曲安奈德新霉素贴膏的麝香草酚含量检测方法及质量控制方法与流程

本发明属于质量检测，特别涉及曲安奈德新霉素贴膏的麝香草酚含量检测方法及质量控制方法。

背景技术：

1、麝香草酚，又名百里酚，是一种常见的消毒防腐药，存在于植物百里香等的挥发油中，也可由对伞花烃或香茅醛或间甲酚等原料合成得到。麝香草酚的杀菌作用比苯酚强，且毒性低，具有抗菌、抗真菌、杀虫、抗氧化等作用，在医疗上被用作防腐剂、杀菌剂、肝功能试剂等。，在中国，含麝香草酚的药品以复方制剂为主，有曲安奈德新霉素贴膏、薄荷麝香草酚擦剂等。

2、曲安奈德新霉素贴膏为复方制剂，是由醋酸曲安奈德、硫酸新霉素、麝香草酚及其他辅料与天然橡胶等基质配制而成的一种橡胶膏剂，1979年由上海卫生材料厂研制，主要用于局限性神经性皮炎、慢性湿疹，也可用于小面积银屑病；可以看出，麝香草酚在曲安奈德新霉素贴膏中起到十分重要的作用。

3、对曲安奈德新霉素贴膏的质量控制，目前所遵循的是国家食品药品监督管理局国家药品标准ws-10001-(hd-1079)-2002-2006。该标准对曲安奈德新霉素贴膏质量的鉴别主要从以下三个方面实施：(1)取本品1片，在膏面上撒氧化钙约50mg，折成小块置坩埚中炽灼至炭化，放冷，加硝酸约1ml，煮沸，放冷；另取清洁干燥的试管，加1％的重铬酸钾硫酸溶液约1ml，转动试管，使溶液均匀涂于管壁上，然后将上述溶液移至试管内，微热并转动试管，溶液应不能再均匀涂于管壁上，而有类似油垢存在于管壁上。(2)取本品15片，加乙醚60ml分二次浸泡，第一次40ml，第二次20ml，使基质溶解，浸后的溶液并入分液漏斗中，剩下的布料再用12ml水浸渍，将浸后的水倾入上述溶液中，轻轻振摇，分取水层，浓缩至约1ml，作为供试品溶液；另取新霉素标准品，加水制成每1ml中含20mg的溶液作为标准品溶液，照薄层色谱法(中国药典2000年版二部附录v b)试验，吸取上述两种溶液各3ml，分别点于同一硅胶h薄层板(硅胶h1.5g用0.25％羧甲基纤维素钠溶液6ml调浆制板)上，以甲醇-醋酸乙酯-丙酮-8.8％醋酸铵溶液(25︰15︰10︰40)为展开剂，展开后，晾干，在110℃干燥20分钟，趁热喷以10％次氯酸钠溶液，将薄层板于通风处冷却片刻，再喷碘化钾淀粉溶液(0.5％淀粉溶液100ml中含碘化钾0.5g)，立即检视：供试品溶液所显主斑点的颜色和位置应与标准品的主斑点相同。(3)分取上述水层溶液，显硫酸盐的鉴别反应(中国药典2000年版二部附录iii)。

4、可以看出，现行标准主要对提取液的液体性状进行鉴定，以及对提取液中醋酸曲安奈德和硫酸新霉素进行定性鉴定。然而，曲安奈德新霉素贴膏中含有三种有效成分，现行标准却没有对其中麝香草酚的含量进行检测，导致其对曲安奈德新霉素贴膏的质量控制并不全面；同时现有技术中对橡胶膏剂中有效成分的提取大多采用回流提取及萃取法，然而回流提取及萃取法较为繁琐和复杂，而且提取效果也不尽然。

技术实现思路

1、本发明的发明目的是提供一种曲安奈德新霉素贴膏的麝香草酚含量检测方法及质量控制方法，该方法简便易实施，精密度高，重现性好，为曲安奈德新霉素贴膏的质量控制提供了新指标。

2、为实现上述发明目的，本发明的技术方案如下：

3、一种曲安奈德新霉素贴膏的麝香草酚含量检测方法，该方法包括以下步骤：

4、(1)将曲安奈德新霉素贴膏除去盖衬并剪碎，精密称定预设量后，置于容量瓶中，加入有机溶剂，振摇或超声以使待测品溶解；

5、(2)继续加入无水乙醇，边加边振摇使沉淀慢慢析出；

6、(3)继续加入与步骤(1)相同的有机溶剂定容至容量瓶刻度；

7、(4)离心，取上清液；

8、(5)采用气相色谱仪对步骤(4)所得的上清液进行检测。

9、本发明采用有机溶剂溶解膏体并无水乙醇沉淀橡胶的方法，有效且简便地从曲安奈德新霉素贴膏中提取出有效成分麝香草酚，并采用气相色谱法精密准确地测量提取液中麝香草酚的含量，为控制曲安奈德新霉素贴膏质量建立了严格的标准，有助于曲安奈德新霉素贴膏的质量控制、优化曲安奈德新霉素贴膏市场。

