一种多样本检测玻板及玻板凝集试验的检测方法与流程

1.本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种多样本检测玻板及基于玻板凝集试验的检测方法。


背景技术：

2.鸡白痢是由鸡白痢沙门氏菌引起的一种传染性疾病，是危害养鸡业最严重的疾病之一，特别对于种鸡，通过蛋媒垂直传播和放大效应，近年来养鸡场出现较高的发病率和死亡率。因尚无特效疫苗和易产生抗药性，目前鸡白痢最有效防控手段是检测和淘汰阳性鸡群。
3.鸡白痢实验室检测方法很多，其中全血玻板凝集反应试验因操作简单、节时和检测成本低等优点，是现阶段养鸡场最受推崇应用的检测方法，国家及行业均制订了相关标准。但是常规检测通常一次只能检测一个样本，当检测结果不易判读阴性或阳性反应时，需再次重复检测。遇到大数量的检测样本时，单样本检测明显需要耗费大量检测时间，准确度无法保证。


技术实现要素：

4.本发明的目的是提供一种多样本检测玻板及玻板凝集检测方法，可同时对多个血清样品进行检测，缩短检测时间，提高检测效率。
5.为了实现上述目的，本发明采取以下技术方案：
6.本发明提供了一种多样本检测玻板，所述玻板设置有多个加样区，所述加样区中心的间隔匹配多道移液器的4个枪头间隔。
7.优选的，所述加样区横纵设置，所述纵向设置有4个加样区。
8.优选的，所述加样区横列等距排列，所述加样区纵列等距或者不等距排列。
9.优选的，所述加样区每一横列的加样中心各间隔3cm，每一纵列的加样中心分别间隔2.8cm、3.6cm、3.6cm。
10.优选的，所述加样区为圆形，直径为1.5-2cm。
11.优选的，所述玻板的大小为15cm
×
20cm。
12.优选的，所述玻板下设置有底衬，所述底衬上设置有标记以区分各加样区。
13.本发明的玻板在擦拭消毒后可反复用于玻板凝集试验的检测。作为一种实施方式，用75％酒精棉球擦拭清洁玻板后晾干。
14.本发明还提供一种基于玻板凝集检测鸡白痢的方法，包括以下步骤：无菌采集静脉血，析出血清；用多道移液器吸取血清，并将血清滴入上述的玻板加样区内，再用多道移液器吸取标准检测抗原与所述血清混匀，2min内同时判定各加样区内血清的检测结果。
15.优选的，所述抗原与血清的涂布直径不超过加样区直径。
16.优选的，在同一块玻板上同时设阴、阳性血清对照。
17.本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果：
18.本发明多样本检测玻板及玻板凝集检测方法，可一次性检测4个血清样品，检测的实际可操作性更强，检测时间缩短，检测效率和直观性均有提高，特别适用于实验条件一般养鸡场和实验室进行鸡白痢检测与诊断。
附图说明
19.图1为玻板示意图；
20.图2为移液器枪头按每列4个并间隔插入枪头盒的示意图；
21.图3为玻板加样区距离示意图；
22.图4为基于玻板凝集试验的检测装置；
23.图5为本发明改进的检测方法的流程图；
24.图6为实验室检测现场实例图；
25.其中，1为玻板；2为加样区；21为阴性血清加样区；22为阳性血清加样区；3为底衬；4为多道移液器。
具体实施方式
26.本发明提供了一种多样本检测玻板，所述玻板设置有多个加样区，所述加样区中心的间隔匹配多道移液器的4个间隔。如此以来，采用同一个多道移液器就能将检测抗原同时滴加到对应的加样区内，提高检测效率，节省检测时间。本发明对多道移液器的具体种类和型号没有特别限定，具体为4、8、12通道移液器，所述多通道移液器可以为手动或者电动，所述多通道移液器的间距可调或不可调。
27.作为一种实施方式，所述加样区横纵排列。作为一种实施方式，所述加样区每一横列等距排列，如3cm。作为一种实施方式，所述加样区纵列的间隔等距或者不等距，以匹配对应移液器枪头间隔，如加样区纵列的加样中心分别间隔2.8cm、3.6cm、3.6cm。
28.本发明玻板的加样区为圆形，直径符合抗原与血清的涂布大小，可选的孔径直径为1.5-2cm，优选为1.8cm。
29.本发明对玻板的来源和制作方式没有特别限定，可以采用普通玻璃板切割制作，玻板大小可视样品多少而定，可选的大小为15cm
×
20cm。
30.作为一种实施方式，本发明的玻板下还设置有底衬，所述底衬上设置有标记以区分各加样区。所述底衬可选的为纸张、板材、衬布等，优选为有一定硬度的纸张，如a4纸。
