第二样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面，以得到第二检测结果；
37.检测单元，用于获得所述第一检测结果及所述第二检测结果。
38.此外，为实现上述目的，本发明还提供一种细胞分类及计数系统，所述细胞分类及计数系统包括：
39.稀释单元，用于获取全血样本，并将所述全血样本进行稀释，获得稀释后的第一样本液和第二样本液；
40.控制单元，用于将所述第一样本液输送至rbc检测模块进行检测以得到第一检测结果；将所述第二样本液输送至ret检测模块，控制所述第二样本液在检测组件内形成在第一预设范围内的稳定流，同时控制鞘液的压力在第二预设范围内以使得第二样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面，以得到第二检测结果；
41.检测单元，用于获得所述第一检测结果及所述第二检测结果。
42.此外，为实现上述目的，本发明还提供一种样本分析仪，所述样本分析仪包括：
43.样本液供液组件、检测组件、鞘流供液组件以及分别与样本液供液组件和检测组件连通的驱动组件，所述驱动组件包括第一驱动件以及第二驱动件；
44.所述样本液供液组件用于将血样稀释至第一预设比例以得到待检测样本液，所述第一预设比例大于或等于500:1且小于或等于5000:1；
45.所述检测组件的第一端与所述第一驱动件相连通，用于驱动待检测样本液在管道内形成在第一预设范围内的稳定流以流入所述检测组件；
46.所述检测组件的第二端与所述鞘流供液组件相连通，用于向所述检测组件提供检测所需的鞘液；
47.所述检测组件的第三端与所述第二驱动件相连通，用于控制鞘液的管道内压力在第二预设范围内以使得所述待检测样本液能在所述鞘液的包裹下以层流状态通过所述检测组件的检测面。
48.可选地，所述样本液供液组件包括ret反应池、试剂液桶，以及第一控制阀，所述ret反应池的进液口与所述试剂液桶通过第一管路相连，所述第一控制阀设置在所述ret反应池与所述试剂液桶之间，用于控制加入所述ret反应池中稀释液或试剂的液量以形成所述待检测样本液。
49.可选地，所述第一驱动件的一端通过第二控制阀与所述ret反应池的出液口相连通，所述第一驱动件的第二端与所述检测组件的第一端相连通；所述第二驱动件通过第三控制阀与所述检测组件的第三端相连通；
50.所述第一驱动件为正压源，所述第二驱动件为负压源。
51.可选地，所述鞘流供液组件包括鞘流液桶以及与所述检测组件相连通的第三控制阀，所述第一驱动件为注射器，所述第二驱动件为负压泵。
52.可选地，所述样本分析仪还包括预稀释组件，所述预稀释组件包括稀释液桶、第五控制阀和预稀释池，所述第五控制阀设置在所述稀释液桶和所述预稀释池之间，所述预稀释池的出液口与所述ret反应池的进液口相连通。
53.可选地，所述预稀释组件还包括定量组件，所述定量组件设置于所述预稀释池和所述ret反应池之间，用于控制所述预稀释池输入所述ret反应池中的所述待检测样本液的液量。
54.可选地，所述第一驱动组件控制所述待检测样本液在管道内形成宽度在10μm～25μm范围内的稳定流；所述第二驱动组件控制鞘液的压力在70kpa～110kpa范围内以使得所
述待检测样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面。
55.本发明实施例提出的一种细胞分类及计数方法、系统及样本分析仪，通过对全血样本按照大于或等于500:1且小于或等于5000:1的稀释比例稀释得到第二样本液，在进行ret检测时，控制所述第二样本液在检测组件内形成在第一预设范围内的稳定流，同时控制鞘液的压力在第二预设范围内以使得第二样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面，得到第二检测结果；本技术采用的技术方案，通过对全血样本的稀释和对检测过程样本液与鞘液的压力、液流进行控制，不仅降低血细胞浓度，提高了检测模块的通道粒子计数及分类的准确性，降低了高浓度粒子检测对光学检测系统和数据采集系统的要求，并且减少了血样样本的用量。
