VIII因子活性测定试剂盒及其制备方法与流程

viii因子活性测定试剂盒及其制备方法
技术领域
1.本发明涉及医学体外诊断技术领域，尤其涉及一种viii因子活性测定试剂盒及其制备方法。


背景技术：

2.分析fviii的凝血活性在临床诊断甲型血友病和生产治疗用的因子viii浓制剂中是非常重要的。
3.测定fviii：c活性方法目前主要有两种，一期法和二期法。二期法操作繁琐，不易推广。一期法操作相对简单，颇受欢迎。但这种方法需要一种因子 viii缺乏血浆作为基质。这种试剂需要从严重的血友病病人中得到，但这种来源非常有限，且有传染肝炎和艾滋病的风险，所以需提供人工制备的因子viii 缺乏血浆。人工制备的因子viii缺乏血浆在使用上较为安全，又可大量生产，以满足临床和研究需求。


技术实现要素：

4.本发明要解决的技术问题在于，针对现有技术中，人工制备的因子viii缺乏血浆的来源非常有限且生物风险高，提供一种viii因子活性测定试剂盒及其制备方法。
5.本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种viii因子活性测定试剂盒，包括乏viii因子血浆、标准血浆和样本稀释液；乏viii因子血浆以其总体积为1l计，包括以下组分：20～50g氨基酸、0.5～1.5g防腐剂、15～40g冻干保护剂，其余为添加抗凝剂且利用单克隆抗体制成的乏viii因子血浆原料；标准血浆以其总体积为1l计，包括以下组分：20～50g氨基酸、0.5～1.5g防腐剂、15～40g 冻干保护剂，其余为添加抗凝剂的标准血浆原料；抗凝剂以其总体积为1l计，包括30～40g枸橼酸钠和水，且抗凝剂与正常人血浆的体积比为1:(8～10)；样本稀释液以其总体积为1l计，包括以下组分：11～25g稳定剂、0.5～1.5g防腐剂、含量为1mol且ph值为6.0～8.0的缓冲液，其余为水。
6.优选地，防腐剂为dn、proclin-300、硫柳汞、庆大霉素或卡松。
7.优选地，冻干保护剂包括10～30g甘露醇和5～10g海藻糖。
8.优选地，氨基酸为甘氨酸、丙氨酸或精氨酸。
9.优选地，缓冲液为tris缓冲液、hepes缓冲液或pbs缓冲液。
10.优选地，稳定剂包括3～5g巴比妥钠、3～5g无机盐和5～15g白蛋白。
11.优选地，无机盐为氯化钠、氯化钙或硫酸铵。
12.优选地，白蛋白为牛血清白蛋白、马血清白蛋白或人血清白蛋白。
13.一种上述viii因子活性测定试剂盒的制备方法，包括以下步骤：
14.s1、制备亲和免疫胶：将抗体a、抗体b和抗体c分别与溴化氰活化的琼脂糖凝胶偶联，得到亲和免疫胶，将其装入亲和层析柱，将亲和层析柱串联，用平衡液流洗；抗体a为抗vwf单克隆抗体，抗体b为抗fviii重链单克隆抗体，抗体c为抗fviii轻链单克隆抗体；
15.s2、乏viii因子血浆的制备：将抗凝剂与正常人血浆按体积比为1:(8～10) 混合
并离心，取上清血浆装入s1步骤所得的亲和层析柱，收集流出液；以流出液的总体积为1l计，在流出液中添加20～50g氨基酸、0.5～1.5g防腐剂和15～40g 冻干保护剂，分装并进行冻干，得到乏viii因子血浆冻干粉；
16.s3、标准血浆的制备：将抗凝剂与正常人血浆按体积比为1:(8～10)混合并离心，取上清血浆；以标准血浆的总体积为1l计，在上清血浆中添加20～50g 氨基酸、0.5～1.5g防腐剂、15～40g冻干保护剂，分装并进行冻干，得到标准血浆冻干粉；
17.s4、样本稀释液的制备：以稀释液总体积为1l计，将11～25g稳定剂、 0.5～1.5g防腐剂、含量为1mol且ph值为6.0～8.0的缓冲液和水混合，得到样本稀释液。
18.优选地，步骤s1中抗体a和溴化氰活化的琼脂糖凝胶的体积比为 (0.9～1.1):1，抗体b和溴化氰活化的琼脂糖凝胶的体积比为(0.8～1.2):1，抗体c和溴化氰活化的琼脂糖凝胶的体积比为(0.8～1.2):1。