31.本发明还提供了基于玻板凝集试验的检测方法，包括以下步骤：无菌采集静脉血，析出血清；用移液器吸取血清，并将血清滴入上述的玻板加样区内，再用多道移液器吸取标准检测抗原与所述血清混匀，2min内同时判定各加样区内血清的检测结果。优选的，抗原与血清的涂布直径不超过加样区直径。在同一块玻板上同时设阴、阳性血清对照。其他检测方式参考现有国家标准或行业标准，如鸡白痢抗体检测方法，全血平板凝集试验sn/t 1222-2003标准。
32.本发明的上述多样本检测玻板以及玻板凝集试验检测方法，适合于任何抗原和抗体的凝集反应检测，可一次性检测多个样本，检测时间缩短，检测效率和直观性均有提高，特别适用于实验条件一般养鸡场和实验室进行鸡白痢检测与诊断。
33.下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不限于以下实施例。实
施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法，所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
34.实施例1
35.如图1所示，一种多样本检测玻板1，由普通透明玻璃板裁剪成大小为15cm
×
20cm。玻板1上设置有多个加样区2，加样区2中心的间隔匹配多道移液器4的4个枪头间隔。加样区2每一横列的加样中心各间隔3cm，每一纵列的加样中心分别间隔2.8cm、3.6cm、3.6cm。加样区2为圆形，直径为1.5-2cm。玻板1下用a4纸作为底衬3，底衬3上设置有标记以区分各加样区2。在同一块玻板1上还同时设有阴性血清加样区21和阳性血清加样区22。
36.一种基于玻板凝集试验的检测装置(图4)，包括上述的多样本检测玻板1，以及12道移液器4。
37.实施例2
38.一种基于玻板凝集试验的鸡白痢检测改进方法，它包括以下步骤：
39.步骤一，用无菌注射器在鸡翅下静脉采血1ml，装入1.5ml ep管并标记样品号，将样品于4℃冰箱中静置过夜，析出血清；
40.步骤二，将普通的透明玻璃板按15cm
×
20cm大小相等尺寸裁剪成若干个，使用前将玻璃板洗净，用75％酒精棉球擦拭表面后晾干，放于标好加样位置的a4纸上。a4纸上标记的加样位置为每一纵排的加样中心分别间隔2.8cm、3.6cm、3.6cm，每一横列的加样中心各间隔3cm，将移液器枪头按每排4个并间隔插入枪头盒中；
41.步骤三，用单通道移液器吸取50μl血清滴至玻璃板的第一列4个加样点处，再用8道移液器插入4个间隔摆放的枪头，从加液槽吸取检测用抗原，同时与4个血清样品吹吸混匀，并涂布成直径约1.8cm的圆形液滴；在同一块玻板上同时设阴、阳性血清对照，操作方法同上；
42.步骤四，旋转玻璃板，使待检血清和抗原充分混合均匀，2min内可同时判定4个血清检测结果。
43.步骤五，判读检测结果。待检血清样品与标准抗原若出现颗粒状凝集，则为阳性，反之阴性，二者之间视为可疑，具体判读方法参照sn/t 1222-2003标准。
44.实施例3
45.一种鸡白痢血清凝集反应检测加样的改进方法，它包括以下步骤：
46.步骤一，用无菌注射器在鸡翅下静脉采血1ml，装入1.5ml ep管并标记样品号，将样品于4℃冰箱中静置过夜，析出血清；
47.步骤二，将普通的透明玻璃按15cm
×
20cm大小相等尺寸裁剪成若干个，使用前将玻璃板洗净，用75％酒精棉球擦拭表面后晾干，放于标好加样位置的a4纸上。a4纸上标记的加样位置为每一纵排的加样中心分别间隔2.8cm、3.6cm、3.6cm，每一横列的加样中心各间隔3cm，将移液器枪头按每排4个并间隔插入枪头盒中；
48.步骤三，用单通道移液器吸取50μl血清滴至玻璃板的第一，二纵排的8个加样点处，再用12道移液器插入4个间隔摆放的枪头，从加液槽吸取检测用抗原，分两次与8个血清样品吹吸混合均匀，并涂布成直径约2cm的圆形液滴；在同一块玻板上同时设阴、阳性血清对照，操作方法同上；
49.步骤四，旋转玻璃板，使待检血清和抗原充分混合均匀，2min内可同时判定8个血
清检测结果。
50.步骤五，判读检测结果。待检血清样品与标准抗原若出现颗粒状凝集，则为阳性，反之阴性，二者之间视为可疑，具体判读方法参照sn/t 1222-2003标准。
51.上述实施例为本发明最佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。