附图说明
56.图1为本发明一示例性实施例的流程示意图；
57.图2为图1实施例中步骤s40的具体流程示意图；
58.图3为图1实施例中步骤s20的第一流程示意图；
59.图4为本发明实施例中的第一稀释检测方案的流程示意图；
60.图5为图1实施例中步骤s20的第二流程示意图；
61.图6为本发明实施例中的第二稀释检测方案的流程示意图；
62.图7为图1实施例中步骤s20的第三流程示意图；
63.图8为本发明实施例中的第三稀释检测方案的流程示意图；
64.图9为本发明实施例中样本分析仪的第一结构示意图；
65.图10为本发明实施例中样本分析仪的第二结构示意图；
66.图11为本发明实施例中样本分析仪的第三结构示意图。
67.本发明目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。
具体实施方式
68.应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
69.本发明实施例的主要解决方案是：通过获取全血样本；将所述全血样本进行稀释，获得稀释后的第一样本液和第二样本液；将所述第一样本液输送至rbc检测模块进行检测以得到第一检测结果；和/或将所述第二样本液输送至ret检测模块，控制所述第二样本液在检测组件内形成在第一预设范围内的稳定流，同时控制鞘液的压力在第二预设范围内以使得第二样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面，以得到第二检测结果；其中，所述第二样本液的稀释比例大于或等于500:1且小于或等于5000:1。通过对全血样本进行稀释，可以降低血细胞浓度，有助于提高检测模块的通道粒子计数及分类的准确性，同时可降低高浓度粒子检测对光学检测系统和数据采集系统的要求，并且可在采集量不变的情况下增加血液样本的样本量。通过对样本液与鞘液的压力进行控制，可以保证样本流内细胞粒子独立有序通过检测面，进一步提高细胞分类及计数结果的准确性。
70.本发明实施例涉及的技术术语：
71.红细胞(red blood cell，rbc)：红细胞或红血球，在常规化验中英文常缩写为rbc，是血液中为数最多的一类血细胞，同时也是脊椎动物体内通过血液运送氧气的最主要
的媒介，同时还存在免疫功能；
72.网织红细胞(reticulocyte，ret)：是红细胞的未成熟阶段，是反映骨髓红系造血功能以及判断贫血和相关疾病疗效的重要指标。
73.由于现有的血细胞分析仪中，大多采用阻抗法、鞘流阻抗法、及荧光散射法进行红细胞、血小板的分类及计数；其中，阻抗法利用库尔图原理进行检测，即细胞通过微孔时导致电压发生变化，电压幅度与细胞体积有关，通过体积大小区分血小板及红细胞，但不能区分成熟红细胞及网织红细胞等参数；鞘流阻抗法利用流式细胞术，检测原理同上，鞘流阻抗信号质量、堵孔率等情况要优于传统的电阻抗法，但仍不能区分成熟红细胞及网织红细胞等参数。ret通道结合荧光染色和激光流式细胞技术，荧光染料首先与细胞内的核酸物质结合，之后待测样本在鞘液包裹下进入流动室并通过光学检测区域，激光照射到细胞上会发生散射，其中前向散射信号表征细胞体积大小，侧向散射信号体现细胞内部颗粒复杂度，荧光信号反映细胞内核酸含量。通过分析散射和荧光信号可以获得细胞大小、细胞内部复杂度、荧光强度等信息，根据不同种类细胞分布特性从而达到区分成熟红细胞和网织红细胞的目的。
