一种盐酸R-氯胺酮有关物质的检测方法与流程

本发明属于医药分析，具体涉及一种盐酸r-氯胺酮有关物质的检测方法。

背景技术：

1、盐酸氯胺酮是由盐酸r-氯胺酮和盐酸s-氯胺酮组成的外消旋混合物，具有麻醉、镇痛、抗抑郁、抗惊厥、神经保护以及诱发精神异常等多项药理作用。研究表明，r-氯胺酮在抑郁症动物模型中表现出比s-氯胺酮具有更强和更持久的抗抑郁作用，且r-氯胺酮无明显精神类药物的副作用和滥用潜力，极具开发价值。

2、盐酸r-氯胺酮(arketamine hydrochloride)，化学名称为(2r)-2-(2-氯苯基)-2-(甲氨基)环己酮盐酸盐，结构式如下：

3、

4、目前，关于盐酸r-氯胺酮有关物质的检测方法鲜有文献报道，仅有中国药典(chp)、欧洲药典(ep)、美国药典(usp)及英国药典(bp)收载的盐酸氯胺酮有关物质检测方法供参考，但药典的检测方法存在较大缺陷，不能够分离检测出所有盐酸r-氯胺酮有关物质，且杂质保留时间短、响应弱，无法保障盐酸r-氯胺酮的质量和安全性。

5、有关物质研究是药品质量研究中极其重要的项目，其含量不仅直接反应药品纯度，还具有重要的安全意义。为了保证盐酸r-氯胺酮制剂安全有效，需要对原料药的有关物质进行研究、检测和控制，根据本品的合成工艺路线，有关物质主要是生产过程中的中间体、反应副产物和降解产物等。

6、本发明在现有技术基础上开发了一种新的盐酸r-氯胺酮有关物质的检测方法，可实现对盐酸r-氯胺酮中杂质的定位定量研究，为盐酸r-氯胺酮制剂的质量评估奠定了基础。

技术实现思路

1、本发明的目的是在现有技术的基础上，提供一种盐酸r-氯胺酮有关物质的检测方法，该方法检出的杂质多，主成分与各杂质在该流动相体系中的保留能力较强，峰响应较高，且各化合物间均能有效分离，从而能够较好监控盐酸r-氯胺酮中有关物质的含量。

2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、一种盐酸r-氯胺酮有关物质的检测方法，该检测方法采用高效液相色谱法，色谱柱为c18柱，以磷酸盐缓冲液-乙腈作为流动相进行梯度洗脱，所述磷酸盐缓冲液的ph值为7～8，优选ph值为7.3～7.7，所述有关物质包括以下物质：

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5、进一步地，本发明中所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱，优选为shimadzu shim-pack gist c18柱，色谱柱规格为4.6×150mm，5μm。

6、进一步地，所述色谱条件包括：检测波长：210～220nm，流速：0.8～1.2ml/min，柱温：25～35℃，进样量：10～50μl，进样器温度：2～15℃；

7、优选地，检测波长：213～217nm，流速：0.9～1.1ml/min，柱温：27～32℃，进样量：15～25μl，进样器温度：5～10℃；

8、优选地，检测波长为215nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃，进样量为20μl，进样器温度为8℃。

9、进一步地，所述磷酸盐缓冲液含三乙胺体积浓度0.01％～0.1％；优选地，所述磷酸盐缓冲液含三乙胺体积浓度为0.05％。

10、进一步地，所述磷酸盐缓冲液ph值为7.5。

11、进一步地，所述磷酸盐选自磷酸氢二铵、磷酸氢二钾的一种或多种的混合物，优选磷酸氢二铵。

12、进一步地，所述流动相a中磷酸盐缓冲液与乙腈的体积比为(70～90):(10～30)，优选(78～82)：(18～22)；流动相b中磷酸盐缓冲液与乙腈的体积比为(10～30):(70～90)，优选(18～22)：(78～82)。

13、进一步地，所述流动相a中磷酸盐缓冲液与乙腈的体积比为80：20；流动相b中磷酸盐缓冲液与乙腈的体积比为20：80。

14、进一步地，检测步骤包括：

15、(1)溶液配制：分别配制空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液和对照溶液；

16、(2)测定方法：待系统稳定后，分别进样空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液和对照溶液，记录色谱图。

17、进一步地，一种盐酸r-氯胺酮有关物质的检测方法：

18、所述空白溶液为流动相a；

19、所述系统适用性溶液：取盐酸r-氯胺酮和杂质a、b、c、d、e、f对照品适量，置于容量瓶中，加空白溶液溶解并稀释至刻度，摇匀；

20、所述供试品溶液：取供试品适量，置于容量瓶中，加空白溶液溶解并稀释至刻度，摇匀；

21、所述对照溶液：取供试品溶液适量，置于容量瓶中，加空白溶液稀释至刻度，摇匀。

22、进一步地，所述流动相梯度洗脱程序如下

23、 时间(分钟) 流动相a(％体积) 流动相b(％体积) 0 70-90 10-30 30 20-40 60-80 35 20-40 60-80 36 70-90 10-30 45 70-90 10-30

24、优选地，所述流动相梯度洗脱程序如下

25、 时间(分钟) 流动相a(％体积) 流动相b(％体积) 0 80 20 30 30 70 35 30 70 36 80 20 45 80 20

26、。

27、进一步地，所述的检测方法用于检测盐酸r-氯胺酮原料药或制剂中有关物质的用途。

28、有益效果

29、采用本发明的技术方案，优势如下：

30、(1)本发明采用的流动相体系能够有效提高主成分及各杂质的保留能力，且各成分响应较高，峰型较好，解决了盐酸r-氯胺酮及其杂质在一般缓冲盐流动相体系中保留能力弱，响应低和峰型差的难题，能够有效地检出盐酸r-氯胺酮中有关物质，对盐酸r-氯胺酮的质量监控具有重要意义。

31、(2)本发明采用色谱条件中进样器控温的方法，解决了杂质a在高水相溶剂中易水解的问题，同时避免了使用高有机相作为溶剂，样品溶液进入液相色谱仪后出现的溶剂效应对杂质检测的影响。