RALGDS截断蛋白在肺癌筛查中的应用的制作方法

本发明涉及体外诊断试剂领域，具体涉及ralgds截断蛋白在肺癌筛查中的应用。

背景技术：

1、肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率呈逐年上升趋势，目前发病率居世界首位，严重威胁着人类健康和生命。

2、肺癌是一种善于隐匿的疾病，经常在疾病发展到晚期才表现出临床症状，70～80％的肺癌患者在诊断出患有肺癌症状时已是中、晚期，癌细胞已经扩散，错过了最佳治愈时机，五年生存率低。对于早期的肺癌患者，经过及时治疗可大大提高患者的5年及以上生存率和生存质量。因此肺癌的早期诊断和进行有效的筛查至关重要。

3、因此，本领域迫切需要开发新的可用于肺癌早期诊断或筛查的生物标志物、检测试剂和检测技术。

技术实现思路

1、本发明的目的就是提供新的用于肺癌早期诊断或筛查的生物标志物、检测试剂和检测技术。

2、在本发明的第一方面，提供了一种anti-ralgds的检测试剂的用途，用于制备一检测剂/试剂盒，所述检测剂/试剂盒用于检测肺癌；其中，所述的检测试剂为ralgds截断蛋白。

3、在另一优选例中，所述的截断蛋白为非全长蛋白。

4、在另一优选例中，所述的ralgds截断蛋白长度l1与ralgds全长蛋白长度l0之比≦1/2，较佳地≦1/3，更佳地≦1/4。

5、在另一优选例中，所述的检测试剂为ralgds截断蛋白。

6、在另一优选例中，所述的检测试剂包括一种或多种ralgds截断蛋白。

7、在另一优选例中，所述的ralgds截断蛋白含有seq id no:2中以下片段：第1-90位、第1-211位、第1-390位、第210-390位、第621-951位、第611-914位、第621-765位、或第851-951位。

8、在另一优选例中，所述的ralgds截断蛋白含有seq id no:2中以下片段：第851-951位、第1-90位、第621-951位、或第611-914位。

9、在另一优选例中，所述的ralgds截断蛋白选自下组：

10、(y1)截断蛋白8，其氨基酸序列为ralgds蛋白第851-951位氨基酸；

11、(y2)截断蛋白1，其氨基酸序列为ralgds蛋白第1-90位氨基酸；

12、(y3)截断蛋白5，其氨基酸序列为ralgds蛋白第621-951位氨基酸；

13、(y4)截断蛋白6，其氨基酸序列为ralgds蛋白第611-914位氨基酸；

14、(y5)上述y1～y4的任意组合；

15、其中，ralgds蛋白的氨基酸序列如seq id no:2所示。

16、在另一优选例中，所述的ralgds截断蛋白包括：

17、(y2)截断蛋白1，其氨基酸序列为ralgds蛋白第1-90位氨基酸；

18、(y4)截断蛋白6，其氨基酸序列为ralgds蛋白第611-914位氨基酸；和

19、(ya)选自下组的任一截断蛋白、或其组合：

20、(y1)截断蛋白8，其氨基酸序列为ralgds蛋白第851-951位氨基酸；

21、(y3)截断蛋白5，其氨基酸序列为ralgds蛋白第621-951位氨基酸。

22、在另一优选例中，所述的ralgds截断蛋白包括：(y1)截断蛋白8，其氨基酸序列为ralgds蛋白第851-951位氨基酸；(y2)截断蛋白1，其氨基酸序列为ralgds蛋白第1-90位氨基酸；和(y4)截断蛋白6，其氨基酸序列为ralgds蛋白第611-914位氨基酸。在另一优选例中，所述的检测肺癌是检测待测样品中的anti-ralgds的水平。