74.ret通道采用鞘流散射技术，利用样本针及动力源推送样本到流动室内，通过鞘流形成保护液包裹样本流使得样本流内红细胞及血小板依次排序通过检测面。血样中红细胞数量远多于血小板，且红细胞体积较血小板大，在细胞通过检测面时，血小板细胞粒子常被红细胞遮挡，导致血小板粒子被漏识别，红细胞常并列或重叠通过检测面。当红细胞并列或重叠通过检测面时，导致部分红细胞粒子前向散射强度假性增大，从而影响粒子团散点图表现，影响ret-he参数及ret％的参数划分。目前ret通道一般通过采样针机外吸取全血样本，移动并分样到ret通道反应池反应后进行检测。检测后通过模数转换，信号处理后输出fs(前向散射强度)、ss(侧向散射强度)、fl(荧光强度)三维散点图。市面上的ret通道大多存在粒子团在前向散射离散程度高，分布宽度宽等问题，临床表现上导致参数ret-he准确性不高，血小板计数值偏低等问题。
75.本发明提供一种解决方案，基于荧光散射法，提出一种新的ret检测方案，能够提升红细胞、血小板计数及分类准确性，显著提升ret-he检测结果。
76.本实施例方法的执行主体可以为一种样本分析仪等，本实施例以样本分析仪进行举例。
77.参照图1，图1为本发明细胞分类及计数方法一示例性实施例的流程示意图。细胞分类及计数方法包括：
78.步骤s10，获取全血样本；
79.具体地，在获取全血样本之前，需先采集全血样本，为防止采集到的全血样本凝固，可加入适当的抗凝剂。获取到的全血样本中包含网织红细胞以及血小板等，网织红细胞(reticulocyte，ret)是红细胞的未成熟阶段，是反映骨髓红系造血功能以及判断贫血和相关疾病疗效的重要指标；血小板是从骨髓成熟的巨核细胞胞浆裂解脱落下来的小块胞质。巨核细胞虽然在骨髓的造血细胞中为数最少，仅占骨髓有核细胞总数的0.05％，但其产生的血小板却对机体的止血功能极为重要，血小板的数量可以反映机体的凝血能力。在本发明实施例中，通过样本分析仪可以有效对全血样本中的网织红细胞及血小板进行计数与分类。
80.步骤s20，将全血样本进行稀释，获得稀释后的第一样本液和第二样本液；
81.具体的，获取到全血样本后，为防止检测过程中红细胞并列或重叠通过检测面，可采取稀释的方式降低血细胞的浓度，采用预先配置的稀释试剂对全血样本进行若干次稀释，使稀释试剂与全血样本的稀释比达到预设稀释范围，得到稀释样本液。可以通过至少二次稀释，也可以通过单次稀释，使得最终稀释试剂与样本量的稀释比达到预设稀释范围，在本发明实施例中，稀释得到的第一样本液可用于进行rbc检测，第二样本液可用于进行ret检测，其中，第二样本液中稀释试剂与样本量的稀释比大于或等于500:1且小于或等于5000:1。将全血样本稀释后，不仅可以降低血细胞的浓度以防止血细胞重叠通过检测面，还可以增加样本量，以用于其他检测，避免检测过程需要多次采集样本或采集较多的全血样本。
82.步骤s30，将第一样本液输送至rbc检测模块进行检测以得到第一检测结果；
83.经过稀释得到第一样本液后，可通过动力源输送适量的第一样本液至rbc检测模块进行检测，rbc检测模块可对第一样本液中的红细胞进行计数，从而得到第一检测结果。
84.步骤s40，将第二样本液输送至ret检测模块，控制第二样本液在检测组件内形成在第一预设范围内的稳定流，同时控制鞘液的压力在第二预设范围内以使得第二样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面，以得到第二检测结果。
85.将经过稀释得到的第二样本液输送到ret检测模块，可以对网织红细胞进行检测，在检测过程中，需要通过动力源控制样本流及鞘液到平衡状态，控制样本流形成第一预设范围的稳定流，例如10μm～25μm宽度的稳定流，保证样本流内细胞粒子独立有序通过检测面；同时保证鞘液压力范围在第二预设范围内，例如70kpa～110kpa内，使流动室内流动状态为层流状态，保证样本流内细胞粒子独立有序通过检测面。