19.优选地，平衡液以其总体积为1l计，由8～10g氯化钠和含量为1mol且ph值为6.0～8.0的tris缓冲液组成；平衡液与亲和免疫胶的体积比为(5～10):1。
20.优选地，在步骤s2和s3中，离心的温度为2～6℃，转速为2000～4000rpm，时间为10～20min。
21.优选地，步骤s2中正常人血浆冷上清从亲和层析柱流出的速度为 20～40ml/h。
22.优选地，免疫亲和胶和正常人血浆冷上清的体积比为1:(4～5)。
23.本发明的有益效果：
24.本发明通过单克隆抗体偶联亲和层析技术，将正常人血浆纯化制得乏viii 因子血浆，其生物风险低且可工业化生产；本发明通过冻干工艺制得冻干血浆。本发明的viii因子活性测定试剂盒产量可保障，用于甲型血友病的诊断，且线性范围较广，线性范围内测试相关性良好，精密度较高。
25.本发明提供一种viii因子活性测定试剂盒的制备方法，该制备方法的操作过程简单，可用于工业化生产，保证质量，实用性强，易于推广。
附图说明
26.图1是本发明实施例1测试校准品的理论值和测试值的线性；
27.图2是本发明实施例2测试校准品的理论值和测试值的线性。
具体实施方式
28.为了对本发明的技术特征、目的和效果有更加清楚的理解，下面将结合实施例对本发明做进一步详述，本实施例仅用于解释本发明，并不构成对本发明保护范围的限定。
29.一种viii因子活性测定试剂盒，包括乏viii因子血浆、标准血浆和样本稀释液；乏viii因子血浆以其总体积为1l计，包括以下组分：20～50g氨基酸、 0.5～1.5g防腐剂、15～40g冻干保护剂，其余为添加抗凝剂且利用单克隆抗体制成的乏viii因子血浆原料；标准血浆以其总体积为1l计，包括以下组分：20～50g 氨基酸、0.5～1.5g防腐剂、15～40g冻干保护剂，其余为添加抗凝剂的标准血浆原料；抗凝剂以其总体积为1l计，包括30～40g枸橼酸钠和水，且抗凝剂与正常人血浆的体积比为1:(8～10)；样本稀释液以其总体积为1l计，包括以下组分：11～25g稳定剂、0.5～1.5g防腐剂、含量为1mol且ph值为6.0～8.0的缓冲液，
其余为水。
30.其中，抗凝剂为枸橼酸钠溶液，用于延缓血液凝固时间。
31.防腐剂为dn、proclin-300、硫柳汞、庆大霉素或卡松。
32.冻干保护剂包括10～30g甘露醇和5～10g海藻糖。
33.氨基酸为甘氨酸、丙氨酸或精氨酸，可以提高血浆稳定性。
34.缓冲液为tris缓冲液、hepes缓冲液或pbs缓冲液。
35.稳定剂包括3～5g巴比妥钠、3～5g无机盐和5～15g白蛋白。其中，巴比妥钠可以替换为咪唑，无机盐为氯化钠、氯化钙或硫酸铵，白蛋白为牛血清白蛋白、马血清白蛋白或人血清白蛋白。稳定剂可以稳定血浆，减少基质效应。
36.本发明的viii因子活性测定试剂盒需配套aptt(活化部分凝血活酶时间) 测定试剂盒使用。
37.本发明通过单克隆抗体偶联亲和层析方法，将正常人血浆纯化制得乏viii 因子血浆，其生物风险低且可工业化生产；本发明通过冻干工艺制得冻干血浆。本发明的viii因子活性测定试剂盒产量可保障，用于甲型血友病的诊断，且线性范围较广，线性范围内测试相关性良好，精密度较高。
38.一种上述viii因子活性测定试剂盒的制备方法，包括以下步骤：
39.s1、制备亲和免疫胶：将抗体与溴化氰活化的琼脂糖凝胶偶联，得到亲和免疫胶，将其装入亲和层析柱；
40.步骤s1包括以下子步骤：
41.s1.1、将抗vwf单克隆抗体和溴化氰活化的琼脂糖凝胶按体积比为 (0.9～1.1):1进行偶联，装入亲和层析柱；
42.s1.2、将抗fviii重链单克隆抗体和溴化氰活化的琼脂糖凝胶按体积比为 (0.8～1.2):1进行偶联，装入亲和层析柱；