10、作为优选，上述的曲安奈德新霉素贴膏的麝香草酚含量检测方法的步骤(1)中，所述的有机溶剂包括氯仿、正庚烷、正己烷和乙醚中的至少一种。经试验，上述这四种有机溶剂均能够使膏体溶解并提取出麝香草酚。

11、作为优选，上述的曲安奈德新霉素贴膏的麝香草酚含量检测方法中，步骤(1)和(2)中，振摇或超声所需时间为25-35min。在该振摇或超声所时间下，膏体及麝香草酚能够全部溶解。

12、作为优选，上述的曲安奈德新霉素贴膏的麝香草酚含量检测方法中，有机溶剂和无水乙醇的体积比为(1.5-7)：1。

13、作为优选，上述的曲安奈德新霉素贴膏的麝香草酚含量检测方法的步骤(4)中，在10000r/min离心5min。

14、作为优选，上述的曲安奈德新霉素贴膏的麝香草酚含量检测方法包括以下步骤：

15、(1)将曲安奈德新霉素贴膏除去盖衬并剪碎，精密称定至一片贴膏的量后，置于50ml容量瓶中，加入25-35ml正庚烷，振摇或超声25-35min以使待测品溶解；

16、(2)继续加入5～15ml无水乙醇，边加边振摇使沉淀慢慢析出；

17、(3)继续加入正庚烷定容至容量瓶刻度，摇匀；

18、(4)10000r/min离心5min，取上清液；

19、(5)采用气相色谱仪对步骤(4)所得的上清液进行检测。

20、其中，步骤(5)中采用的气相色谱条件为：

21、色谱柱：填料为(5％-苯基)-甲基聚硅氧烷的毛细管色谱柱；

22、载气：氮气；

23、柱流量：2.0ml/min；

24、分流比：5:1；

25、进样量：1μl；

26、进样口温度：200℃；

27、检测器：氢火焰离子化检测器，工作温度为300℃；

28、柱温：①70℃下维持2min；②以10-20℃/min升温至200℃，并在200℃下维持2min；③以15-30℃/min升温至240℃，并在240℃下维持5min。

29、在该色谱条件下，本发明的方法对麝香草酚进行检测的检出限为0.4416μg/ml，定量限为1.104μg/ml，检测灵敏度高、准确度高，重现性好；检测过程中柱温逐渐升温，能够确保将目标化合物和杂质充分分离。

30、作为进一步优选，检测时的柱温为：

31、①70℃下维持2min；

32、②以15℃/min升温至200℃，并在200℃下维持2min；

33、③以20℃/min升温至240℃，并在240℃下维持5min。

34、本发明上述的曲安奈德新霉素贴膏的麝香草酚含量检测方法还包括制备对照品溶液的步骤，该步骤包括：用正庚烷溶解麝香草酚，获得浓度为2mg/ml的对照品母液；用体积比为42：8的正庚烷：无水乙醇混合溶剂梯度稀释对照品母液，获得系列对照品溶液。

35、本发明还提供了一种曲安奈德新霉素贴膏的质量控制方法，该质量控制方法即包括采用本发明上述的方法检测曲安奈德新霉素贴膏中麝香草酚含量的步骤，以所测麝香草酚含量作为质量控制的指标；当然还可以与其他指标合用。

36、与现有技术相比，本发明的有益效果体现在：

37、(1)本发明采用有机溶剂溶解膏体并无水乙醇沉淀橡胶的方法，有效且简便地从曲安奈德新霉素贴膏中提取出有效成分麝香草酚，并采用气相色谱法精密准确地测量提取液中麝香草酚的含量，为控制曲安奈德新霉素贴膏质量建立了严格的标准，有助于曲安奈德新霉素贴膏的质量控制、优化曲安奈德新霉素贴膏市场。

38、(2)本发明针对麝香草酚特异性设置了气相色谱条件，在该色谱条件下，本发明的方法对麝香草酚进行检测的检出限为0.4416μg/ml，定量限为1.104μg/ml，检测灵敏度高、准确度高，重现性好。