86.需要说明的是，本发明实施例中并不限定s20-s40的先后顺序，本实施例中，既可以先进行s30步骤中的rbc检测再进行s40步骤中的ret检测，也可以先进行s40步骤中的ret检测再进行s30步骤中的rbc检测，又可以两种检测同时进行，还可以只进行其中一种检测。
87.在本实施例中，通过获取全血样本并进行稀释，获得稀释后的第一样本液和第二样本液；将第一样本液输送至rbc检测模块进行检测以得到第一检测结果；和/或将第二样本液输送至ret检测模块，控制第二样本液在检测组件内形成在第一预设范围内的稳定流，同时控制鞘液的压力在第二预设范围内以使得第二样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面，以得到第二检测结果；其中，第二样本液的稀释比例大于或等于500:1且小于或等于5000:1。通过对全血样本的稀释和对检测过程样本液与鞘液的压力、液流进行控制，可以使得样本流中的细胞粒子能够独立有序的通过检测面，提高了检测模块通道粒子计数及分类的准确性，降低了高浓度粒子检测对光学检测系统和数据采集系统的要求，并且减少了血样样本的用量。
88.参照图2，图2为图1实施例中步骤s40的具体流程示意图。本实施例基于上述图1所示的实施例，在本实施例中，上述步骤s40包括：
89.步骤s401，将第二样本液输送至ret检测模块；
90.具体地，通过稀释得到第二样本液后，由采样分配模块控制采样针到预稀释池内，吸取预稀释池内的定量稀释样本液，如50μl，之后样本针移动至ret检测模块反应容器处，通过采样分配模块的采样注射器向ret反应容器内分配吸取的第二样本液。
91.步骤s402，控制第二样本液在检测组件内形成宽度在10μm～25μm范围内的稳定流；
92.进一步地，在检测过程中，通过动力源控制样本流及鞘液到平衡状态，控制样本流形成10μm～25μm宽度的稳定流，保证样本流内细胞粒子独立有序通过检测面，以进行实验粒子团检测。
93.步骤s403，控制鞘液的压力在70kpa～110kpa范围内以使得第二样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面。
94.更进一步地，通过鞘液形成保护液包裹样本流使得样本流内红细胞及血小板依次排序通过检测面，在此过程中，需保证鞘液压力范围在70kpa～110kpa内，保证流动室内流动状态为层流状态，保证样本流内细胞粒子独立有序通过检测面，以进行实验粒子团检测，得到第二检测结果，其中，第二检测结果即为ret检测的结果，由此，通过对血样的稀释，以及通过对鞘液和液流压力的控制，可以避免在ret检测时血小板细胞粒子常被红细胞遮挡，可以提高血小板粒子的识别准确度，提高粒子团散点图的表现，使得ret-he参数及ret％的参数划分更加准确，从而提高了粒子分类和检测结果的准确度。
95.参照图3，图3为图1实施例中步骤s20的第一流程示意图。本实施例基于上述图1所示的实施例，在本实施例中，上述步骤s20包括：
96.步骤s201，吸取全血样本，将第一预设量的全血样本分配至第一反应池中，将第二预设量的全血样本分配至第二反应池中；
97.具体地，参照图4，图4为本发明实施例中的第一稀释检测方案的流程示意图，如图4所示，可以将全血样本分别分配至不同检测模块对应的反应池中，在此过程中，可先控制采样针下行进入样本管内部吸取定量的全血样本，然后将采样针移动至反应池上方，向第一反应池及第二反应池中分别分配定量的全血样本，例如6μl，进而分别加入稀释试剂进行稀释。
98.步骤s202，向第一反应池分配稀释试剂，并将稀释试剂与全血样本混合均匀，得到第一样本液；