43.s1.3、将抗fviii轻链单克隆抗体和溴化氰活化的琼脂糖凝胶按体积比为 (0.8～1.2):1进行偶联，装入亲和层析柱；
44.s1.4、将亲和层析柱串联，用平衡液流洗。
45.其中，平衡液以其总体积为1l计，由8～10g氯化钠和含量为1mol且ph值为 6.0～8.0的tris缓冲液组成；平衡液与亲和免疫胶的体积比为(5～10):1。
46.有研究显示，在新鲜血浆中，fviii：c大部分与vwf结合，还有小部分经过fiia、fxa和apc(活化的蛋白c)作用裂解为大小不等的片段。这些片段的分子量从80kd到310kd不等，而且都可表现出fviii：c，使得血浆中不仅有结合态的fviii：c，而且还有成片段的fviii：c，而结合态的fviii：c的抗原决定簇部分被掩盖或修饰，使得fviii：c单克隆无法识别，这部分fviii：c 需利用vwf单抗来除去。由于一种单克隆抗体只能识别抗原的一个抗原决定簇，因此亲和层析制备基质血浆的单克隆抗体至少要包括识别重链、轻链和 vwf的3种抗体才能有效除去血浆中的fviii：c。因此，本发明采用抗vwf单克隆抗体、抗fviii重链单克隆抗体和抗fviii轻链单克隆抗体制成亲和免疫胶，其用于在下一步骤制备乏viii因子血浆。
47.s2、乏viii因子血浆的制备：将抗凝剂与正常人血浆按体积比为1:(8～10) 混合，并在2～6℃下以2000～4000rpm的转速离心10～20min，取上清血浆装入s1 步骤所得的亲和层析柱，流速为20～40ml/h，免疫亲和胶和正常人血浆冷上清的体积比为1:(4～5)，收集
流出液，去除前后3ml；以流出液的总体积为1l 计，在流出液中添加20～50g氨基酸、0.5～1.5g防腐剂和15～40g冻干保护剂，并分装成1ml/支，用冻干机进行冻干，得到乏viii因子血浆冻干粉；冻干血浆可在2～8℃保存1年。
48.s3、标准血浆的制备：将抗凝剂与正常人血浆按体积比为1:(8～10)混合，并在2～6℃下以2000～4000rpm的转速离心10～20min，取上清血浆；以标准血浆的总体积为1l计，在上清血浆中添加20～50g氨基酸、0.5～1.5g防腐剂、15～40g 冻干保护剂，分装为1ml/支，用冻干机进行冻干，得到标准血浆冻干粉。按照who推荐的溯源流程，对标准血浆进行凝血因子活性赋值。
49.在步骤s1和s2中，首先配制抗凝剂：以抗凝剂总体积为1l计，在1l水中加入30～40g枸橼酸钠；再进行采血：将抗凝剂与正常人血浆混合并离心，取冷上清血浆作为乏viii因子血浆或标准血浆的原料。
50.s4、样本稀释液的制备：以稀释液总体积为1l计，将11～25g稳定剂、 0.5～1.5g防腐剂、含量为1mol且ph值为6.0～8.0的缓冲液和水混合，得到样本稀释液。
51.本发明的viii因子活性测定试剂盒的使用方法如下：
52.取1支冻好的标准血浆、乏viii因子血浆，分别用1ml纯化水溶解摇匀，用样本稀释液溶解乏viii因子血浆，按照凝血分析仪内设置的定标点用乏viii因子血浆对标准血浆进行多个倍数的稀释，并且用aptt试剂盒进行测试，按照测出的时间和理论活性值，制作标准曲线。将待测血浆与乏viii因子血浆放入相应的样本位和试剂位，按照仪器内设置的参数进行测试，根据aptt测试值在校准曲线上对应得出待测血浆中viii因子的活性值。从参考曲线上读取凝血因子的含量，用正常值％表示。
53.本发明提供一种viii因子活性测定试剂盒的制备方法，该制备方法的操作过程简单，可用于工业化生产，保证质量，实用性强，易于推广。
54.以下通过具体实施例进行说明：
55.实施例1
