一种保健食品中西地那非的快速检测显色方法与流程

1.本发明属于食品检测技术领域，涉及保健食品中西地那非的快速检测显色方法。


背景技术：

2.西地那非又译昔多芬，是一种研发治疗心血管疾病药物时意外发明出的治疗男性勃起功能障碍药物，其副作用主要有头痛、背痛以及视力听力障碍，与硝酸酯类药物同时服用时会显著降低血压导致意识丧失甚至死亡等。因此，2012年3月中国国家食品药品监督管理总局发布的“食药监办保化[2012]33号”文件中明确禁止在保健食品中添加西地那非。
[0003]
目前，针对西地那非的检测手段主要集中在分光光度法、色谱法、光谱法、核磁共振法和免疫分析法
[1]
。不过这些方法需要专门的仪器，有些仪器还十分昂贵，同时所需的检测时间通常较长，这限制了对西地那非的快速检测。
[0004]
可视化的快速检测法，主要是基于待测试样与检测试剂之间发生颜色反应或沉降反应来实现。现有针对西地那非的可视化快速检测法还比较少，一般采用加硫酸加热至沸腾并加入高锰酸钾试液后，观察颜色反应来判断
[2]
。不过该方法由于需要加热硫酸，具有一定危险性，同时发生的颜色反应时间较短，容易造成识别失误。其它的方法还有通过三硝基苯酚溶液和硫酸溶液作为显色剂来进行快速检测(cn101587107a)，但该方法需要观察中间反应和最终反应结果进行综合判断，无法直接通过最终反应结果直接判断。总体来说，针对西地那非的可视化快速检测法还比较少且各种技术之间缺乏联系性，同时获得这方面检测技术的需求比较急迫。因此，如何获得一种操作简单、容易识别的、针对保健食品中西地那非的可视化快速检测技术，是一项具有挑战的研究课题。
[0005]
参考文献：
[0006]
[1]李萍,杨金易,张燕,曾道平,孙远明.保健食品中西地那非检测方法的研究进展[j].食品安全质量检测学报,2012,3(06):705-709.
[0007]
[2]庄瑞.补肾类中成药中西药成分的检识[j].中国实用医药,2008(06):91-92.


技术实现要素：

[0008]
针对现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一种可视化的、针对保健食品中西地那非的快速检测显色方法，用以克服现有技术通常需要专门检测仪器、存在安全风险或者易发生识别失误的不足。
[0009]
针对上述目的，本发明提供了如下方案：
[0010]
一种保健食品中西地那非的快速检测显色方法，所述快速检测显色方法包括如下步骤：
[0011]
(1)对样品用稀盐酸进行提取，取提取液；
[0012]
(2)将步骤(1)所得提取液加入到亚硝酸盐氮溶液中反应30～60秒，之后加入磷钼酸溶液中反应2～3分钟；如出现棕色沉淀物，则样品中含有西地那非。
[0013]
优选的，所述稀盐酸为体积分数为2～8％的盐酸水溶液。更优选的，所述稀盐酸为
体积分数为5％的盐酸水溶液。
[0014]
优选的，提取时将样品分散均匀，提取温度为25～35℃，提取时间为3～5分钟。
[0015]
优选的，亚硝酸盐氮溶液的浓度为100μg/ml；步骤(1)所得提取液与亚硝酸盐氮溶液的体积添加比为1:1。
[0016]
优选的，所述磷钼酸为体积分数为5％的磷钼酸水溶液。
[0017]
所述保健品的剂型包括丸剂、胶囊、片剂、颗粒剂中的任何一种。
[0018]
本发明的有益效果：
[0019]
1.本发明的操作简单，检测耗时可低至5～6分钟；
[0020]
2.本发明的准确性高，在已开展实验中准确率达到100％，检测灵敏度可以达到0.1mg；
[0021]
3.本发明方法安全性高，易于推广使用。
具体实施方式
[0022]
下面通过实施例对本发明进行具体描述，有必要在此指出的是以下实施例只是用于对本发明进行进一步的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员根据上述发明内容所做出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
[0023]
实施例1
[0024]
1.1本实施例实施地：
[0025]
贵州省食品检验检测院
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1.2实验原料
[0027]
稀盐酸水溶液：体积分数分别为2％、5％和8％，为贵州省食品检验检测院自有。
[0028]
磷钼酸水溶液：体积分数为5％，为贵州省食品检验检测院自有。
[0029]
亚硝酸盐氮溶液：购自南阳博奥华医生物科技有限公司，规格为100μg/ml。
[0030]
样品：补肾强身片(86批)、壮腰健肾丸(71批)、益肾灵颗粒(37批)、参茸三肾胶囊(92批)，均为市售所得。
[0031]
1.3检测方法
[0032]
样品制备：对于胶囊剂，取一粒胶囊，去除胶囊壳，作为样品；对于片剂，取一片，研磨成粉，作为样品；对于丸剂，取一丸，研磨成泥，作为样品；对于颗粒剂，取每次服用量的1/2，作为样品。
[0033]
检测过程：将样品加入体积分数为5％的稀盐酸水溶液，样品体积与5％的稀盐酸水溶液的体积比为2:3，于室温(25～35℃)下反应3分钟；之后按体积比1:1，加入到亚硝酸盐氮溶液中反应30秒，之后再按体积比2:1，加入体积分数为5％的磷钼酸水溶液中反应2分钟，观察是否出现棕色沉淀，如出现则判定含有西地那非。
[0034]
1.3实验结果
[0035]
如表1所示，86批补肾强身片中共有7批判定含有西地那非、71批壮腰健肾丸中共有5批判定含有西地那非、37批益肾灵颗粒中共有2批判定含有西地那非、92批参茸三肾胶囊中共有1批含有西地那非。
[0036]
对上述判定含有西地那非的样品采用hplc-ms/ms法检测，具体方法参考《hplc-ms/ms法同时测定保健食品中11种壮阳类非法添加》(朱燕燕,马桂娟,龚慧.hplc-ms/ms法
同时测定保健食品中11种壮阳类非法添加[j].食品工业,2020,41(01):315-318.)，发现均同样含有西地那非。这表明本发明的方法可以对含西地那非的保健品实现快速高效的检出。
[0037]
表1
[0038][0039]
1.4灵敏性检测
[0040]
西地那非标准品，购自德国dr.eh-renstorfer公司。
[0041]
精密称定西地那非10mg，加入5％盐酸水溶液溶解并稀释配置成0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.5mg/ml和1.0mg/ml溶液。按照1.3的方法依次加入亚硝酸盐氮溶液和磷钼酸水溶液反应，发现针对0.1mg/ml样品发生棕色沉淀反应，而针对0.05mg/ml样品未发生棕色沉淀反应，可知检测灵敏度为0.1mg/ml。
[0042]
实施例2
[0043]
参考实施例1，除了将检测方法中的稀盐酸水溶液的浓度调整为2％，提取时间为5分钟，与亚硝酸盐氮溶液反应时间为60秒，与磷钼酸的反应时间为3分钟之外，其余与实施例1一致。
[0044]
对实施例1中补肾强身片中7批含有西地那非的样品进行检测，发现7批样品均呈现棕色沉淀。
[0045]
实施例3
[0046]
除了将检测方法中的稀盐酸水溶液的浓度调整为8％，提取时间为3分钟，与亚硝酸盐氮溶液反应时间为45秒，与磷钼酸的反应时间为2.5分钟之外，其余与实施例1一致。
[0047]
对实施例1中壮腰健肾丸中5批含有西地那非的样品进行检测，发现5批样品均呈现棕色沉淀。