99.具体的，可由试剂分配模块通过动力源驱动定量组件(如注射器或定量泵等)，向第一反应池分配定量的稀释液，如1ml，全血样本和稀释液在反应池内充分混匀、稀释，即可得到第一样本液。
100.步骤s203，向第二反应池分配稀释试剂及处理试剂，并将稀释试剂、处理试剂及全血样本混合均匀，得到第二样本液。
101.更进一步地，由试剂分配模块通过动力源驱动定量组件(如注射器或定量泵等)，向第二反应池分配定量的稀释液，如1ml，全血样本和稀释液在反应池内充分混匀、稀释，即可得到第二样本液。此外，采样针完成内壁清洗，吸取适量的处理试剂加入第二反应池，处理试剂可以包括溶血剂、染料、稀释液中的一种或几种。溶血剂可以使样本液中凝结的血细胞进行分离，避免血细胞粘连影响检测结果的准确性，染料可以使血细胞被染色，以便于检测过程中对血细胞进行准确识别，当处理试剂与样本在反应池中充分混合并反应完成后，即得到第二样本液。
102.本实施例通过上述方案，具体通过吸取全血样本，将第一预设量的全血样本分配至第一反应池中，将第二预设量的全血样本分配至第二反应池中；向第一反应池分配稀释
试剂，并将稀释试剂与全血样本混合均匀，得到第一样本液；向第二反应池分配处理试剂，并将处理试剂及全血样本混合均匀，得到第二样本液。通过将全血样本分别分配至不同检测模块对应的反应池中进行稀释处理，得到用于不同检测的样本液。
103.参照图5-6，图5为图1实施例中步骤s20的第二流程示意图，图6为本发明实施例中的第二稀释检测方案的流程示意图。在本实施例中，上述步骤s20包括：
104.步骤s204，采用稀释试剂对全血样本进行一次稀释，得到预稀释样本液；
105.而后，将得到的预稀释样本液分别分配至不同检测模块对应的反应池中，预稀释的过程可在预稀释池中进行，具体包括：
106.吸取全血样本，将第三预设量的全血样本分配至预稀释池中；
107.向预稀释池分配稀释试剂，以对全血样本进行一次稀释，得到预稀释样本液。
108.具体的，在其中一个具体实施例中，首先由控制采样针下行进入样本管内部，驱动采样注射器下拉以通过采样针吸取定量的全血样本，然后控制采样针移动至预稀释池上方，通过采样注射器向预稀释池内分配定量的全血样本，如6ul，同时通过定量组件(如注射器或定量泵等)，向预稀释池分配定量的稀释试剂，如1ml，使得全血样本和稀释试剂在预稀释模块反应容器内充分混匀、稀释，得到预稀释样本液。
109.步骤s205，将预稀释样本液注入第一反应池中，向第一反应池中添加稀释试剂对预稀释样本液进行二次稀释，得到第一样本液；
110.具体的，预稀释完成后，控制采样针伸入到预稀释池内吸取定量稀释样本液，如50ul，之后样本针移动至rbc检测模块对应的反应池上方，通过采样采样注射器向rbc反应容器内分配吸取的预稀释样本液，同时向rbc反应池内添加稀释试剂，从而完成二次稀释，得到第一样本液。
111.步骤s206，将所述预稀释样本液注入第二反应池中，加入处理试剂与所述预稀释样本液混合均匀，得到所述第二样本液。
112.具体的，预稀释完成后，控制采样针伸入预稀释池内吸取预稀释池内的定量稀释样本液，如50ul，之后样本针移动至ret检测模块反应容器处，通过采样注射器向ret反应容器内分配吸取的预稀释样本液，同时通过试剂分配模块的向ret反应池内添加处理试剂，完成对预稀释样本液的三次稀释及处理，得到第二样本液。处理试剂可以包括溶血剂、染料、稀释液中的一种或几种。
113.需要说明的是，上述步骤s205及步骤s206的顺序不做限定，且此过程中通过采样分配模块进行液体转移，亦可以通过定量组件(包含定量泵/注射器、阀)实现转移。
114.此外，在本实施例中，上述步骤中获得rbc检测所需的第一样本液的二次稀释步骤可以省略，即在预稀释池中即得到rbc检测所需的第一样本液。