56.一种viii因子活性测定试剂盒，包括乏viii因子血浆、标准血浆和样本稀释液；乏viii因子血浆以其总体积为1l计，包括以下组分：20g甘氨酸、0.5g dn、 10g甘露醇和5g海藻糖，其余为添加抗凝剂且利用单克隆抗体制成的乏viii因子血浆原料；标准血浆以其总体积为1l计，包括以下组分：20g甘氨酸、0.5g dn、 10g甘露醇和5g海藻糖，其余为添加抗凝剂的标准血浆原料；抗凝剂以其总体积为1l计，包括30g枸橼酸钠和水，且抗凝剂与正常人血浆的体积比为1:8；样本稀释液以其总体积为1l计，包括以下组分：3g巴比妥钠、3g氯化钠、5g牛血清白蛋白、0.5g dn、含量为1mol且ph值为6.0的tris缓冲液，其余为水。
57.一种上述viii因子活性测定试剂盒的制备方法，包括以下步骤：
58.s1、制备亲和免疫胶：将抗体与溴化氰活化的琼脂糖凝胶4b偶联，得到亲和免疫胶，将其装入亲和层析柱；
59.步骤s1包括以下子步骤：
60.s1.1、将4.5mg抗vwf单克隆抗体和5ml溴化氰活化的琼脂糖凝胶4b偶联，装入亲和层析柱；
61.s1.2、将2mg抗fviii重链单克隆抗体和2.5ml溴化氰活化的琼脂糖凝胶4b 偶联，装入亲和层析柱；
62.s1.3、将2mg抗fviii轻链单克隆抗体和2.5ml溴化氰活化的琼脂糖凝胶4b 偶联，装入亲和层析柱；
63.s1.4、将亲和层析柱串联，用平衡液流洗。
64.平衡液以其总体积为1l计，由8g氯化钠和含量为1mol且ph值为6.0的tris 缓冲液组成；平衡液与亲和免疫胶的体积比为5:1。
65.平衡液的制备如下：配制1mol/l且ph值为6.0的tris缓冲液，在1l缓冲液中加入8g氯化钠混匀。以下实施例的制备跟此相同。
66.s2、乏viii因子血浆的制备：将抗凝剂与正常人血浆按体积比为1:8混合，在2℃下以2000rpm转速离心20min，取上清血浆装入s1步骤所得的亲和层析柱，流速为20ml/h，10ml免疫亲和胶吸附40ml正常人血浆冷上清，收集流出液约34ml，去除前后3ml；以流出液的体积为1l计，在流出液中添加20g甘氨酸、0.5g dn、10g甘露醇和5g海藻糖，并分装成1ml/支，用冻干机进行冻干，得到乏viii因子血浆冻干粉；
67.s3、标准血浆的制备：将抗凝剂与正常人血浆按体积比为1:8混合，在2℃下以2000rpm转速离心20min，取上清血浆；以标准血浆的总体积为1l计，在上清血浆中添加20g甘氨酸、0.5g dn、10g甘露醇和5g海藻糖，并分装成1ml/ 支，用冻干机进行冻干，得到标准血浆冻干粉；按照who推荐的溯源流程，对标准血浆进行因子活性赋值；
68.s4、样本稀释液的制备：以稀释液总体积为1l计，将3g巴比妥钠、3g氯化钠、5g牛血清白蛋白、0.5g dn、含量为1mol且ph值为6.0的tris缓冲液和水混合，得到样本稀释液。
69.实施例2
70.一种viii因子活性测定试剂盒，包括乏viii因子血浆、标准血浆和样本稀释液；乏viii因子血浆以其总体积为1l计，包括以下组分：50g丙氨酸、1.5gproclin-300、30g甘露醇和10g海藻糖，其余为添加抗凝剂且利用单克隆抗体制成的乏viii因子血浆原料；标准血浆以其总体积为1l计，包括以下组分：50g 丙氨酸、1.5g proclin-300、30g甘露醇和10g海藻糖，其余为添加抗凝剂的标准血浆原料；抗凝剂以其总体积为1l计，包括40g枸橼酸钠和水，且抗凝剂与正常人血浆的体积比为1:10；样本稀释液以其总体积为1l计，包括以下组分：5g 咪唑、5g氯化钙、15g马血清白蛋白、1.5g proclin-300、含量为1mol且ph值为 8.0的hepes缓冲液，其余为水。
71.一种上述viii因子活性测定试剂盒的制备方法，包括以下步骤：
72.s1、制备亲和免疫胶：将抗体与溴化氰活化的琼脂糖凝胶4b偶联，得到亲和免疫胶，将其装入亲和层析柱；
73.步骤s1包括以下子步骤：
74.s1.1、将5.5mg抗vwf单克隆抗体和5ml溴化氰活化的琼脂糖凝胶4b偶联，装入亲和层析柱；
