一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法与流程

本发明涉及一种中药制剂的检测方法，特别是一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法。

背景技术：

1、中医药治疗银屑病有着悠久的历史，银屑病在历代古籍记载曾有多个病名，如“干癣”、“银钱疯”，目前的公认病名是“白疕”。血瘀贯穿银屑病的始终，据此确立活血化瘀治疗银屑病的治则，现有技术中创建了“银屑灵”方。而银屑灵原方处方大、成分多、质量控制困难，开发难度较大，本发明人利用3个与银屑病发病环节及临床表现息息相关的动物模型开展药效筛选与评价，对“银屑灵”处方进行了优化，得到“芍苓方”。

2、“芍苓方”由赤芍、土茯苓、莪术、乌梅和肿节风五味药材经提取、浓缩、干燥，压制而成。方中以赤芍、土茯苓为君药，赤芍味酸苦性寒而归肝经，功能祛瘀凉血消斑，土茯苓味甘淡性平，入肝、胃经，功能健脾化湿，善去皮肤湿毒而止痒，与赤芍共为君药。莪术味辛苦性温，归肝、脾经，能入血破血，其气香性温又有助于行气，既能治血瘀之果又兼治血瘀之因，为治疗血瘀的专用药，在本方中既助赤芍祛瘀消斑，又制约其寒凉之性为臣药；乌梅味酸涩性平，归肝、脾、肺、大肠经，用以辅助君臣药解决银屑病血瘀不润则化燥引起的干燥瘙痒等次证；肿节风又名九节茶，味苦辛性平，归心、肝经，功效活血消斑通络。该药善入血分而活血消斑，而其味苦中带辛，则又有走表之能，故可用于引诸药直达皮肤病所，是为使药。全方共奏活血化瘀消斑，除湿解毒止痒之功效，以“化瘀而不耗血，养血而不助湿”为其组方特点，适合用于寻常型银屑病患者。

3、芍苓方主要用于治疗中度寻常型银屑，可改善和减轻患者的皮损症状、受累面积以及瘙痒症状；在安全性方面，患者血尿常规、肝功能、肾功能、凝血方面的医学检查未见不良事件发生，且不良事件分析中也未发现与药物相关的严重不良事件。因此，“芍苓方”对咪喹莫特类银屑病模型均具有良好的改善银屑病皮损、减轻炎症状态的作用，作用环节涉及抗角质细胞过度增殖、抗炎、调节免疫等多个环节，在药效相当的情况下，“芍苓方”选择性抑制th1细胞，提示与传统免疫抑制剂相比，“芍苓方”毒副作用较小；与已上市中成药郁金银屑片比较，芍苓片针对血瘀核心病理环节，不含毒性药物，疗效更佳且更安全可靠。

4、但是目前，“芍苓方”还未有科学合理的质量标准，该处方组成复杂，药材的质量优劣严重影响复方制剂的疗效。如何快速鉴别复方制剂中的药材质量，对提升产品质量具有重要作用。

技术实现思路

1、本发明的目的在于，提供一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法。本发明具有检测方法简单方便且稳定可靠，能有效确保产品质量的特点。

2、本发明的技术方案：一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法，所述中药制剂包括以下重量份数的原料：赤芍5～15份、土茯苓10～20份、莪术3～9份、肿节风10～20份和乌梅5～15份，所述检测方法包括采用薄层色谱鉴别中药制剂中的赤芍、土茯苓、肿节风和乌梅，以及采用高效液相色谱法测定赤芍中芍药苷的含量。

3、前述的一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法中，所述赤芍的鉴别方法为：取1g研磨后的中药制剂，加乙醇20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，加在聚酰胺柱上，用水洗至流出液无色后，通过液与洗脱液合并，蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；聚酰胺柱再用乙醇洗脱，收集洗脱液20ml，蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，溶液备用；另取赤芍对照药材0.5g，加乙醇10ml，振摇5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液各4μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以体积比为7∶2∶0.5的三氯甲烷-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。

4、前述的一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法中，所述土茯苓的鉴别方法为：取土茯苓对照药材1g，加乙醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5μl，土茯苓对照品溶液5～10μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以体积比为3∶6∶2：1的石油醚∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，放置5分钟后，置紫外光灯下检视。