115.本实施例通过上述方案，通过先将全血样本进行预稀释，得到预稀释样本液，进一步将预稀释样本液分配至不同检测模块进行二次稀释或处理，得到待检测样本液，节省了血液样本的用量，提高了样本稀释处理的效率。
116.参照图7-8，图7为图1实施例中步骤s20的第三流程示意图，图8为本发明实施例中的第三稀释检测方案的流程示意图。本实施例基于上述图1所示的实施例，在本实施例中，上述步骤s20包括：
117.步骤s207，采用稀释试剂对所述全血样本进行一次稀释，得到预稀释样本液；
118.吸取定量的全血样本，向预稀释池内添加全血样本，同时通过动力源驱动定量组件向预稀释池分配定量的稀释试剂，全血样本和稀释试剂在预稀释池内充分混匀、稀释，得到预稀释样本液。
119.步骤s208，将所述预稀释样本液注入第一反应池中，采用所述稀释试剂对所述预稀释样本液进行二次稀释，得到所述第一样本液；
120.吸取适量的预稀释样本液并注入rbc检测模块对应的反应池中，进而分配适量稀释试剂进行二次稀释，得到二次稀释后的样本液，即第一样本液，用于进行rbc检测。
121.步骤s209，吸取rbc检测后剩余的第一样本液注入第二反应池，吸取处理试剂与第一样本液进行混合，得到第二样本液；：
122.具体的，在完成rbc检测后，将检测后剩余的第一样本液注入ret反应池中；并向ret反应池中注入处理试剂以完成三次稀释，得到第二样本液，处理试剂可以包括溶血剂、染料、稀释液中的一种或几种；
123.需要说明的是，上述过程中的全血样本、预稀释样本液、第一样本液以及第二样本液都可根据实际情况再分配至其他检测模块，从而进一步提高稀释检测的效率。
124.此外，在本实施例中，上述步骤中获得rbc检测所需的第一样本液的二次稀释步骤可以省略，即在预稀释池中即得到rbc检测所需的第一样本液。
125.本实施例中，通过先对全血样本进行预稀释处理，得到预稀释样本液，进而在rbc检测模块对应的反应池中进行二次稀释，并将rbc检测剩余的样本液分配至ret检测模块对应的反应池中，进行处理得到第二样本液，从而完成ret检测，简化了稀释的流程，提高了细胞分类及计数的效率。
126.此外，本发明实施例还提出一种细胞分类及计数系统，所述细胞分类及计数系统包括：
127.稀释单元，用于获取全血样本，并将所述全血样本进行稀释，获得稀释后的第一样本液和第二样本液；
128.控制单元，用于将所述第一样本液输送至rbc检测模块进行检测以得到第一检测结果；将所述第二样本液输送至ret检测模块，控制所述第二样本液在检测组件内形成在第一预设范围内的稳定流，同时控制鞘液的压力在第二预设范围内以使得第二样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面，以得到第二检测结果；
129.检测单元，用于获得所述第一检测结果及所述第二检测结果。
130.由于本细胞分类及计数系统应用时，采用了前述所有实施例的全部技术方案，因此至少具有前述所有实施例的全部技术方案所带来的所有有益效果，在此不再一一赘述。
131.此外，本发明实施例还提出一种样本分析仪，所述样本分析仪包括：
132.样本液供液组件、检测组件、鞘流供液组件以及分别与样本液供液组件和检测组件连通的驱动组件，所述驱动组件包括第一驱动件以及第二驱动件；
133.所述样本液供液组件用于将血样稀释至第一预设比例以得到待检测样本液，所述第一预设比例大于或等于500:1且小于或等于5000:1；
134.所述检测组件的第一端与所述第一驱动件相连通，用于驱动待检测样本液在管道内形成在第一预设范围内的稳定流以流入所述检测组件；
135.所述检测组件的第二端与所述鞘流供液组件相连通，用于向所述检测组件提供检
测所需的鞘液；
136.所述检测组件的第三端与所述第二驱动件相连通，用于控制鞘液的管道内压力在第二预设范围内以使得所述待检测样本液能在所述鞘液的包裹下以层流状态通过所述检测组件的检测面。