75.s1.2、将3mg抗fviii重链单克隆抗体和2.5ml溴化氰活化的琼脂糖凝胶4b 偶联，装入亲和层析柱；
76.s1.3、将3mg抗fviii轻链单克隆抗体和2.5ml溴化氰活化的琼脂糖凝胶4b 偶联，装入亲和层析柱；
77.s1.4、将亲和层析柱串联，用平衡液流洗。
78.其中，平衡液以其总体积为1l计，由10g氯化钠和含量为1mol且ph值为8.0 的
hepes缓冲液组成；平衡液与亲和免疫胶的体积比为10:1。
79.s2、乏viii因子血浆的制备：将抗凝剂与正常人血浆按体积比为1:10混合，在6℃下以4000rpm转速离心10min，取上清血浆装入s1步骤所得的亲和层析柱，流速为40ml/h，10ml免疫亲和胶吸附50ml正常人血浆冷上清，收集流出液约44ml，去除前后3ml；以流出液的总体积为1l计，在流出液中添加50g 丙氨酸、1.5g proclin-300、30g甘露醇和10g海藻糖，并分装成1ml/支，用冻干机进行冻干，得到乏viii因子血浆冻干粉；
80.s3、标准血浆的制备：将抗凝剂与正常人血浆按体积比为1:10混合，在6℃下以4000rpm转速离心10min，取上清血浆；以标准血浆的总体积为1l计，在上清血浆中添加50g丙氨酸、1.5g proclin-300、30g甘露醇和10g海藻糖，并分装成1ml/支，用冻干机进行冻干，得到标准血浆冻干粉；按照who推荐的溯源流程，对标准血浆进行因子活性赋值；
81.s4、样本稀释液的制备：以稀释液总体积为1l计，将5g咪唑、5g氯化钙、 15g马血清白蛋白、1.5g proclin-300、含量为1mol且ph值为8.0的hepes缓冲液和水混合，得到样本稀释液。
82.实施例3
83.一种viii因子活性测定试剂盒，包括乏viii因子血浆、标准血浆和样本稀释液；乏viii因子血浆以其总体积为1l计，包括以下组分：35g精氨酸、1g硫柳汞、20g甘露醇和7.5g海藻糖，其余为添加抗凝剂且利用单克隆抗体制成的乏viii因子血浆原料；标准血浆以其总体积为1l计，包括以下组分：35g精氨酸、1g硫柳汞、20g甘露醇和7.5g海藻糖，其余为添加抗凝剂的标准血浆原料；抗凝剂以其总体积为1l计，包括35g枸橼酸钠和水，且抗凝剂与正常人血浆的体积比为1:9；样本稀释液以其总体积为1l计，包括以下组分：4g咪唑、4g硫酸铵、10g人血清白蛋白、1g硫柳汞、含量为1mol且ph值为7.0的pbs缓冲液，其余为水。
84.一种viii因子活性测定试剂盒的制备方法，包括以下步骤：
85.s1、制备亲和免疫胶：将抗体与溴化氰活化的琼脂糖凝胶4b偶联，得到亲和免疫胶，将其装入亲和层析柱；
86.步骤s1包括以下子步骤：
87.s1.1、将5mg抗vwf单克隆抗体和5ml溴化氰活化的琼脂糖凝胶4b偶联，装入亲和层析柱；
88.s1.2、将2.5mg抗fviii重链单克隆抗体和2.5ml溴化氰活化的琼脂糖凝胶 4b偶联，装入亲和层析柱；
89.s1.3、将2.5mg抗fviii轻链单克隆抗体和2.5ml溴化氰活化的琼脂糖凝胶 4b偶联，装入亲和层析柱；
90.s1.4、将亲和层析柱串联，用平衡液流洗。
91.其中，平衡液以其总体积为1l计，由9g氯化钠和含量为1mol且ph值为7.0 的pbs缓冲液组成；平衡液与亲和免疫胶的体积比为7:1。
92.s2、乏viii因子血浆的制备：将抗凝剂与正常人血浆按体积比为1:9混合，在4℃下以3000rpm转速离心15min，取上清血浆装入s1步骤所得的亲和层析柱，流速为30ml/h，10ml免疫亲和胶吸附45ml正常人血浆冷上清，收集流出液约39ml，去除前后3ml；以流出液的总体积为1l计，在流出液中添加35g 精氨酸、1g硫柳汞、20g甘露醇和7.5g海藻糖，并分装成1ml/支，用冻干机进行冻干，得到乏viii因子血浆冻干粉；