23、在另一优选例中，所述的待测样品包括：血液样品、血浆样品和血清样品。

24、在另一优选例中，所述的肺癌患者是anti-ralgds抗体阳性患者。

25、在另一优选例中，所述的肺癌患者是男性患者或女性患者。

26、在另一优选例中，所述的检测试剂盒含有一说明书，所述说明书记载了检测方法。

27、在本发明的第二方面，提供了一种分离的人ralgds截断蛋白，所述截断蛋白选自下组：

28、(a1)seq id no:2中的第851-951位氨基酸的多肽；

29、(a2)seq id no:2中的第1-90位氨基酸的多肽；

30、(a3)seq id no:2中的第621-951位氨基酸的多肽；

31、(a4)seq id no:2中的第611-914位氨基酸的多肽。

32、在另一优选例中，其特征在于，所述截断蛋白是具有seq id no:1氨基酸序列的第851-951位氨基酸的多肽。

33、在本发明的第三方面，提供了一种分离的多核苷酸，其特征在于，其包含一核苷酸序列，所述核苷酸序列选自下组：

34、(a)编码如本发明第二方面所述截断蛋白的多核苷酸；

35、(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。

36、在另一优选例中，其特征在于，所述多核苷酸编码选自下组的多肽：

37、(a1)seq id no:2中的第851-951位氨基酸的多肽；

38、(a2)seq id no:2中的第1-90位氨基酸的多肽；

39、(a3)seq id no:2中的第621-951位氨基酸的多肽；

40、(a4)seq id no:2中的第611-914位氨基酸的多肽。

41、在另一优选例中，所述多核苷酸的序列为seq id no:1中相应的编码序列。

42、在本发明第四方面，提供了一种载体，其特征在于，它含有本发明第三方面所述的多核苷酸。

43、在本发明的第五方面，提供了一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它含有权利要求7所述的载体，或者基因组中整合有本发明第三方面所述的多核苷酸。

44、在另一优选例中，所述的宿主细胞为原核细胞或真核细胞。

45、在另一优选例中，所述的宿主细胞为大肠杆菌或酵母。

46、在本发明的第六方面，提供了一种ralgds截断蛋白的制备方法，其特征在于，该方法包含：

47、(a)在适合表达的条件下，培养本发明第五方面所述的宿主细胞；

48、(b)从培养物中分离出所述的ralgds截断蛋白。

49、在本发明的第七方面，提供了一种试剂盒，所述的试剂盒含有：

50、(a)第一容器，以及位于第一容器中的anti-ralgds的检测试剂，所述的检测试剂为ralgds截断蛋白；

51、(b)一说明书，所述说明书记载了检测方法。

52、在另一优选例中，所述检测方法是检测待测样品中的anti-ralgds抗体的水平，并用于肺癌的早期筛查或辅助性诊断。

53、在另一优选例中，所述的待测样品包括：血液样品、血浆样品和血清样品。

54、在另一优选例中，所述的ralgds截断蛋白选自下组：

55、(y1)截断蛋白8，其氨基酸序列为ralgds蛋白第851-951位氨基酸；

56、(y2)截断蛋白1，其氨基酸序列为ralgds蛋白第1-90位氨基酸；

57、(y4)截断蛋白6，其氨基酸序列为ralgds蛋白第611-914位氨基酸；

58、或其组合。

59、在本发明的第八方面，提供了一种用于肺癌检测的检测试剂，所述的检测试剂为ralgds截断蛋白，并且所述的ralgds截断蛋白包括：

60、(y2)截断蛋白1，其氨基酸序列为ralgds蛋白第1-90位氨基酸；

61、(y4)截断蛋白6，其氨基酸序列为ralgds蛋白第611-914位氨基酸；和

62、(ya)选自下组的任一截断蛋白、或其组合：

63、(y1)截断蛋白8，其氨基酸序列为ralgds蛋白第851-951位氨基酸；

64、(y3)截断蛋白5，其氨基酸序列为ralgds蛋白第621-951位氨基酸。

65、在另一优选例中，所述的ralgds截断蛋白包括：(y1)截断蛋白8，其氨基酸序列为ralgds蛋白第851-951位氨基酸；(y2)截断蛋白1，其氨基酸序列为ralgds蛋白第1-90位氨基酸；和(y4)截断蛋白6，其氨基酸序列为ralgds蛋白第611-914位氨基酸。

66、在本发明的第九方面，提供了一种本发明第七方面所述的试剂盒或本发明第八方面所述检测试剂的用途，其特征在于，用于制备试剂盒，所述试剂盒用于通过检测待测样品中的anti-ralgds的水平对肺癌进行早期筛查或辅助性诊断。

67、在另一优选例中，所述的待测样品包括：血液样品、血浆样品和血清样品。

68、应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。