137.参照图9，图9为本发明实施例中样本分析仪的第一结构示意图，如图9所示，样本液供液组件包括ret反应池、试剂液桶，以及第一控制阀，ret反应池的进液口与试剂液桶通过第一管路相连，第一控制阀设置在ret反应池与试剂液桶之间，用于控制加入ret反应池中稀释液或试剂的液量以形成待检测样本液。
138.第一驱动件的一端通过第二控制阀与ret反应池的出液口相连通，第一驱动件的第二端与检测组件的第一端相连通；第二驱动件通过第三控制阀与检测组件的第三端相连通；
139.第一驱动件为正压源，第二驱动件为负压源。
140.鞘流供液组件包括鞘流液桶以及与检测组件相连通的第四控制阀，第一驱动件为注射器，第二驱动件为负压泵。
141.参照图10，图10为本发明实施例中样本分析仪的第二结构示意图，如图10所示，样本分析仪还包括预稀释组件，预稀释组件包括稀释液桶、第五控制阀和预稀释池，第五控制阀设置在稀释液桶和预稀释池之间，预稀释池的出液口与ret反应池的进液口相连通。
142.参照图11，图11为本发明实施例中样本分析仪的第三结构示意图，如图11所示，预稀释组件还包括定量组件，定量组件设置于预稀释池和ret反应池之间，用于控制预稀释池输入ret反应池中的待检测样本液的液量。
143.第一驱动组件用于控制待检测样本液在管道内形成宽度在10μm～25μm范围内的稳定流；第二驱动组件控制鞘液的压力在70kpa～110kpa范围内以使得待检测样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面。
144.相比现有技术，本发明实施例提出的细胞分类及计数方法、系统及样本分析仪，通过获取全血样本；将全血样本进行稀释，获得稀释后的第一样本液和第二样本液；将第一样本液输送至rbc检测模块进行检测以得到第一检测结果；和/或将第二样本液输送至ret检测模块，控制第二样本液在检测组件内形成在第一预设范围内的稳定流，同时控制鞘液的压力在第二预设范围内以使得第二样本液能在鞘液的包裹下以层流状态通过检测面，以得到第二检测结果；其中，第二样本液的稀释比例大于或等于500:1且小于或等于5000:1。本发明通过对全血样本进行稀释，同时通过对样本液与鞘液的压力进行控制，能够使得样本流内细胞粒子独立有序通过检测面，提高了检测模块的通道粒子计数及分类的准确性，降低了高浓度粒子检测对光学检测系统和数据采集系统的要求，还可以减少血液样本的使用量。。
145.需要说明的是，在本文中，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者系统不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者系统所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个
……”
限定的要素，并不排除在包括该要素的过程、方法、物品或者系统中还存在另外的相同要素。
146.上述本技术实施例序号仅仅为了描述，不代表实施例的优劣。
147.通过以上的实施方式的描述，本领域的技术人员可以清楚地了解到上述实施例方法可借助软件加必需的通用硬件平台的方式来实现，当然也可以通过硬件，但很多情况下前者是更佳的实施方式。基于这样的理解，本技术的技术方案本质上或者说对现有技术做出贡献的部分可以以软件产品的形式体现出来，该计算机软件产品存储在如上的一个存储介质(如rom/ram、磁碟、光盘)中，包括若干指令用以使得一台终端设备(可以是手机，计算机，服务器，被控终端，或者网络设备等)执行本技术每个实施例的方法。
148.以上仅为本发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。