5、前述的一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法中，所述肿节风的鉴别方法具体为：取肿节风对照药材2g，加石油醚30ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及供试品溶液各2～4μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以体积比为6∶2∶1的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视。

6、前述的一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法中，所述土茯苓和肿节风的供试品溶液均为赤芍鉴别中的备用溶液，或者土茯苓和肿节风的供试品溶液的制备方法为：取1g研磨后的中药制剂，加乙醇20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，加在聚酰胺柱上，用水洗至流出液无色后，再用乙醇洗脱，收集洗脱液20ml，蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液。

7、前述的一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法中，所述乌梅的鉴别方法为：取1g研磨后的中药制剂，加水15ml，超声处理15分钟，离心，取上清液，浓缩至9ml，加甲酸1ml，混匀，溶液加乙酸乙酯振摇提取二次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取乌梅对照药材1g，加水25ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml溶解，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以体积比为4∶2∶2的醋酸丁酯-甲酸-水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.04％溴酚蓝乙醇溶液，在日光下检视。

8、前述的一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法中，所述赤芍中芍药苷的含量测定方法为：以芍药苷对照品为对照，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a，以0.1％磷酸溶液为流动相b进行梯度洗脱，0～20min内，流动相a从14％到20％，流动相b从86％到80％；20～30min内，流动相a从20％到80％，流动相b从86％到20％；30～40min内，流动相a的比例为80％，流动相b的比例为20％；检测波长为230nm；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定。

9、前述的一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法中，所述对照品溶液的制备方法为：取经五氧化二磷减压干燥器中干燥36小时的芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，即得；供试品溶液的制备方法为：取0.5g研磨后的中药制剂，加入80％的甲醇30ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用80％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。本品每片含赤芍以芍药苷(c23h28o11)计，不得少于4mg。

10、前述的一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法中，所述中药制剂包括以下重量份数的原料：赤芍15份、土茯苓20份、莪术9份、肿节风20份和乌梅15份。

11、前述的一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法中，所述中药制剂包括以下重量份数的原料：赤芍9份、土茯苓15份、莪术6份、肿节风15份和乌梅6份。

12、前述的一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法中，所述中药制剂的制备方法为：取土茯苓加50％乙醇加热提取二次，第一次加土茯苓10倍量的乙醇，第二次加土茯苓8倍量的乙醇，每次提取1小时，滤过，合并醇液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.12～1.14的清膏，滤过，清膏与药渣备用；取赤芍、莪术、肿节风和乌梅，加水煎煮二次，第一次加10倍量水，浸泡1小时，煎煮1小时；第二次与土茯苓醇提后药渣合并，加10倍量水，煎煮1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.12～1.14的清膏，滤过，与土茯苓清膏合并，加二氧化硅，混匀，喷雾干燥，得干膏粉；干膏粉加预胶化淀粉与羧甲淀粉钠，混匀，90％乙醇制粒，70℃干燥，整粒，加预胶化淀粉、羧甲淀粉钠、二氧化硅与硬酯酸镁，即得。

13、前述的一种治疗寻常型银屑病血瘀证的中药制剂的检测方法中，所述中药制剂可制备成任何一种常规制剂，包括片剂、丸剂、胶囊剂、冲剂、口服液、喷雾剂、注射剂、混悬液和微球制剂。

14、与现有技术相比，本发明的有益效果为：

15、本发明本发明提供的茯苓方，包括赤芍、土茯苓、莪术、肿节风和乌梅，能够治疗寻常型银屑病血瘀证，并限定优化了赤芍、土茯苓、肿节风、乌梅的鉴别方法以及赤芍的含量测定方法。其中赤芍、土茯苓、肿节风、乌梅的鉴别方法具有准确度高、精密度高、回收率高、稳定性高、专属性强、重复性较好、无干扰等优点；赤芍的含量测定方法具有操作简单，成本低，检验时间短，同时具有分离效果好、灵敏、准确等优点。本发明能够有效的检测产品是否合格、质量是否优劣，保证了药效的一致性和质量的稳定性，进一步确保了产品质量的稳定以及临床用药的安全、有效。