93.s3、标准血浆的制备：将抗凝剂与正常人血浆按体积比为1:9混合，在4℃下以3000rpm转速离心15min，取上清血浆；以标准血浆的总体积为1l计，在上清血浆中添加35g精氨酸、1g硫柳汞、20g甘露醇和7.5g海藻糖，并分装成1ml/ 支，用冻干机进行冻干，得到标准血浆冻干粉；按照who推荐的溯源流程，对标准血浆进行因子活性赋值；
94.s4、样本稀释液的制备：以稀释液总体积为1l计，将4g咪唑、4g硫酸铵、 10g人血清白蛋白、1g硫柳汞、含量为1mol且ph值为7.0的pbs缓冲液和水混合，得到样本稀释液。
95.可以理解地，在上述实施例及其替代方案中，防腐剂还可以替换为庆大霉素或卡松。
96.性能试验：
97.一、凝血因子活性检测
98.试验仪器：深圳市帝迈生物技术有限公司生产的凝血分析仪ca520
99.试验步骤：用凝血因子检测试剂对实施例1和实施例2的乏viii因子血浆流出液的凝血因子活性进行检测，试验结果如表1和表2所示。
100.表1实施例1的乏viii因子血浆流出液与原料血浆凝血因子水平(n＝3％)
101.凝血因子活性原料血浆(％)乏viii因子血浆(％)fii：c98.3592.00fv：c85.7681.24fvii：c102.2198.33fviii：c86.23＜1fix：c105.1287.16fx：c111.9889.67
102.表2实施例2的乏viii因子血浆流出液与原料血浆凝血因子水平(n＝3％)
103.凝血因子活性原料血浆(％)乏viii因子血浆(％)fii：c96.593.1fv：c82.778.4fvii：c100.193.3fviii：c81.5＜1fix：c95.278.5fx：c102.9885.7
104.试验结果显示，经过亲和免疫胶的吸附得到的乏viii因子血浆流出液中 fviii的活性＜1％，而其他凝血因子的活性均维持在正常值，因此流出液为乏 viii因子血浆，可用于制备乏viii因子血浆试剂盒。
105.二、精密度测试
106.试验仪器：深圳市帝迈生物技术有限公司生产的凝血分析仪ca520
107.试验步骤：用实施例1和实施例2的viii因子活性测定试剂盒对同一质控品测试20次，计算精密度，试验结果如表3、表4所示。
108.表3实施例1精密度测试结果
109.[0110][0111]
表4实施例2精密度测试结果
[0112][0113][0114]
试验结果显示，实施例1和实施例2对同一质控品测试20次的精密度均≤5％。因此，本发明的viii因子活性测定试剂盒的精密度较高。
[0115]
三、线性范围测试
[0116]
试验仪器：深圳市帝迈生物技术有限公司生产的凝血分析仪ca520
[0117]
试验步骤：用实施例1和实施例2的viii因子活性测定试剂盒对不同水平的校准品进行测试，以测试值为x轴，以理论值为y轴，做线性回归分析，测试结果如表5、表6和附图1、附图2所示。测试结果应符合要求：线性相关系数r2≥0.990。
[0118]
表5实施例1线性范围测试结果
[0119][0120][0121]
表6实施例2线性范围测试结果
[0122]
理论值(％)测试值(％)200.0198.30180.1186.50160.2160.30140.3141.80120.4125.70100.589.5080.578.9060.650.7040.746.900.90.98相关系数r20.9916
[0123]
试验结果显示，在viii因子活性为0～200％的线性范围内时，线性相关系数均大于0.990，表明测试结果的线性相关性较好。因此，本发明的viii因子测定试剂盒的线性范围较广。
[0124]
以上测试结果表示，本发明的viii因子活性测定试剂盒精密度较高，线性范围较广，且线性范围内测试相关性良好。
[0125]
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。