一种同时检测血脂和血糖的干化学测试卡及其制备方法与流程

本发明涉及生化指标检测，具体涉及一种同时检测血脂和血糖的干化学测试卡及其制备方法。

背景技术：

1、由于人们生活水平的提高，但却伴随着不良的饮食习惯和缺乏运动，导致中国人群的血脂及血糖水平逐步升高，高血脂、高血糖患病率明显增加。以胆固醇升高为特点的血脂异常是动脉粥样硬化性心血管疾病的重要危险因素，甘油三酯升高及高密度脂蛋白胆固醇降低也与疾病的形成密切相关，因此，血脂的代谢情况可以通过检测血液中胆固醇、甘油三酯及高密度脂蛋白胆固醇来判断。糖尿病患者血糖升高可改变红细胞对氧的亲和力，使组织与细胞缺氧，加速心血管并发症的形成，还可引起血脂和血黏滞度升高，是心血管疾病发生的重要因素，可以通过检测血液中葡萄糖含量进而判断患者血糖情况。因此，通过对血糖和血脂的联合检测可以了解患者血脂和血糖代谢情况，并及早发现心血管疾病及糖尿病的危险因素，给予有效预防。

2、目前，检测血液中血脂和血糖含量的方法包括液体试剂法和干化学法。液体试剂法与全自动生化分析仪配合使用，结果准确，但是生化分析仪需要专业技术人员操作，移动性差，检测成本高，从样本采集到出报告的检测时间长，同时需对全血样本进行离心等前处理，操作繁琐。干化学法是相对于湿化学法而言的，即将全血样本直接加到干燥试纸条上，以待测样本中的水分为溶剂引起特定的化学反应，从而进行项目含量检测的方法。因此，干化学法具备以下特点：样本用量少且无需预处理，操作便捷，费用低廉，在3min内即可出检验结果，适于在家庭、药店、社区医院等场所使用，对于监测血脂血糖水平以及波动情况更有优势。

3、目前对血脂和血糖同时进行检测的干化学测试卡，如公开号cn 104749228 a的中国专利公开了一种血脂血糖试纸条，液体试样在不同的反应垫上分别与检测血糖的酶和检测血脂的酶反应，产生电流，根据电流大小，分别得出液体试样中血糖和血脂的含量。另外，公开号cn 109580489 a的中国专利公开了一种血脂血糖芯片，所述扩散层设置有至少5个彼此间隔分布的溶液扩散单元和连通各溶液扩散单元的第一液体通道；所述溶液过滤单元与所述溶液扩散单元一一对应贴合；所述反应单元与所述溶液过滤单元一一对应贴合。所述反应层所含的反应单元包括彼此间隔分布glu反应单元、tc反应单元、tg反应单元、hdl反应单元和非ldl反应单元。所述芯片结构复杂，不利于批量化生产，市面上未见有销售。其他血脂血糖含量检测，为仅对血脂项目进行检测以及仅对葡萄糖项目进行检测，不能对血脂及血糖指标同时进行检测，比如公开号cn 112029821 a的中国专利公开了一种血脂测试卡，仅可检测人体血液中的总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇，以及公开号cn103266166 a的中国专利公开了一种葡萄糖检测试剂，仅可检测人体血液中的葡萄糖。

4、因此，目前市场上需要一种测试卡，通过一次加样实现对胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯以及葡萄糖四个项目，即对血脂和血糖的同时检测，适于在家庭、药店、社区医院等场所使用，实现对高血糖高血脂等慢性病的日常监测。

技术实现思路

1、为解决现有技术的不足，本发明的目的在于一种同时检测血脂和血糖的干化学测试卡，能够快速同时检测人体血液中关于血脂和血糖的四个项目，即胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯以及葡萄糖含量，实现一次末梢血采样即可完成四项检测，减少了操作环节，节省了人力及设备资源，提高检测效率，且检测项目之间互相独立，不互相干扰，能够保证检测结果的准确度。

2、为了实现上述目标，本发明采用的技术方案是：

3、一种同时检测血脂和血糖的干化学测试卡，包括压板、检测单元、底座，所述压板上设有加样孔，所述底座上设有四个检测孔、底座卡槽，所述检测单元固定在底座卡槽中，且压板设在所述检测单元上方，所述检测单元包括依次叠放的分散层、滤血层、辅助层、反应层以及支持层，所述辅助层与反应层整体分为四组且相互间隔，四组辅助层分别为胆固醇辅助层、高密度脂蛋白胆固醇辅助层、甘油三酯辅助层、葡萄糖辅助层，四组反应层分别为胆固醇反应层、高密度脂蛋白胆固醇反应层、甘油三酯反应层、葡萄糖反应层，所述四个检测孔与所述四组反应层对应。

4、所述检测单元的各层彼此接触，所述支持层上附着一层双面胶，用于将各层结构固定成一个整体；所述反应层粘贴于支持层之上，用于产生与检测项目浓度相关的颜色反应；所述辅助层贴合于所述反应层之上，用于去除样本中剩余的血细胞或者排除颜色反应中的干扰物质；所述滤血层贴合于所述辅助层之上，用于去除样本中大部分的血细胞；所述分散层贴合于所述滤血层之上，用于将样本均匀分散至整个检测单元。

