石蜡组织切片的制备方法

文档序号:32994241发布日期:2023-01-17 23:57阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种石蜡组织切片的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将组织蜡块预冷;将预冷后的所述组织蜡块的待切面用水湿润;切湿润后的所述组织蜡块,形成具有湿润面的切片;将所述切片以所述湿润面直接与水接触的方式置于水面上以进行展片;将展片结束后的切片依次进行烤片、脱蜡、水化,制备水化后的切片;将水化后的切片在50℃~90℃的柠檬酸钠抗原修复液中加热处理2min~3min,制备经柠檬酸钠抗原修复液处理的切片;将所述经柠檬酸钠抗原修复液处理的切片冷却后用水清洗,制备清洗后的切片;及将所述清洗后的切片染色,制备石蜡组织切片。2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,在制备经柠檬酸钠抗原修复液处理的切片的步骤之前还包括:将柠檬酸钠抗原修复液加热至沸腾。3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述预冷的温度为0℃~4℃,所述预冷的时间为20min~30min。4.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法,其特征在于,所述将预冷后的所述组织蜡块的待切面水湿润的操作包括:采用水湿润的无尘纸巾或擦镜纸润湿所述组织蜡块的待切面。5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,采用苏木素-伊红染色法对切片进行染色,其中,苏木素染色液的染色时间为20s~30s。6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述采用苏木素-伊红染色法对切片进行染色的步骤包括:将清洗后的切片置于苏木素染色液中染色20s~30s,制备苏木素染色后的切片;在将所述苏木素染色后的切片漂洗后,浸泡于体积分数为0.1%盐酸酒精中分化3s~5s,制备分化后的切片;将所述分化后的切片置于水中返蓝,制备返蓝后的切片;及将所述返蓝后的切片置于无水乙醇中,再进行伊红染色处理,伊红染液中染色后,再进行漂洗,制得苏木素-伊红染色的切片。7.根据权利要求1~3、5和6任一项所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括将组织样本依次固定、脱水、透明、浸蜡及包埋以制备组织蜡块的步骤。8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,将组织样本固定的操作包括:将组织样本浸泡于固定液中固定24h~48h;及将固定后的组织样本冲洗,去除固定液。9.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述脱水的操作包括:将固定后的组织样本按照乙醇浓度由低到高的顺序依次浸泡于下述溶液中:体积分数为30%的乙醇溶液、体积分数为50%乙醇溶液、体积分数为75%乙醇溶液、体积分数为80%乙醇溶液、体积分数为95%乙醇溶液、体积分数为95%乙醇溶液,每种乙醇溶液的浸泡时间独立地为1h~2h;及将经体积分数为95%乙醇溶液处理后的组织样本采用无水乙醇浸泡2次。10.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述透明的操作包括:
将脱水后的组织样本按照透明剂浓度由低到高的顺序依次浸泡于含有透明剂的溶液中,所述透明剂包括二甲苯、苯、氯仿和正丁醇中的一种或多种。

技术总结
本申请涉及一种石蜡组织切片的制备方法,该方法包括以下步骤:将组织蜡块预冷;将预冷后的组织蜡块的待切面采用水湿润;切湿润后的组织蜡块,形成具有湿润面的切片;将切片以湿润面直接与水接触的方式置于水面上以进行展片;将展片结束后的切片依次进行烤片、脱蜡、水化,制备水化后的切片;将水化后的切片在50℃~90℃的柠檬酸钠抗原修复液中处理2min~3min,制备经柠檬酸钠抗原修复液处理的切片;将经柠檬酸钠抗原修复液处理的切片冷却后用水清洗,制备清洗后的切片;将清洗后的切片染色,制备石蜡组织切片。该制备方法能有效避免组织龟裂,制得的石蜡组织切片细胞结构完整且染色鲜明、清晰。清晰。清晰。


技术研发人员:王婷 何义培 程思 肖娜 程腊梅
受保护的技术使用者:中南大学
技术研发日:2022.11.11
技术公布日:2023/1/16
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