5、优选地，所述胆固醇反应层包括胆固醇反应试剂，所述胆固醇反应试剂包括50-150ku/l的胆固醇酯酶、20-100ku/l的胆固醇氧化酶、200-1000ku/l的辣根过氧化物酶、0.1-5g/l的4-氨基安替比林、0.1-10g/l的显色物质、5-20g/l的稳定剂、0.1-5g/l的表面活性剂以及0.05-1mol/l的缓冲液；所述显色物质为n-乙基-n-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐、n-乙基-n-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐、n-乙基-n-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐、n-乙基-n-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺钠盐、3,3',5,5'-四甲基联苯胺、氯化硝基四氮唑蓝中的任意一种或多种；所述稳定剂为糖类蛋白稳定剂，所述糖类为蔗糖、海藻糖、乳糖、麦芽糖及果聚糖中的任意一种；所述表面活性剂为失水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯月桂醚、聚乙二醇辛基苯基醚、十二烷基硫酸钠中的任意一种或多种；所述缓冲液为磷酸盐缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸缓冲液、2-吗啉乙磺酸缓冲液、哌嗪-1,4-二乙磺酸缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液中的任意一种。所述胆固醇辅助层不含辅助试剂，用于去除样本中剩余的血细胞。

6、优选地，所述高密度脂蛋白胆固醇反应层包括高密度脂蛋白胆固醇反应试剂，所述高密度脂蛋白胆固醇反包括50-150ku/l的胆固醇酯酶、20-100ku/l的胆固醇氧化酶、200-1000ku/l的辣根过氧化物酶、0.1-5g/l的4-氨基安替比林、0.1-10g/l的显色物质、5-20g/l的稳定剂、0.1-5g/l的表面活性剂以及0.05-1mol/l的缓冲液。

7、优选地，所述高密度脂蛋白胆固醇辅助层包括去除非高密度脂蛋白胆固醇的试剂，所述去除非高密度脂蛋白胆固醇的试剂包括5-50g/l的聚阴离子、2-20g/l的二价金属离子；所述聚阴离子为磷钨酸及其盐、硫酸葡聚糖及其盐中的任意一种；所述二价金属离子为镁离子、亚铁离子、钙离子和锰离子中的任意一种。

8、优选地，所述甘油三酯反应层包括甘油三酯反应试剂，所述甘油三酯反应试剂包括100-500ku/l的脂蛋白脂酶、50-200ku/l的甘油激酶、50-150ku/l的甘油磷酸氧化酶、200-1000ku/l的辣根过氧化物酶、0.1-5g/l的4-氨基安替比林、0.1-10g/l的显色物质、5-20g/l的稳定剂、0.1-5g/l的表面活性剂以及0.05-1mol/l的缓冲液。所述甘油三酯辅助层不含辅助试剂。

9、优选地，所述葡萄糖反应层包括葡萄糖反应试剂，所述葡萄糖反应试剂包括100-250ku/l的葡萄糖氧化酶、200-1000ku/l的辣根过氧化物酶、0.1-5g/l的4-氨基安替比林、0.1-10g/l的显色物质、0.1-5g/l的表面活性剂以及0.05-1mol/l的缓冲液。所述葡萄糖辅助层不含辅助试剂。

10、一种同时检测血脂和血糖的干化学测试卡的制备方法，包括如下步骤：

11、步骤1：所述支持层上附着一层双面胶，将反应层粘贴于支持层上；

12、步骤2：配制胆固醇反应试剂、高密度脂蛋白胆固醇反应试剂、甘油三酯反应试剂、葡萄糖反应试剂；

13、步骤3：将所述反应试剂用点样机滴加在对应的反应层上，润湿后的反应层放入烘箱中干燥；

14、步骤4：配制高密度脂蛋白胆固醇辅助试剂；

15、步骤5：用所述高密度脂蛋白胆固醇辅助试剂浸渍高密度脂蛋白胆固醇辅助层，润湿后的高密度脂蛋白胆固醇辅助层放入烘箱中干燥，将辅助层置于反应层之上，所述胆固醇辅助层、高密度脂蛋白胆固醇辅助层、甘油三酯辅助层、葡萄糖辅助层与胆固醇反应层、高密度脂蛋白胆固醇反应层、甘油三酯反应层、葡萄糖反应层一一对应；

16、步骤6：将滤血层置于辅助层上，所述滤血层完全覆盖辅助层；

17、步骤7：将分散层固定于滤血层之上，从而将各层结构固定成一个整体，得到检测单元；

18、步骤8：将所述检测单元放置于底座中的卡槽中，所述胆固醇反应层、高密度脂蛋白胆固醇反应层、甘油三酯反应层、葡萄糖反应层与底座上的四个检测孔一一对应；

19、步骤9：最后将所述压板压入底座中，制得一种同时检测血脂和血糖的干化学测试卡。

20、现有技术相比，本发明的有益效果为：

21、(1)本发明公开了一种同时检测血脂和血糖的干化学测试卡，用于定量测定人体血液样本中血脂和血糖的含量，血脂项目有胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯，血糖项目指标为葡萄糖项目，实现了一条测试卡一次末梢血采样加样即可同时快速精准定量测定胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、葡萄糖四个项目，项目之间互相独立，不相互干扰，在3分钟内即可出检测结果，缩短检测时间，减少样品用量，提高检测效率和检测准确度。

22、(2)本发明的血脂和血糖检测试卡，与干式生化分析仪配套使用，操作简单、成本低、无需专业人员操作、无废液处理要求、快速诊断等优势，配套仪器小型，可随时移动，不受时间、地点的限制，能真正实现床旁诊断，适用于急救、急诊、家庭、药店、社区医院、门诊、体检中心等场所，是未来poct发展的必然趋势。